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《黄谊生物技术日本七鳃鳗基因重组蛋白rLj-RGD3对Hela细胞的抑制作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、LiaoningNormalUniversity（2010届）本科生毕业论文（设计）目:日本七鲍鳗基因重组蛋白rLj-RGD3对Hela细胞的抑制作用学院：生命科学学院专业：生物技术班级序号：4班28号学号：20061811010102学生姓名:黄谊指导教师：王继红2010年5月中文摘要（关键词）1英文摘要（关键词）11前言12材料与方法42.1材料42・2方法42.2.1细胞培养42.2.2MTT法检测重组蛋白对碱性成纤维生长因子（bFGF）诱导的Hcla细胞增殖的抑制作用42.2.3Hela细胞凋亡的诱导42.2.4DNAladder的
2、测定52.2.5Hela细胞的黏附实验52.2.6Hela细胞的迁移实验52.2.7Hela细胞的侵润实验63结果63.1菌体蛋白的表达63.2重组蛋白的部分生物活性73.2.1对bFGF诱导下的Hela细胞增殖的抑制作用73.2.2Hela细胞凋亡的诱导73.2.3DNAladder的检测83.2.4rLj-RGD3对Hela细胞粘附的影响83.2.5rLj-RGD3对Hela细胞迁移的影响93.2.6rLj-RGD3对Ilela细胞浸润的影响104讨论105结论11参考文献11致谢14日本七鲤鳗基因重组蛋白rLj-RGD3对Hela细胞
3、的抑制作用摘要:为了确定七鲍鳗口腔腺重组蛋口rLj-RGD3的抗肿瘤活性，确定其生物学地位及意义，以人宫颈癌Hela细胞作为模型对其活性进行了研究。釆用MTT法检测不同浓度rLj-RGD3对bFGF诱导下的Hela细胞增殖的抑制作用，结果表明rLj-RGD3能显著抑制Hela细胞的增殖，IC50为2.6
4、imol/lorLj-RGD3作用后的Hela细胞经Hoechst染色及DNAladder检测结果显示，细胞均发生调亡。rLj-RGD3对Hela细胞黏附玻连蛋fl(VN)作用的实验结果为有效抑制。采用Transwcll细胞培养板对bFGF
5、诱导下的Hela细胞迁移实验表明，rLj・RGD3能够抑制Hela细胞的迁移，且抑制率达73%。采用人工基质膜基质Matrigel及Transwell模仿体内坏境研究rLj-RGD3对Hela细胞侵润实验显示，以bFGF为趋化剂的Hela细胞穿透Matrigel的侵润行为明显受到抑制。以上研究表明,rLj-RGD3具有典型的RGD毒素蛋白的功能，有望应用于抗肿瘤基因工程药物开发，具有重要的生物学意义。关键词：七鳏鳗；RGD模体；整合素；基因重组；抗肿瘤TheinhibitiveeffectofrecombinantproteinrLj-RG
6、DfromiMinpetrajaponicaonHelacellsAbstract:Inordertomakesureoftheanti-tumoractivityandthebiologicalsignificanceofrecombinantproteinrLj-RGD3fromthesalivaglandofLampetrajaponica,weuseHelacellsasthemodelforresearch.WiththemethodofMTT,weexaminedtheinhibitiveeffectofdifferentcon
7、centrationsofRGD3ontheproliferationofHelacellsinducedbybFGF,andtheresultsshowedthatrLj-RGD3caninhibittheproliferationobviously.Besides,afterHoechstcolorationandtheexaminationbyDNAladder,theHelacellsprocessedbyrLj-RGD3of2.6
8、imol/lwereallapoptosis,andrLj-RGD3caneffectivelyin
9、hibitHelacclls^adhcrcncctovitronectin・ItisalsoshownthatwithTranswcllccll-culturingplate,rLj-RGD3caninhibitthemigrationofHelacellsinducedbybFGF,andtheinhibitionrateisevenupto73%・Theexperiment,inwhichartificialmatrixmembraneandmatrixwereusedtosimulatetheinvivoenvironmentforr
10、esearchoftheeffectofrLj・RGD3onHelacells5infiltration,showedthatwithbFGFasitschemotaxin,th
