临床酶学检验技术临床酶学的实际应用可以追溯到上世纪初，至今已有百年

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1、临床酶学检验技术临床酶学的实际应用可以追溯到上世纪初，至今已有百年的历史。到上世纪30年代，脂肪酶（LPS）、淀粉酶（AMY）、碱性磷酸酶（ALP）、酸性磷酸酶（ACP）开始用于临床。尤其在1959年，Karmen.LaDue、Wroblewski等人建立了分光光度法，使得丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LD）等酶活性测定应用于肝胆疾病、心脏疾病的诊断。他们建立的连续监测法和酶偶联技术直到现在仍是最常用的酶活性检测方法。酶这一生物催化剂，在正常机体代谢中起着重要的

2、作用。在病理情况下，尤其一些细胞内酶，当细胞损伤时会释放到体液中造成体液中酶量或酶活性的改变，这就是酶可作为诊断指标的依据。因为有一些酶在不同器官、组织、细胞内的分布和定位存在明显差异，而且在细胞内外有明显浓度梯度差，所以酶与其它指标相比具有更高的诊断特异性和灵敏度，这就引起临床病理学家和临床医生的极大关注，使酶学得到迅猛发展。上世纪60年代以后，人们发现同工酶及同工酶亚型比总酶活力具有更高的诊断特异性和灵敏度，使临床酶学领域有了更广阔的发展前景。随着免疫学和其它技术的渗透，测定酶质量成为可能。测定酶质量与测定酶活性相

3、比，可以测定无活性的酶，且不受抑制剂的影响，因此，可以提供新的临床信息。酶具有高效催化性和高度特异性决定了酶作为试剂的生物化学方法具备很多优点：如反应条件温和，不需强酸强碱，不需高温；方法特异性高，可直接测定体液中某组分；反应速度快；灵敏度高等等。因此，以酶试剂方法为代表的生物化学法必将取代化学法。酶作为催化剂，在反应前后无明显变化，即酶可反复使用，近年来以固相酶技术为核心的生物传感器技术的应用和开发研究正如火如荼地进行，可以预测我们将很快进入生物传感器时代。第…节酶含量的表示方法酶具有高效催化性，极少量的酶可催化大量

4、底物进行反应。理论上说,在底物足够和酶未失活的前提下，酶与底物孵育足够长的时间可以产纶足够量的产物。若检测单位时间的产物或底物变化量要比直接测定酶蛋白量显然容易得多。这种用酶促反应的速度来间接反应酶含量的方法就是通常所说的酶催化活性的测定。根据酶催化活性来表示酶含量的方法也称为相对定量法。"相对"的含义还包括酶催化活性易受测定条件的影响。市于酶催化活性的测定方法简便快速，因此绝大多数的酶都是用此法测定。一、酶的催化活性(-)酶活性单位历史上曾经使用很多酶催化活性的”惯用单位”，是以方法提出者的姓氏来命名的，他们根据当时

5、的实验条件，提出各自的时间单位和产物或底物量的单位。例如谷丙转氨酶就有赖氏单位(Reitman-Frankel)>金氏单位(King)、卡门氏单位(Karmen)、穆氏(Mohun)单位等等。1963年国际生化协会酶学委员会通过广泛讨论，提出一个国际单位(IU)来表示酶量的多少。国际单位定义：在特定条件下，1分钟能转化1微摩尔底物(Pmol/min)的酶量为一个国际单位。由于测定条件（如温度）不同，所转化底物的量将有明显差异。为避免临床上误认为只要是同一国际单位的酶量在国际上无论何处所测结果都相同，目前大多数实验工作者

6、常省略国际二字（简写也由IU改为U）。几乎都习惯用U/L來表示体液中酶活性即酶活性浓度。1979年，国际生化协会为了使酶活性单位与国际单位SI制相一致，提出了Katal单位，即每秒钟转化1个摩尔底物（mol/s）的酶量。国际单位和katal间关系如下：1U=1umol/min=lX10-6/60s=16.67nkatal（二）正常上限升高倍数酶催化活性或活性浓度是一个相对的概念，与测定方法及测定条件有关。不同的测定方法，酶活性的结果可以相差数倍。例如，乳酸脱氢酶用逆向反应测得的结果是正向反应的3倍。碱性磷酸酶的不同测定

7、方法之间仅仅缓冲液不同，其结果也可以相差1倍以上。R卩使方法完全一致，配方也完全一致，由于试剂供应商的原料来源不同也会造成较大的差别，尤其是因工具酶的纯度和工具酶活性单位不同而造成。酶活性测定的影响因素如此之多，以至各实验室之间的测定结果难以比较，参考值也难以统一，给临床医生带来不少麻烦。为了更直观地反映酶含量的变化，很多实验家开始使用正常上限升高倍数（upperlimitsofnormal,ULN）这一表示方法。所谓ULN是指用测得的酶活性结果除以参考范围上限。这样做的好处是显而易见的，临床更生可以不要因记参考值范围

8、而烦恼，但是对于临界升高的病情判断将带来新问题。在目前尚缺乏统一的校正品或标准以前，测定方法也不能完全统一的前提下，使用ULN有一定的好处，但对其临床意义应重新进行评价。二、酶蛋白质量酶的含量严格來说是指酶分子的质量浓度，常以酶蛋白浓度来表示（单位是g/L或mg/L）o人体体液中的酶有几百种，但总量不超过lg/Lo除脂肪酶（LPL