香蕉枯萎病拮抗内生细菌的筛选、鉴定及其生防特性研究

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1、S/0姜大營硕士学位论文题目：香蕉枯萎病拮抗内生细菌的筛选、鉴定及其生防特忡研究作者胡振阳指导教师：张荣意教授专业：微生物学时间：二一五年五月ScreeningandidentificationofantagonisticendophyticbacteriaagainstbananafusariumwiltandstudyonitsbiologicalcontrolcharacteristicsAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinScienceByHuZhen-yangSupe

2、rvisor:ZhangRong-yiMajor:MicrobiologySubmittedtime:May,2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：曰期：年月曰学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件

3、和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以为存在馆际合作关系兄弟高校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：例泰导师签名曰期和⋯年夂月巧曰曰期年夕月曰本人已经认真阋读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交高校学位论文全文数据库”中文发布，并可按“章程”中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：口半年：—年：口二年发布。导师签名论文作者签名：例体啊曰期心年月▽曰日期：《年彳月〕摘要本研究对健康香蕉植株体内的内

4、生细菌进行了分离纯化，得到株内生细菌菌株。采用平板对峙法筛选出株对香蕉枯萎病具有强烈拮抗作用的菌株。通过生理生化、形态特征及序列同源性比较，鉴定均为枯草芽孢杆菌命名为、。菌株不同浓度的发酵滤液对的抑制试验表明，病原菌孢子萌发和菌丝生长受抑制程度与拮抗菌发酵滤液浓度呈正相关。随着发酵滤液浓度的增加，孢子从无抑制向轻度、中度、高度抑制过渡。病原菌菌丝末端膨大，菌丝破裂且分枝增多；采用不同处理方法研究菌株对香蕉枯萎病的防效，试验结果表明，接种致病菌前浇灌拮抗菌发酵液的防效显著高于同时接种的防效，同时接种的防效高于接种致病菌后浇灌拮抗菌发酵液的防效；菌株不同浓度的发酵滤液对香蕉枯萎病盆栽苗防

5、效试验结果表明，发酵液浓度为、、的防效之间无显著差异，选用浓度的发酵液即可达到较好的防治效果。拮抗菌株经抗药性诱导，获得了抗利福平的标记菌株。该标记菌株可进入香蕉植株组织，并在其中较好的定殖。随着时间的变化，标记菌株在香蕉植株内的定殖规律整体上呈现先减少，再增长，再减少至相对稳定的这样一个状态。为了获得最佳的发酵条件，提高的液体发酵水平，本研究在单因素试验优化基础上，采用设计确定葡萄糖、氯化铵、温度、为液体发酵水平的显著影响因素，通过最陡爬坡路径试验、设计和响应面分析法确定最优培养条件。试验结果表明，最优培养培养基为：葡萄糖，氯化铵氯化钙最适培养条件为：发酵温度°，摇床转速发酵时间。

6、在最佳培养条件下，液体发酵活菌数达。为了提高发酵液中的芽孢数量，采用单因素试验，通过液体摇瓶培养对菌株的芽孢发酵培养基和培养条件进行了筛选和优化。采用设计确定影响该菌芽孢产量的个主要因素：玉米粉、大豆饼粉、通过最陡爬坡路径试验、中心组合设计和响应面分析法确定最优培养条件。试验结果表明，菌株芽孢发酵的最适培养基为：玉米粉，大豆饼粉氯化钠；最适培养条件为：，摇床转速，温度°，发酵时间。在最优条件下发酵，菌株发酵液中的芽孢数量达到。关键词：内生细菌；香蕉枯萎病；生物防治；发酵条件Abstract63endophyticbacterialstrainswereisolatedandpurif

7、iedfromthehealthybananaplants,inwhich2antagonisticbacterialstrainsamongthemscreenedwithslabconfrontationmethod,hadfairlystronginhibitionefecttoBananasFusariumwilt.TheywereidentifiedasBacillussubtilisbasedonthemorphological,physiol