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《高效液相色谱法测定不同来源罗布麻叶中槲皮素与山柰素含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、高效液相色谱法测定不同来源罗布麻叶中桝皮素与山奈素含量摘要：目的采用高效液相色谱法测定罗布麻叶中桝皮素和山奈素含量。方法采用SUPELCO色谱柱(4.6mmX150mm,5?m),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(50：50),检测波长360nm,柱温30°CO结果桝皮素、山奈素的进样量分别在0.1014〜0.7098?g(r=0.9996)、0.0216〜0.21608?g(r=0.9999)线性关系良好。平均回收率分别为98.40%、98.34%,RSD分别为0.98%、0.97%(n=5)0结论本方法操作简便，结果可靠、准
2、确，能有效地评价罗布麻叶的质量。关键词：罗布麻叶；楣皮素；山奈素；高效液相色谱法中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号：1005-5304(2013)01-0051-03罗布麻叶为夹竹桃科植物罗布麻ApocynumvenetumL.的干燥叶，夏季采收，有平肝安神、清热利水的功效，用于治疗高血压、神经衰弱等症［1］。据文献报道，罗布麻叶含黄酮昔及其他成分，黄酮类是其主要有效成分，有桝皮昔、异桝皮昔、金丝桃昔、绿原酸等［5］。本试验针对所收集到的不同来源的罗布麻叶进行研究，采用正交试验水解提取-高效液相色谱法测定罗布麻叶中
3、桝皮素、山亲素的含量。1仪器与试药HP1100高效液相色谱仪。甲醇为甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为超纯水。楣皮素(批号10081-9905,供含量测定用)、山奈素(批号086-200002,供含量测定用)，均购自中国药品生物制品检定所。13批不同来源的罗布麻药材，经北京市药品检验所中药室鉴定。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：C18柱SUPELC0(4.6mmX150mm,5?m)；流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)；流速：0.8mL/min；检测波长：360nm；柱温：30°C；理论塔板数按橱皮素峰计算应不
4、低于5000o2.2对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥12h的桝皮素、山亲素对照品适量，分别加80%甲醇，制成每1mL中含桝皮素30?g.山奈素4?g的溶液即得。2.3供试品制备2.3.1正交试验考察水解条件样品在水解过程中采用正交试验法优选最佳水解条件时发现，影响水解的主要因素为盐酸浓度、水浴温度、水解时间，故确定了由上述3种因素组成、每个因素3个水平的正交表L9(34)进行试验，以樨皮素、山奈素为定量指标，因素水平安排见表lo提取方法及试验条件均同"2.3.2”项方法，结果见表2、表3。据表2R值所示，因子A对结
5、果影响较大，最优试验条件可选择为:A1B2C2,即36%盐酸1mL,90°(2水浴水解60min。据表3R值所示，因子A对结果影响较大，最优试验条件可选择为:A1B2C1,即36%盐酸lmL,90£水浴水解30min。桝皮素的最佳水解条件与山奈素的最佳水解条件略有差异，采用比对试验，选择最佳水解条件，结果见表4OA1B2C2优于A1B2C1,即最佳水解条件为36%盐酸1mL,90°C水浴水解60min。2.3.2供试品溶液的制备取本品粉末0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50mL,密塞，称定质量，加热回流1
6、h,放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL,加入36%盐酸ImL,置90°C水浴中加热回流60min,取出，立即冷却，移置25ml量瓶中，加80%甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45?m)滤过，取续滤液，即得。2.4线性关系考察分别精密吸取桝皮素对照品溶液1、2、3、4、5、6、7mL置10mL量瓶中，山奈素对照品溶液0.5、0.75、1、2、3、4、5mL置25mL量瓶中，加80%甲醇至刻度，摇匀。在上述条件下分析，以对照品进样量(?g)为横座标，峰面积为纵座标，绘制标准曲线。
7、桝皮素回归方程Y=7.405X103X-1.1429,r=0.9996山奈素回归方程Y=7.569X103X-16.23396,r=0.9999O结果表明，桝皮素0.1014〜0.7098?g范围内线性关系良好，山奈素在0.0216〜0.21608?&范围内线性关系良好。2.5稳定性试验在室温下，将一供试品溶液分别于配制后0、2、4、8、12、24h,进行测定，结果桝皮素RSD二0.80%，山奈素RSD二0.16%o2.6精密度试验精密吸取同一供试品溶液，重复进样5次，求得桝皮素RSD二0.14%,山奈素RSD二0.23%。2
8、.7重复性试验取同一样品5份，分别处理测定5次，求得桝皮素RSD二1.21%,山奈素RSD二1.88%。2.8加样回收率试验精密称取已知含量的样品，分别精密加入一定量的桝皮素、山亲素对照品溶液，按“2.3.2”项下方法制备，进样10?L,计算回收率，结果桝皮素平均回收率为98
