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1、红参膨化炮制实验研究【摘要】目的考察膨化炮制对红参有效成分人参皂昔的影响。方法运用膨化技术对红参进行膨化炮制,并与传统炮制品进行外观性状、TLC鉴别、含量测定比对实验。结果在相同提取次数下,膨化品采用单次分别提取10,20,30min的提取方法,生品采用单次提取2h的提取方法,实验中浸提的人参皂昔量之间无显著性差异(P>;o.05)o结论红参膨化炮制后,可显著缩短提取时间,提高其浸提效率。【关键词】红参;膨化炮制;人参皂昔红参性温,味甘而微苦,气浓香,具有大补元气、回阳固脱功效。阳气不足、冬季畏寒、四肢寒冷、肺虚咳嗽、脾虚久
2、泻久痢、老人早衰、妇女内分泌紊乱者宜选用之[1]。红参含多种成分,主要活性成分为人参皂昔。红参质地致密、坚硬,因此有效成分不易浸提。为此,笔者运用单螺杆挤压膨化机对红参进行膨化处理,继而采用乙醇回流法提取人参皂昔,对红参膨化前后人参皂昔进行了含量比较[2~4]。现报道如下。1材料1.1炮制品及制备红参生品,购自成都市荷花池中药材批发市场,经王盛民鉴定为五加科人参属植物PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根;红参膨化品,取红参,将其切片,粉碎,过1号筛(8〜10目),启动单螺杆挤压膨化机,用大米预热,有成型的膨化大米出来
3、后,改用红参,除去大米-红参交接的膨化部分,收集红参膨化饮片,备用。1.2仪器PH-42单螺杆挤压膨化机;旋转蒸发器RE-52,上海亚荣生化仪器厂;DK-S26型电热恒温水浴锅;KQ-100型超声波清洗器;日本岛津LC-20AHPLC仪;电子分析天平(德国,赛多利斯Sartorius,型号:BS224S)。1.3试剂高效液相使用甲醇(色谱纯,天津科密欧化学试剂公司),乙睛(色谱纯,美国Fisher公司),水为超纯水;其他所用试剂均为分析纯。1.4对照品为中国药品生物制品检定所提供(人参皂甘Rgl,批号110703-200424,
4、供含量测定用;人参皂昔Re,批号110754-200421,供含量测定用)。2方法与结果2.1形态比较见图1〜2及表1。图1生品形态图2膨化品形态表1红参膨化前后性状特征2.2提取工艺(乙醇回流法)将红参生品和膨化品粉碎,过40目筛,分别取10・0g,加8倍量70%乙醇,水浴回流提取,温度为85°C,合并提取液,回收乙醇,用10倍量蒸馆水溶解,用少量蒸馆水洗涤蒸馆瓶,再用乙瞇脱脂2次(60,30ml),合并到分液漏斗中,用水饱和正丁醇萃取3次(60,40,30ml),合并正丁醇萃取液。加入约1/2量的蒸馆水减压浓缩至干,残渣用甲
5、醇溶解,定容至5ml,作为供试品溶液,待用[5,6]。膨化前后提取时间及次数见表2。表2红参膨化前后提取时间及提取次数2.3TLC鉴别取人参皂甘标准品,称量人参皂昔Rgl5.03mg,人参皂昔Re5.00mg,用甲醇溶解,分别定容到5ml容量瓶中,作为标准品溶液。分别吸取提取次数为3次的4个供试品溶液,并与标准品溶液点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿:正丁醇:甲醇:水(13:10:10:8)10°C以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105X3加热至斑点显色清晰[7]。结果见图3。1.Rgl2.R
6、e3.2hx3次(生品)4.lOminx3次5.20minx3次6.30minx3次图3红参TLC图谱2.4人参皂甘的含量测定2.4.1色谱条件色谱柱为HypersilODS柱,规格4.0mmx200mm,类型C185nm,大连中汇达科学仪器公司;流动相为乙睛-0・05%磷酸(体积比19.7:80.3);柱温30°C;检测波长203nm;流速1.0ml/mino2.4.2标准曲线精密称取人参皂^Rgl对照品7.90mg,人参皂昔Re对照品5.90mg,置5ml容量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,待用(每毫升混合液含人参皂
7、昔Rgll.58mg/ml,人参皂昔Rel.18mg/ml).精密吸取混合对照品溶液1・0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0ml注入液相色谱仪进行测定,测得各峰面积结果见图4。以人参皂昔Rgl对照品溶液的浓度(mg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归方程为Y=3.3593x106X-90780,r=0.9999;以人参皂昔Re对照品溶液的浓度(mg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归方程为Y=3.3214x106X-65982,r=0・9999。表明人参皂昔Rgl在0.158〜1.580mg/ml范围内线性关系良
8、好;人参皂昔Re在0.118~1.180mg/ml范围内线性良好。2.4.3供试品溶液分别吸取“2.2”提取工艺中的供试品溶液各lml,加甲醇定容至5ml,经0.45ym微孔滤膜过滤,取续滤液作为人参皂昔含量测定用的供试品溶液。2.4.4含量测定取“2・4・3”