毕业论文(设计)-香蕉枯萎病产几丁质酶生防菌的筛选与鉴定

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1、海南大学毕业论文(设计)题H:香蕉枯萎病产几丁质酶牛防菌的筛选与鉴定学号:姓名:年级:学院:系另0:专业:指导教师:完成日期:一年一月一日摘要本实验筛选和鉴定出具有较强活性的、对香蕉枯萎病病原菌有一定抑制作用的产儿丁质酶的生防菌。从病土中分离得到的菌株92株,通过儿丁质培养基的筛选,得到具有产香蕉枯萎病儿丁质酶活性的菌株22株。将这22株菌株与香蕉枯萎病病原菌进行拮抗活性测定,通过对峙实验的效果比对和数据分析从中筛选出拮抗效果最强的7株菌株,分别为G・l、G・9、T・6、G・4、T・4、T・9、G-7,对这7株菌株进行测序和Blast比

2、对分析,确定了这7株菌株分别为:Unculturedachromobacter^Achromobacterxylosoxidans^BacillusamyloliquefaciensCorynesporacassiicola、CorynesporacassiicolaCorynesporacassiicola和Corynesporacassiicola关键词香蕉枯萎病菌;生防菌筛选;几丁质酶;分子鉴定AbstractThescreeningandidentificationofstrongactivityofBananaFusarium

3、wilt,pathogenhascertaininhibitionofBiocontrolBacteriumProducingchitinase.Fromthediseasedsoilinthestrainwasisolatedin92strains,bychitinmediumscreening,withproductionofBananaFusariumwiltchitinaseactivitystrainsfrom22strainsof.The22strainsofBananaFusariumwiltpathogenswerean

4、tagonisticactivitydetermination,confrontationbetweentheexperimentalresultscomparisonandanalysisofdatafromthescreenedantagonisticeffectwasstrongestamong7isolates,respectively,G-l,G-9,T-6,G-4,T-4,T-9,G-7,onwhich7strainsweresequencedandBlastanalysis,detenninewhichofthe7stra

5、inswere:Unculturedachromobacter、Achromohacterxylosoxidans,Bacillusamyloliquefaciens,Corynesporacassiicola,Corynesporacassiicola,CorynesporacassiicolaandCorynesporacassiicola.Keywords:BananaFusariumWilt;Screeningofbiocontrolbacteria:Chitinase;Molecularidentification2.材料与方

6、法2.1实验仪器与设备-6--6-2.1.1仪器2.1.2试剂2.2材料-6-2.2.1土样来源6-2.2.2培养基-7-2.2.3香蕉枯萎病病原菌-7-2.3菌种筛选方法7-2.4胶体几丁质制备-7-2.5对病原真菌拮抗活性测定8-2.6生防细菌的鉴定-8-2.6.1细菌DNA提取方法8-2.6.216S引物的选择与合成9-2.6.316S的PCR扩增条件-9-2.6.416S的PCR反应体系9-2.6.5PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测10-2.6.6送样测序和Blast比对10-2.7生防真菌的鉴定10-2.7.1真菌DNA提取方法

7、10-2.7.2ITS引物的选择与合成11-2.7.3ITS的PCR扩增条件11-2.7.4ITS的PCR反应体系11-2.7.5PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测-12-122.7.6送样测序和Blast比对12-3结果与分析2.1产几丁质酶菌株的筛选12-3.1.1产酶菌株在几丁质刚果红培养基上的降解效果12-2.1.2生防菌筛选对峙实验14-3.2PCR产物的电泳检测15-3.3各菌株DNA序列与Blast比对16-2.3.1G1菌株的16S特异性序列与Blast比对结果16-2.3.2G9菌株的16S特异性序列与Blast比对结果1

8、8-2.3.3T6菌株的ITS特异性序列与Blast比对结果19-2.3.4G4菌株的16S特异性序列与Blast比对结果21-2.3.5G7菌株的16S特异性序列与Blast比对结果-22-2.3.6T4

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