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1、高效液相色谱测定葛根苓连丸中葛根素含量摘要：目的建立高效液相色谱测定葛根苓连丸中葛根素含量的方法。方法色谱柱：DiamonsilC18(250x4.6mm,5um)；流动相：甲醇-水(15：85)；流速：ImL/min；波长：250nm；柱温：30°Co结果葛根素浓度在2.0-50.0ug/mL(r=0.9999)范围内线性关系良好，平均回收率为99.8%(RSD=1.03%)o结论建立的方法简便、准确可靠，可用于葛根苓连丸中葛根素含量测定。关键词：葛根苓连丸；葛根素；高效液相色谱DeterminationofPuerarininGegenQinlianPelletsbyHPLCHE
2、Xin-xin(ZhejiangProvinceTaizhouLuqiaoChineseMedicineHospital,Taizhou,Zhejiang318050,China)Abstract：ObjectiveToestablishaHPLCmethodfordeterminationofpuerarininGegenQinlianpellets.MethodChromatographiccolumn:Diamonsil?C18(250x4.6mm,5um)；mobilephase：methanol~water(15:85)；flowrate:1.0mL•minT；detect
3、ionwave1ength：250nm；columntemperature：30°C・ResuItPuerarinshowedagoodlinearrelationshipattherangeof2.0〜50.0ug•mLT（r=0.9999）.Theaveragerecoveryofpuerarinwas99.8%（RSD=1.03%）・ConclusionThismethodissimple,reliableandReproducible,canbeusedforqualitycontroloftheGegenQinlianpellets.Keywords：GegenQinlia
4、npellets；Puerarin；HPLC葛根苓连丸收载于2010版《中国药典》一部，处方出自东汉医圣张仲景《伤寒论》”葛根苓连汤”，由葛根、黄苓、黄连、炙甘草组成，具有解肌、清热、止泻止痢等功效。用于泄泻痢疾、身热烦渴、下痢臭秽；菌痢、肠炎等症［1］。葛根素的含量测定已有报道［2-4］,本文借鉴报道，建立高效液相色谱测定葛根苓连丸中葛根素含量的方法，简便、准确、可靠，可用于葛根苓连丸中葛根素含量测定。1仪器与试药1.1仪器Agilent1100液相色谱仪，包括G1311A四元泵，G1313A自动进样器，G1322A脱气机，G1314A紫外可见检测器，G1316A柱温箱（美国安捷伦
5、公司）；岛津UV-260紫外可见分光光度计（日本岛津公司）；CP225D型电子天平（德国Sartorius公司）；SIGMAHSK1-18K高速冷冻离心机（德国Sigma公司）；USC-512超声器振荡器（上海波龙公司）；XW-80A涡旋混合器（上海医科大学仪器厂）；YB-1A真空恒温干燥箱（天津金州科仪厂）。1.2试药葛根苓连丸3批（批号：20101101,20110111,20110226,广西壮族自治区花红药业股份有限公司）；葛根素对照品（批号：110752-200912,中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯、水为重蒸水、其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：
6、Diamons订C18（250X4.6mm,5um）；流动相：甲醇-水（15：85）；流速：1mL/min；波长：250nm；柱温：30°C；进样量：20uL。2.2对照品溶液制备精密称取葛根素对照品适量，用40%乙醇溶解，稀释，摇匀。制成每1mL中含葛根素500ugo2.3供试品溶液制备取本品适量，研细，取约1.0mg,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入40%乙醇50mLo称定重量，超声处理（250V50Hz）40min,放冷，再称定重量,用40%乙醇补足减失的重量，摇匀，经0.45um微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。2.4阴性对照品溶液制备按葛根苓连丸的处方，取除葛根外的所有药材，
7、得葛根苓连丸阴性样品，取阴性样品l.Og,按”2.3供试品的制备”方法的阴性溶液。2.5方法学考察2.5.1方法专属性按”2.1色谱条件”测定，结果表明理论板数按葛根素峰计算应不低于3000,见图1。图1葛根苓连丸中葛根素含量测定色谱图注：A.阴性溶液；B.对照品溶液；C.样品溶液；1•葛根素2.5.2线性关系精密吸取0.2、0.5、1.0、2.0、5.0mL,分别置50mL容量瓶中，稀释至刻度。吸取20HL注入液相色谱仪，记录峰面积，以浓度为X轴，峰面积
