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时间:2019-10-17
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1、《临床糖尿病的现代诊断和治疗》一书出版屮华内分泌代谢杂志1998年第5期第14卷消息【摘要】H的研究本室口制猪脑GAD是否能保护NOD鼠肌岛B细胞免遭破坏及其意义。方法在4周龄NOD鼠注射GAD,对照组注射等量牛血清白蛋白(BSA),分别于19周龄、25周龄和47周龄处死,胰腺纽织常规制成石蜡切片,ABC免疫组化染胰岛3细胞并光镜下计数。结果同周龄GAD组发生胰岛炎程度和胰岛炎评分均明显低于BSA组:同周龄GAD组胰岛B细胞计数明显高于BSA组,均有显著性差异(P<0.001);胰岛炎分值与胰岛B细胞阳性率存在密切负相关(P<0.001)o结论本室自制猪脑GAD能减轻NOD雌鼠胰岛炎的发
2、生和保护胰岛P细胞免遭破坏的作用。PreventionofinsulitisbyglutamicaciddecarboxylaseinNODmiceYangZhulin,ZhouZhiguang,WuHanwen,etal.InstituteofMetabolismandEndocrinology,HunanMedicalUniversity,Changsha,410011【Abstract]ObjectiveTostudywhetherporcinebrainglutamicaciddecarboxylase(GAD)purifiedinourlaboratorycanprotectP
3、cells.MethodsGADorBSA(control)wasinjectedintraperitoneallyintofemaleNODmiceatageof4weeksandtheywerekilledseparatelyat19th,25thand47thweek・Pancreatictissuesweremadeintoparaffinsectionsroutinely.TheisletPcellswerestainedbyABCimmunohistochemicalmethodandcountedundermicroscopy.ResultsBothincidenceand
4、scoringofinsulitisweresignificantlylowerinGADgroupthanthatinBSAgroupofthesameage.Thenumberof0cellsweresignificantlyhigherinGADgroupthaninBSAgroupofthesameage.Anegativecorrelationwasfoundbetweenscoreofinsulitisandnumberof卩cellsinislets(P<0.001).ConclusionThepocrinebrainGADpurifiedinourlaboratoryam
5、elioratesinsulitisandmitigatesthedamageofPcellsinisletsinNODmouse・【Keywords】NODmousePcellsGlutamicaciddecarboxylaseImmunohistochemistry(ChinJEndocrinolMetab,199&14:315・317)NOD小鼠(Non-obesediabeticmouse)是一种遗传性1型糖尿病的啮齿动物模型,其发病机理为T细胞介导的胰岛B细胞进行性破坏和数量减少(1)。国外学者近年发现1型糖尿病胰粘自身抗原一一谷氨酸脱竣酶(GAD)在预防NOD鼠胰岛炎及糖尿病
6、发生屮显示良好效果(2,3〕。本文应用自制猪脑GAD于NOD鼠,观察NOD鼠胰岛内B细胞计数及其意义。材料利方法一、材料NOD鼠从澳大利亚WEHI医学研究中心引进,山山西医科大学张志利教授捉供。木实验采川的NOD雌鼠群落在210天龄糖尿病自然发病率为70%o所有小鼠在标准饲养环境下喂养,向由饮净化水及全价营养颗粒饮食。二、方法25只4周龄NOD雌鼠分成GAD组和BSA组(对照组)。GAD组共15只,于4周龄腹腔内注射GAD2.4mU酶活性单位(100U1),分别于19周龄(6只)、25周龄(4只)和47周龄(5只)处死。BSA组共10只,于4周龄腹腔内注射BSAlmg(lOOul),分别
7、于19周龄(4只)和47周龄(6只)处死。处死后按常规取下胰腺后置10%屮性福尔马林液固定,常规制作石蜡切片,厚4卩m。GADrfl本所按文献方法制备(4),将新鲜猪脑粗提,HPLC层析分离,收集GAD酶活性峰,本所制备的GAD含两种同功酶(GAD65和GAD67),产品含蛋白质10mg/ml,含酶舌性单位24mU/mloBSA由上海第二I矢科大学生产。鼠抗人和动物胰岛索单克降抗体(1/100)、生物素标记羊抗鼠lgG(1/300)
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