柴胡皂甙d治疗狼疮性肾炎的实验研究

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1、中山大学硕士学位论文柴胡皂貳;d治疗狼疮性肾炎的实验研究姓名：王珍申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：徐安平20070528中药是我国医学资源的一大宝库，研究表明中药在机体免疫调节方面具有较大的优点，近些年来国内一些学者对LN应用中药进行了研究治疗，结果显示中药对LN的治疗在减少西药毒副作川、降低复发率、提高疗效等方面有很好的应用前景。而如能应用分子牛物学方法，阐明中药的作用机制，筛选冇效药物,必将使中医药治疗LN的研究达到更高水平。柴胡为常用中药，柴胡皂貳d（Saikosaponin.d,SSd）是从柴胡中活性皮质激素（Gc）样笛环结构，国内外很多研究表明其具有抗炎、免疫调节作

2、用，因此观察SSd对LN的疗效和探索其作用机理，具有重要的临床意义。研究目的本实验拟应用从中药柴胡中提取的活性成分SSd来治疗NZBWF1小鼠,观察动物尿排泄物、肾功能和血清皮质酮、血循环中自身抗体、肾组织病理改变以及肾组织中细胞因子表达等变化，在取得预期疗效的基础上，深入探讨SSd对LN治疗的作用机制，为SSd治疗LN提供实验和理论依据。材料和方法雌性NZBWFI小鼠，18周龄，20只，随机分为3组，1组（SSd治疗1组，n=8,每天腹腔注射（ip）SSd，剂量0・2rag/100g体重，浓度0.2.4mg/1009体重，浓度0•4¥总《2纟］!rF=6,每天ipSSd,剂量0mg

3、/m1）,I11组（空白对照组，n=6,每天ip无菌生理盐水1m1/1009体重），共6周，每两叢各组小鼠随机尿，于实验第6周末处死3组全部小鼠，取血及肾组织标本。用考马斯亮蓝法检测小鼠尿蛋白,自动生化分析仪测定小鼠血清肌酹（cr）,酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定小鼠血清中抗ds.DNA抗体和皮质酮水平，对肾组织进行光镜、电镜和免疫荧光检查以观察肾组织学变化，并川逆转录.聚合酶链反应（RT-PCR）法检测细胞因子的变化，定期观察小鼠的精神、活动、皮毛、体重等状莎己•。结果与空白对照组相比，sSd治疗组的尿蛋白含量，血清肌酹和抗ds・DNA抗体以及小鼠肾组织IL.6和IL—10m

4、RNA表达显著降低，血清皮质酮水平显著升高，差异有统计学意义（PV0・05）；小鼠肾组织系膜增生、肾小球细胞增多，透明变性、肾小球硬化以及渗出得到改善，肾小管受损百分比降低，I呂G、IgA以及IgM等形成的免疫复合物沉积减少，电镜下沉积物减少，细胞增生减少，足突融合现象改善。小鼠体垂有所增高。结论1.SSd对NZEWF1小鼠LN有治疗作用：（1）降低尿蛋白含量；（2）降低血清肌酹水平；（3）降低血清抗ds.DNA水平；（4）改善肾小球、肾小管的损伤，减少免疫复合物的沉积；（5）使NZBWF!小鼠体重增加。2.SSd使NZBWFI小鼠血清皮质酮水平升高；肾组织1L.6和IL—10mRN

5、A表达减少。关键词：柴胡皂试d,狼疮性肾炎，治疗，小鼠StudyontheEffectsofSaikosaponindonLupusNephritisinMiceTheSecDepartmentofNephro1ogyndAffi1iatedHospita1ofSunYat—senUtyPostgraduate：WangZhenSupervisor：ProfessorXuAnpingSystemiclupuserythematrsus(SLE)isanautoimmunediseasecharacterizedbyaseriesofautoantibodies(autoAbs)pro

6、ducedbyimmunologicderangementwhichiscausedbymanyfactors,resu1tinginthelesionsofmultipleofsystemsandorgans・Itismorecmnlnoninchi1d—bearingperiodfemales,andithaspoorprognosisandharmsthehea1thofhuman・Lupusnephritis(LN)isthemostcommonc1inicalmanifestationofSLE.Thedegreeofrenallesionshasadirectimpact

7、ontheprognosisofSLE・LNandPr0gress•1verena1funeti0na11csions•1S0neof1themaincauscs0fdcath0fsLE.•TheeI10path0gen1s•1sandpath0genesis0fLN]1sn0tfu11yunderst00dwh•1ch•1nducestheduff•1cu1ty0fradicMcnre0fthisd■1(?ase.Atpresent10ts0fc1in•