抗香蕉枯萎病菌内生放线菌的筛选及其防效研究

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1、：００１５学校代码：１０５８９学号１４０９５１０２２１分类号：：密级涤去大營硕士学位论文题目：抗香蕉枯萎病菌内生放线菌的筛选及其防效研究：杨李玲作者指导老师：黄绵佳教授张锡炎研究员专业：园艺二〇一时间：六年Ｈ月ＳｃｒｅｅｎｉｎＥｎｄｏｈｔｉｃＡｃｔｉｎｏｍｃｅｓｇｐｙｙＡａｉｎｓｔＢａｎａｎａＦｕｓａｒｉｕｍＷｉｌｔａｎｄｇＥｆｆｅｃｔＳｔｕｄｉｅｓＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄｉｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌ

2、ｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔＦｏｒｔｈｅＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＢｙＹａｎＬ－ｎｇｉｌｉｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＨｕａｎｇＭｉａｎｊｉａ／ＺｈａｎｇＸｉｙａｎＭａｏｒ：ＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅｊＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｉｍｅ：Ｎｏｖｅｍｂｅｒ２０１６，海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明■本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中Ｂ经注明引用的内

3、容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年＂月ｊ日学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存：学校有权保、使用学位论文的规定，即。留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅学校可以为存在馆际合作关系兄弟髙校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索

4、，可以采用影印。、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文保密论文在解齊后遵守此规定。论文作者签名：导臓名：？？？曰曰期？年Ｈ月分曰曰期如，牌＂月４“”本人已经认真阅读ＣＡＬＩＳ高校学位论文全文数据库发布章程，同意将本人的学“”“”位论文提交ＣＡＬＩＳ高校学位论文全文数据库中全文发布，并可按章程中规定一年享受相关权益。同意论文提交后滞后：□半年：□：０二年发布。论文作者签名导簾名：褒这日期：年＂月）ｇ日日期：月日ｙ摘要一＇香蕉枯萎病是种由尖孢镰刀菌古巴专化型（Ｆ

5、ｗＭｒｆｗｗＯＡ＾ｓｐｏｒｗｍ／ｓｐ．ｃｗｉｅｍｅ）侵染引起的典型土传维管束病害，对我国香蕉产业造成严重危害，目前尚无有效的防治方法。以生防为主，结合抗病品种栽培的综合防治技术在生产上陆续取得成效，而筛选有效的针对香蕉枯萎病的拮抗菌株成为生防成功的关键因子。植物内生放线菌能产生多种具有生物活性的次级代谢产物，在植物病害生物防治一、新型杀菌剂开发等领域具备巨大潜力，是种极具开发价值的微生物资源。本文从我国云南药用密毛山梗菜植株中进行内生放线菌的分离，以尖ｓｃｗ６ｍｙｅ４Ｆ０Ｃ４孢镰刀菌

6、ｐ．，）为标菌进行结抗菌筛选，并根据形态特征、培养性状、生理生化特征、１６ＳｒＤＮＡ序列分析对其进行鉴定，同时对其发酵工艺条件参数进行优化，以期为菌株的推广应用提供技术支持和理论依据。主要实验研究结果如下：（１）内生放线菌的分离与筛选：采用稀释平板分离法，根据菌株在分离培养基上的菌落形态及颜色，纯化获得１２６株内生放线菌；经平板对峙培养法筛选，得到产－生抑菌圈直径较大的２株放线菌，ＤＪ１５。编号分别为，ＸＬＧ１（２）－菌株鉴定：将所获得的ＤＪ１５和ＸＬＧ１菌株的１６ＳｒＤＮＡ序列通过

7、ＥｚＴａｘｏｎ与ＧｅｎＢａｎｋ上登陆的序列进行基因序列相似性比对，得到２１株分别与菌株ＤＪ１５和－ＸＬＧ１同源性最高、且己定名的模式菌的序列信息，构建系统发育树，发现ＤＪ１５菌Ｔ株与ＮＢＲＣ１０１０００ＡＢ２４９９６２同源性最高．９６％（），可达９９；’ＴＸＬＧ－－１菌株与！順■？Ｍ３３８Ｍ１ＡＢ０２４４４１、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ（）Ｔｃｅｍ＾ＮＲＲＬＢ－／／ｗ／ｏ／２４９３（ＪＯＥＬ０１０００１０２）两株菌同源性最高，均为９９．０９％，且均一处于同分支。结合形态特征、培

8、养特征和生理生化特征比对，鉴定ＤＪ１５菌株为ｔｔｉ－ｔｔａｖｕｓＳｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｙａｅｎｓｓ，ＸＬＧ＼菌株为Ｓｒｅｏｍｙｃｅｓｃｄｈｄｏ。ｐｆｌ３ＤＪ－１（）内生放线菌的抑制活性：利用所获得的菌株１５，ＸＬＧ对供试的１１种植显示－物病原菌开展抑制实验，菌株ＤＪ１５ＸＬＧ１，结果，抑菌效果较广，对供试的１１种植物病原真菌菌丝的抑