柴胡皂甙d干预肺纤维化vegfpedf表达的实验研究

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1、江苏大学硕士学位论文柴胡皂甙d干预肺纤维化VEGF/PEDF表达的实验研究姓名：许清申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：郑金旭20120612江苏大学硕士学位论文摘要目的观察血管内皮生长因子(VEGF)／色素上皮衍生因子(PEDF)在博来霉素(bleomycin，BLM)诱导的小鼠肺纤维化过程中各时期的表达变化，以及柴胡皂甙d(saikosaponin．dSSd)干预后，对博来霉素致肺纤维化小鼠肺组织血管VEG聊EDF在不同时期表达变化的调节作用，并探讨其与抗肺纤维化作用的关系。方法将80只小鼠随机分为4组(各组n-20)，其中3组为BLM诱导肺纤维化

2、模型组(气管内注射BLM5mg／kg)，分别为单纯模型组(BLM组)，SSd大、小剂量组，造模后lh，后两组分别腹腔内注入SSd2．0mg／kg(O．2mL)，1．0mg／kg(O。2mL)，每天一次，连续28天，BLM每天注入同体积的生理盐水，另一组为正常对照组(Cont组)，分别于3，7，14，28天各组随机处死5只小鼠，取肺组织MASSON染色观察纤维化程度，样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量，免疫荧光观察PEDF、VEGF蛋白在肺内表达的规律，RT-PCR观察各时间点REDF,VEGFmRNA表达的强度。结果(1)MASSON染色模型组

3、、SSd组均呈纤维化逐渐进展的动态变化，第28天时，纤维化程度评分SSd大、小剂量组纤维化程度均较BLM组轻(P<0．01)，SSd组之间比较无明显差异；(2)HYP含量测定模型组、SSd组HYP含量随时间逐渐增加，到28天达高峰，7、14及28d时SSd大、小剂量组HYP含量也少于BLM组(P<0．01)，第14天及28天，大剂量SSd组HYP含量少于小剂量组(P<0．05)；(3)免疫荧光结果模型组、SSd组VEGF在时间上，在纤维化早期(3，7天)分布较多，空间上，在肺纤维化程度较轻的区域分布较多，在纤维化中后期(14，28天)以及肺纤维程度高的区域

4、分布较少，PEDF的分布随着时间推进逐渐增多，尤其在肺纤维化程度高的区域分布密集；(4)VEGF／PEDFmRNAPCR结果各模型组、SSd组VEGFmRNA从第三天开始升高，第7天达高峰，之后逐渐下降，28天到最低，SSd大、小剂量组各时点较BLM组VEGFmRNA水平降低，差异均有统计学意义(P

5、平升高，其中第7、14及28天差异均有统计学意义(P

6、血管内皮生长因子类博来霉素羟脯氨酸RNA，信使疾病模型，动物江苏大学硕士学位论文ABSTRACTObjectiveToinvestigatethedynamicexpressionsofVEGF／PEDFatdifferenttimepointsandimpactofsaikosapoin—d(SSd)ontheirexpressionsinpulmonaryfibrosismiceinducedbyBlemycinandtoexploretheanti-fibrosismechanismsofsaikosapoin-d(SSd)．MethodsEight

7、ymicewererandomlydividedintofourgroups：controlgroup(n=20)，modelinggroup(n=20)andtwotreatmentgroups(n=20，eachgroup)．Aftermodeling，everydaythemiceintreatmentgroupswereinjectedSSdintraperitoneallyatdifferentdosesuntilday28，namely，bigdosegroup(SSd2．0mg／kg)，smalldosegroup(SSd1．0mg／kg)，

8、WhiletheBLMgroupweregiventhesamev