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时间:2019-10-17
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1、XX集团养殖事业部动保中心疾病诊断流程近年来,我国规模化养殖业取得得突飞猛进的发展,然而畜禽病的发生和对规模化养殖场生产的危害亦日趋加重,特别是传染病,已成为严重影响我国规模化养殖业健康、稳定发展的主要因素。疾病的种类越来越多,多病原的混合感染已经成为当前畜禽传染性疾病流行的最主要特征之一,导致发病率和死亡率的显著上升,给养殖业带来巨大的经济损失,同时造成了病畜禽临床症状的不典型,为诊断带来了很大的难度,临床上我们已经很难简单地将几个症状组合起来就判定是何种疾病。例如与猪呼吸道综合症(PRDC)相关的病原包括
2、蓝耳病病毒、肺炎支原体、圆环病毒II型、猪瘟病毒、链球菌、副猪嗜血杆菌、猪放线杆菌、巴氏杆菌等等,上述两种以上的病原混合感染时,造成的损失大大加剧。因此实验室诊断在疾病的有效控制方面就显得尤为重要,对生产具有积极的指导作用。如何衔接从临床到实验室的过程,进行快速准确的实验室诊断,然后把结杲反馈给生产,为生产更好的服务,这就需要我们制定一套科学标准的流程。下血本实验室从病料的采集、保存、运送、样品留样、诊断、报告等方面进行规范,从而保证检测结果的准确性。一、病料的采集1.1供检验用的病料必须是新鲜畜禽尸的各脏器
3、或血液等。内脏病料的采取,须于患病畜禽死后立即进行,最好不超过6小时,夏季不超过4小时,否则时间过长,由肠道内侵入其他细菌,致使尸体腐败,有碍于病原菌的检验。作细菌学培养的则应采用未使用过治疗药物的病畜。所用器械容器事先要消毒,采样时尽量作到无菌。1.2采取病料的部位应根据疫病情况而定。一般应采气管、肺、肝、脾、肾、淋巴结、脑、脊髓等组织,且应采病变明显的部位。每种组织最好单独放在一个容器或自封袋内。需作病原检查的放在50%甘油生理盐水中保存;作病理组织学检查的则放在10%福尔马林中保存;血液如要作血清学检查
4、,则应让其口然凝固后分离出血清;如作病原学检查需全血,应预先加入抗凝剂;小家畜禽则可送全尸到实验室,依具体情况采取病料。用记号笔注明日期,脏器名称和动物名称。1.3对人畜共患病,在采病料时应戴手套、口罩等。如疑似炭疽则不能剖检,而应采取局部皮肤或耳尖送检,如确实需要剖检,一定要严格做好消毒和防护,防止病原扩散。二、病料的保存及运送2.1病料的保存方法:依据病料用途和病原特性选择保存方法。一般需冷藏保存作病原检查的材料,应将病料分别装在小口瓶或青霉素瓶内加50%甘油生理盐水,如作病毒分离还应加一定量的青霉素、链
5、霉素。如作细菌检验则不能加“双抗",而口病料保存时间不宜过长,应尽快密封送检;作病理组织切片的病料,应选择好被检脏器切成3立方厘米的组织块放在10%的福尔马林溶液或95%酒精中,保存液的量应为病料的8-10倍;供细菌或病毒学检查的血液应加抗凝剂,以防凝固,但不可加防腐剂。常用的抗凝剂为5%枸椽酸钠溶液,按1毫升防凝剂加10毫升血液摇匀即可。2.2病料的运送:要附带样品的详细情况如发病畜禽品种、性别、日龄、发病情况、流行病学特点、采集时间、采集地点、送检病料的数量和种类、检验的口的等;装在试管和广口瓶中的病料密
6、封后装在冰桶中送检,防止容器和试管翻到,且送至化验室的时间越快越好;运送整个畜禽的尸体,要用侵透适宜消毒液的布包好,装入塑料袋中。发货前先与化验室相关人员联系,确定接货时间和地点。—>田仃实验室人员要根据送检单位提供的到货时间、地点准时接货。接到病料或血清后应立即返回实验室,不得在外面游玩,更不得在实验室外面打开样品。回到实验室后仔细核对样品种类、数量、相关信息进行登记;剔除不合格样品。核对完样品后告知送样单位。把样品按检测目的不同进行分类保存如血清或需进行细菌分离的组织应保存在4度冰箱,尽快进行化验。病毒分
7、离的组织可先・20度冻存,待其他事宜忙完后马上对病料进行前处理、分子生物学检测、病毒的分离等工作。所检样品应以节约为原则,留作备份的样品应做好记录,正确保存,确诊完毕后根据情况决定如何处理。需要说明的是化验工作应为生产服务,诊断必须快速准确以便迅速控制扑灭疫情。收到样品后根据检验B的进行相关检测,主耍检测方向可分为:血清学检测(主要是ELISA检测)、细菌学检测、分子生物学检测、病毒学检测。实验室要准备专门的实验记录本,在实验过程中应认真仔细的做好各项记录:加样顺序、实验步骤、异常结果等。实验中耍严格按照实验
8、步骤进行,不准走“捷径”;史不准拖拉,延误时间影响实验结果。操作过程中还应注意搞好消毒工作,防止病原微生物的扩散。各个诊断流程如下:ELISA检测化验员取样、验样合格样品加入酶标板温育加底物液显色►终止反应d洗板洗板dh1r加酶标抗体►温育结果判定出具检测报告经主任签字后发送报告细菌学检测接收样品信息表、验样样品处理细菌分离高压灭菌阳性者进行鉴定结果判定V阴性riV填写原始记录废弃物、实验用品等出具
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