载基因靶向高分子超声微泡递送系统的构建及相关性能研究

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1、福建医科大学硕士学位论文分类号：R445.1学校代码：10392学科专业代码：105107学号：2111003332福建医科大学硕士研究生毕业论文载基因靶向高分子超声微泡递送系统的构建及相关性能研究ConstructionofTargetedPolymerMicrobubbleSystemforGeneDeliveryanditsCorrelationPropertyResearch学位类型：临床医学硕士所在学院：协和临床医学院研究生：林敏学科、专业：影像医学与核医学导师：何以敉教授研究起止日期：2013年6月至2014年4月答辩日期：2014年

2、5月20日二○一四年五月万方数据福建医科大学硕士学位论文万方数据福建医科大学硕士学位论文目录英汉缩略词名词对照„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„7第一部分不同乳腺癌细胞株相关生物学特性比较1材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„92方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„103结果„„„„„„„„

3、„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„124讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„16第二部分载基因靶向高分子超声微泡递送系统的构建1材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„202方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„223结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„254讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„31全文总结„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„33下一步研究计划„„„„„„„„„„„„„„„„„„„

4、„„„„„„34参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„34文献综述„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„37致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„48万方数据福建医科大学硕士学位论文英汉缩略词名词对照英文缩写英文全称中文全称BNHSbiotin-N-hydroxysuccinimideester生物素-N-羟基琥珀酰亚胺酯PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液DC-Chol3-(N-(N',N'-Dimethylaminoethane)carbamoy

5、l)氨基甲酸叔丁酯cholesterol盐酸盐PLGApolylactic-co-glycolicacid乳酸/羟基乙酸共聚物PEGpolyethyleneglyco聚乙二醇DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜MES2-(N-morpholino)ethanesulfonicacid2-N-吗啉代乙磺酸hydrate水合物EDC1-ethyl-3-（3-dimethylaminopropyl）carbodiimide1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺DIPEAN,N-DiisopropylethylamineN，N-二异丙

6、基乙胺PIpropidiumiodide碘化丙啶PFPperfluoropentane全氟戊烷rpmRevolutionsperminute每分钟转数MBMicrobubbles微泡1万方数据福建医科大学硕士学位论文载基因靶向高分子超声微泡递送系统的构建及相关性能研究中文摘要目的：本实验拟采用高分子材料为成膜材料，包裹惰性气体制备载质粒DNA的超声微泡造影剂，并对微泡进行靶向修饰，为乳腺癌靶向基因治疗提供一种高稳定性的超声微泡治疗方法，同时为基因转染提供一种新型的非病毒载体。方法：1.采用免疫荧光法鉴定三种不同乳腺癌细胞株BT474、SK-BR-

7、3、MDA-MB-231细胞表面HER-2抗原的表达情况；采用碱裂解法抽提前期实验成功构建的重组质粒pGPU6/GFP/Neo-survivin，并检测纯度及浓度；用X-tremeGENEHPDNATransfectionReagent体外转染乳腺癌细胞，比较不同乳腺癌细胞株基因转染效率。2.阳离子脂质DC-Chol与质粒DNA溶液按照+/-电荷比5:1，2:1，1:1，1:2，1:5混合，制备具有不同+/-电荷比例的DC-Chol/DNA复合物，琼脂糖凝胶电泳阻滞试验检测不同电荷比时DC-Chol包裹质粒DNA的能力。3.选取mPEG-PLLA

8、及DC-Chol做为微泡外壳材料，采用单乳化法制备包裹气态全氟戊烷的高分子微泡，利用静电作用将碘化丙啶（PI）标记的质粒DNA连接到微泡