艾滋病实验室检查诊断（精品）

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1、艾滋病实验室检查诊断艾滋病实验室检查诊断病情描述：艾滋病实验室检查诊断专家意见：1）主要是中度以上细胞免疫缺陷包括：CD4+T淋巴细胞耗竭：T淋巴细胞功能下降，外周血淋巴细胞显著减少，CD4<200/nl,CD4/CD8<1.0,（止常人为1.25〜2.1）,迟发型变态反应皮试阴性,有丝分裂原刺激反应低下。（2）B淋巴细胞功能失调：多克隆性高球蛋白血症，循环免疫复合物形成和自身抗休形成。（3）NK细胞活性下降（4）各种致病性感染的病原体检查如PCRo组织学证实的恶性肿瘤，如KS；（三）HIV抗体检测L酶联免疫吸附法（ELISA）；2•明胶颗粒凝集试验（PA）；3•免疫荧光检测法

2、（IFA）；4•免疫印迹检测法（WestemBlot,简称WB法）；5•放射免疫沉淀法（RIP）。其中前三项常用于筛选试验，后二者用于确证试验。HIV感染后数周或数日内常不能检出抗体，95%的受染者在5个月内可测岀抗体。但也有感染后3・4年仍不能检出抗体者，此时有必要检测HIV病毒。（四）PCR技术检测HIV病毒二、PCR技术在HIV检测屮的应用PCR可用来追踪HIV的自然感染史。可在其它血清学和病毒学标志出现前检测病毒序列，这样可判定无症状而且血清阴性患者潜在的HIV的传播性;可用來监测长潜伏期（4〜7年）病人，以及在抗病毒治疗期间病毒的水平；也可用于HIV-1血清阳性母亲的婴儿的HIV

3、检测。在婴儿出生后最初的6〜9个月期间,他们的血液屮存在母体的抗体，因此用PCR可判定婴儿是否真正被HIV感染。（一）血清抗休阳性病人HIV序列的检测有人从AIDS或ARC病人的外周血单核细胞培养物，精液细胞和精液上清制备DNAo然后用PCR法和逆转录酶测定法分別检测HIV-1oPCR扩增产物与32P标记的探针退火之后用BstNI消化。再进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和自显影。结果表明，在逆转录酶阴性的28个细胞系中有9个以及用逆转录酶法不能确定的9个细胞系中有2个为阳性。这说明过去许多细胞培养物认为是阴性者，实际上用更敏感的PCR测定时则为阳性。从血清阳性的HIV感染者的外周血单核细胞中可检测出

4、前病毒序列。通过共培养分离出病毒的血清阳性的同性恋男人血液制备的DNA,用PCR可100%检出病毒序列；用血清阴性共培养阴性同性恋者的标本，经PCR扩增检出病毒序列者为64%,血清阴性正常人标本PCR检测也为阴性，表明未出现假阳性结果。由于HIV-1基因组的广泛的异源性，为提高检测的阳性率可采用多种引物（如LTR,gag和env基因的引物）。利用PCR法从313份已证实为抗体阳性的标本中检测出310份HIV阳性（99%）O（二）血清抗体阴性病人的HIV序列的检测由于在感染HIV后到出现免疫反应Z前有一段滞后期,这个血清学阴性的滞后期通常长达6周至6个月，而且无抗体产生期可能更长些•在此期间

5、受感染者往往检测不到抗体，因此，血清阴性的人也可能已感染HIV.PCR法在高危人群中检测到HIV・1比由血清学转阳确诊的时间可以提高6个月•对少数初次共培养呈阴性的人，甚至可在血清转阳之前24〜39个月就能确诊为HIV-1感染•对血清学试验结果不能确定者，也可通过PCR作进一步分析和确诊。（三）新生儿HIV序列的检测HIV感染的母亲其婴儿由于母体抗体的存在，用抗体检测法通常为阳性•但实际上只有20%〜60%的婴儿受到HIV感染•因此，对这些婴儿进行HIV感染的早期诊断是十分重要的•现已证明30〜50%的这些新生儿可在母亲的子宫里，在分娩和引产或通过产后哺乳时从其母体感染HIV.新生儿血清阳

6、性者并不能说明是HIV感染.因为母体HIV抗体可持续大约15个月之久•在…般情况下，婴儿并不表现出HIV感染的任何症状•病毒细胞培养法对婴儿并不是一种可靠实用的方法;HIV特异IgM抗体的检测在母体抗体存在下也是不可能的;在过量血清抗体存在下检出血清中的HIV抗原也是十分困难的•另外，婴幼儿被HIV感染后病情发展较快•早期诊断，对及时采取治疗措施,延缓阻止病情发展极为重要•口前所使用的抗病毒药毒性大,因而不能用于HIV抗体阳性而未感染的婴幼儿.但当用PCR检测出HIV-DNA序列后，即可进行抗病毒治疗以及加强免疫机能和营养的治疗•在一项研究中,14名血清阳性母亲的新生儿用PCR检测其屮6个

7、为阳性;在出生后12〜15个刀内血清阴性的10个儿童中有5个为PCR阳性•从血清阳性母亲出生1个月的新生儿中，收集的外周血单核细胞经PCR检测,7个为阳性的婴儿，其中5个在检测后10个月得AIDS;而PCR阴性的9个婴儿，在16个月的追踪检查期间身体状况良好•这些研究表明,PCR技术对被HIV感染母亲的新生儿和血清阴性儿童进行早期的直接的HIV-1检测是十分重耍的.PCR技术检测HIV-DNA序列对AIDS和ARC的确诊