孙飞毕业论文修改版

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1、本科生举业论丈C设计丿亚硝酸盐对家兔肾脏组织结构和抗氧化功能题目:的影响姓名:孙飞学院:动物科学学院专业:动物医学专业班级:2011级(1)班学号:1222110114扌旨导教"帀:殷定忠职称:副教授2015年6月7日安徽科技学院教务处制亚硝酸盐对家兔肾组织结构和抗氧化功能的影响指导老师:殷定忠副教授扌商要:冃的:木实验旨在研究对家兔灌服亚硝酸盐后,亚硝酸盐对肾组织结构的损伤与超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含最变化之间的关系。操作方法是选择成年健康青紫兰家兔20只,随机分为4组,每组5只,分别为对照组(只供清洁饮水)、低剂量组(饮水中添加2mg/L的

2、亚硝酸钠)、中剂量组(饮水中添加8mg/L的亚硝酸钠)、高剂量组(饮水中添加16mg/L的亚硝酸钠)。连续灌服4周,颈部放血致死。制作肾组织切片,测定超氧化物歧化酶活性,丙二醛浓度。结果表明:观察肾脏组织切片对以得出较低浓度的亚硝酸盐对肾脏组织损伤不明显,随着亚硝酸钠浓度的加大,肾脏组织的损伤越來越严重。测定肾脏组织中SOD活性和MDA浓度变化得出对照组与低剂最组之间的SOD和MDA含最差异不显苦(P>0.05),但与中等剂量组和高剂量组中的SOD和MDA含量极显著(P〈0.01),据此我们可以得出,大剂量的亚硝酸钠能显著降低家兔肾脏组织中的SOD含量,增加丙二

3、醛的浓度。关键词:亚硝酸盐;家兔;肾组织结构;超氧化物歧化酶;丙二醛亚硝酸盐作为自然界中常见的化学物质,广泛分布与动植物和土壤中,在食物如蔬菜,肉制品,豆类,鱼类屮都天然含冇微量的亚硝酸盐,一些腌制的食品如泡菜、腌肉屮亚硝酸盐的含量更高。亚硝酸盐又叫做工业用盐,除用于工业用途外,还作为一种食品添加剂使用,用于食品发色和防腐。虽发生过一些关于亚硝酸盐的食品安全事件,但是只要严格控制在合理剂量,不会对人体造成危害人类对硝酸盐和亚硝酸盐的研究历程十分曲折,从用于食品着色到存在致癌风险再到维持体内一氧化氮平衡,心血管系统的保护和抗菌作用。随着科学技术的发展和研究的不断深

4、入,人类对亚硝酸盐的认识也越来越全而⑵。机体细胞内部的活性氧如超氧根离了((¥)过氧化氢(II心)过氧化物门由基(R00)等能够导致细胞膜磷脂双分子层的机构改变,蛋白质的变性,DNA链的断裂从而导致细胞变性损伤或者衰老。MDA也是膜脂氧化的最终产物之-,能够影响体外线粒体呼吸链复合物即线粒体内关键酶的活性,会引起机体细胞内蛋口质、核酸等大分子发生交联聚合,具有细胞毒性。因此我们可以通过测定MDA的含量来了解膜质过氧化的程度⑶。SOD是有机体内存在的一种抗氧化酶,能够催化活性氧口由基发生歧化反应,保证机体的氧化与抗氧化反应维持在一个平衡的水平。防止细胞内还原物质如

5、维生索E、维生索C、二价铁离子的氧化防止机体细胞衰老、损伤、破坏等方面有着不可替代的作用if。近年来的研究表明超氧化物歧化酶在病理学、抗肿瘤、抵抗辐射等等方面都有广阔的研究意义⑹。皇甫超申㈤的研究表明,在机体发生炎症反应时摄入大量亚硝酸钠后,由于白细胞激活的原因,细胞的耗氧量加大,其利用一氧化氮合成酶催化将产生大量的一氧化氮,大量的一氧化氮作为自由基,可以攻击细胞,使细胞发生损伤⑻。NOJ结合线粒体复合物影响正常细胞磷酸化释放能量⑼。NO?具有一定的的氧化能力,而近年来人们对于亚硝酸盐的研究主要是亚硝酸盐与癌症的关系。对于N0「与SOD之间的关系和对肾脏的损伤机

6、理,相关的研究成果却不多,木实验则重点研究亚硝酸盐对兔肾脏损伤机理与细胞内SOD的含量变化,以此探讨二者Z间的关系。1材料与方法1.1试验时间与地点实验时间为二零一五年三月至二零一五年五月,实验地点为安徽科技学院动物科学实验室。1.2实验动物来源和处理随机选取体形大小,健康情况无明显差异。同一饲养环境下的青紫蓝家兔20只。所需的青紫蓝家兔均来自安徽科技学院动物房。1.3试验材料1.3.1试验主要仪器设备及材料离心机(TDY80-2B).电子天平(上海天平仪器厂,FA1004).恒温水浴锅(编号为20030190)、微量移液枪、组织切片机1.3.2试验药品亚硝酸钠

7、合肥工业大学化学试剂厂批号0030701。SOD试剂盒,批号:20070810,购于南京建成生物工程研究所;MDA试剂盒,批号:20070810,购于南京建成生物工程研究所;1.4试验设计选择成年健康家兔20只,随机分为四组,每组5只。分别为对照组(饮水)、低剂量组(饮水中添加2mg/L的亚硝酸钠)、中剂量组(饮水中添加8mg/L的亚硝酸钠)和高剂量组(饮水中添加16mg/L的亚硝酸钠),连续灌服4周。在笫4周末,颈部放血致死,取部分肾脏组织制作组织切片,另取5g肾脏加入5ml生理盐水捣碎研磨,离心2500rmin,5min,提取上清液,装入样品管中-2(rc待

8、用。1.5试验方法1・5

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