资源描述:
《葛粉中葛根素高效液相色谱研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、葛粉中葛根素高效液相色谱研究提要:目的:测定葛粉中葛根素的含量。方法:用HPLC法测定,以MeOH-H2O-HAc(30:70:0.5)为流动相,250nm为检测波长。结果:葛根素呈良好的线性关系,平均回收率为98.6%,RSD为1.76%。结论:该法简单、快速、准确。关键词:葛粉;葛根素;HPLCStudy0fPuerariainPuerariaPowderbyReversed-phaseHighPerformanceLiquidChromatographyLIHong-yu,DAIShi-wen,SHOUDian,ZHANGJi
2、an-min,YUZhong-ming(ZhejiangAcademyofTraditionalChineseMedicine,Hangzhou310017,China)Abstract:Object:DeterminationofPuerariainPuerariaPowderMethods:PuerariaweredeterminedbyHPLC.ThemobilephasewasMeOH-H2O-HAc(30:70:0.5).Detectionwavelengthwasat250nm.Results:Puerariashowe
3、dagoodlinearrelationship.Theaveragerecoverywas98.6%andRSDwas1.76%.Conclusion:Thismethodwassimple,quickandaccurate.5Keywords:PuerariaPowder;Pueraria;HPLC葛根为豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.)Ohwi的干燥根,是常用中药材,具有解肌退热,生津,透疹,升阳止泻功效,用于外感发热头痛、项背强痛,口渴,消渴,麻疹不透,热痢,泄泻,高血压颈项强痛等[1]。现代研究证实,
4、葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物,具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用,同时也有降低血压的作用。有关葛根中葛根素等异黄酮的含量测定研究已有不少报道[2-5],但对葛粉中葛根素含量测定报道不多。本文对葛粉中葛根素的提取条件和测试条件等进行比较研究,并采用高效液相色谱法对葛粉样品进行了定量分析,结果令人满意。1实验部分1.1仪器与试剂岛津LC-10Atvp高效液相色谱仪;SPD-10Avp紫外检测器;岛津UV-265紫外分光光度仪,多功能榨汁机/搅拌机SG300-I(上海科骏电器有限公司)。甲醇(色谱纯)
5、,水(二次蒸馏),其余均为分析纯。葛根素对照品(中国药品生物制品检定所);鲜葛(浙江省永嘉县潘坑乡)。1.2色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;色谱柱C18diamonsil5ul(150×4.6mm5I.D),MeOH-H2O-HAc(30:70:0.5)为流动相,紫外检测波长250nm。2结果与讨论2.1提取溶剂浓度的选择精密称取同一样品约0.1g,分别加30%乙醇、50%乙醇和80%乙醇10ml,超声提取60分钟,进样5ul,比较峰面积,实验结果表明30%乙醇提取最好。2.2超声提取时间的选择精密称取同一样品约0.1g,分
6、别加30%乙醇10ml,超声提取30分钟、45分钟、60分钟,进样5ul,比较峰面积,实验结果表明超声60分钟为最佳提取条件。2.3流动相及流速的选择试验时曾采用下述流动相进行测定:甲醇-水(25:75)、甲醇-水-醋酸(30:70:0.5)、甲醇-水(30:70)为流动相,结果采用甲醇-水-冰醋酸(30:70:0.5)为流动相,样品分离好。而流速也以1.0ml/min为合适。2.4标样溶液的制备称取一定量葛根素对照品,用30%乙醇溶解配制成浓度为13ug/ml的葛根素标准液。2.5葛粉制备取鲜葛用水洗净切片,称取20g放入搅拌机内
7、,搅拌三次,每次1分钟,每次加水200ml,5150ml,100ml,合并浆汁放置二天,去掉上面的水,下面的粉浆用定量滤纸过滤,低温干燥,放入干燥器中备用。2.6供试品溶液制备精确称取一定量葛粉于10mL容量瓶中,加30%乙醇10ml,超声提取1h,滤纸过滤,滤液过0.45um滤膜作为供试品溶液。2.7线性关系考察在上述色谱条件下,分别进标样溶液0.5、3、5、7、10μl,测得各峰面积。以葛根素为横座标(A),以峰面积(Y)为纵座标,计算得回归方程:Y=3.90×106x+728.14,相关系数r=0.9999;结果紫外检测葛根素
8、在0.0065-0.13μg范围内呈良好线性关系。2.8精密度试验取上述标样溶液,连续进样5次,测定,RSD为1.11%。2.9重复性试验取同一样品重复测定5次,RSD为1.61%。2.10稳定性试验取上述供试品溶液,0、2、5、7、