《生理科学实验作业范本》1c班-朱榕生-1

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1、专业：临床医学姓名：朱榕生学号：3110103610H期：2013.10.10地点：C408动物实验沖尢丿•象实验报告课程名称：生理科学实验实验类型:实验项目名称：刺激强度、频率、不应期和甘汕处理对蟾赊腓肠肌兴奋与收缩的影响同组学生姓名：颜辉乐辰升指导老师：梅汝焕实验1刺激强度、频率、不应期和甘油处理对蟾赊腓肠肌兴奋与收缩的影响朱榕生颜辉乐辰升(浙江大学医学院2011级临床医学专业1C班第1组，浙江，杭州，310058)zhurongsheng@zju.edu.cn【摘要】目的：制作蟾蛛坐骨神经-腓肠肌标本，分析刺激强度、刺

2、激频率与腓肠肌收缩张力的关系，探究神经、骨骼肌兴奋的电变化与肌收缩的关系，分析甘油处理対骨骼肌收缩的影响。方法：将蟾蛛毁脑脊髓，制备蟾蛛坐骨神经■腓肠肌标木，观察肌肉收缩状况。①测定不同刺激强度与频率刺激樂骨神经吋肌肉的收缩张力；②最大刺激强度下双刺激同步触发，记录神经干动作电位、骨骼肌动作电位、腓肠肌收缩曲线，观察不同刺激间隔对肌肉收缩的影响③廿油高渗任氏液处理腓肠肌标本后用最大刺激同步触发，观察神经干动作电位、骨骼肌肌膜动作电位及腓肠肌收缩曲线，记录出现有动作电位无肌肉收缩的时间。结果:(1)蟾蛛腓肠肌收缩的阈强度为0.

3、66±0.42V,对应肌张力5.53±5.48g;最大刺激强度0.95+0.44V,对应肌张力为19.98±6.45go两者肌张力比较具有显著性差异(配对t检验p<0.01)o(2)单刺激最小刺激频率为1Hz,肌张力为l&60±8.09g,不完全强直收缩最小刺激频率为5.00±0.67Hz,肌张力为21.05±9.95g,完全强直收缩最小刺激频率为22.40±4.77Hz,肌张力为80.42±37.43g0不完全、完全强直收缩时肌张力显著大于单收缩时的肌张力(配对t检验p<0.01)o(3)刺激间隔为10ms时,腓肠肌收缩张

4、力最大为3&60±17.02g,与其余各组之间具有显著性差异(p<0.01)；各刺激间隔下，肌膜动作电位、坐骨神经干动作电位均无显著差异(p>0.05)o(4)甘油高渗任氏液处理后，27.85±3.86min后腓肠肌不再收缩。结论：达到阈刺激后，随着刺激强度的增加，肌张力增强，在最大刺激强度时达到最大张力。阈上刺激时，随着刺激频率增加，肌肉依次发生单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩，肌张力显著增强。神经■肌接头兴奋传递和骨骼肌兴奋的电变化和收缩是依次进行的。不同刺激间隔对骨骼肌肌肉收缩张力有影响，落在绝对不应期内的下一刺激

5、将不引发动作电位。甘油作用后，腓肠肌能产生动作电位，但无法收缩。【关键词】婚赊；坐骨神经-腓肠肌标本；阈强度；刺激频率；甘油1.引言肌肉、神经和腺体组织称为可兴奋组织，它们有较大的兴奋性。刺激神经使神经细胞产生兴奋，兴奋沿神经纤维传导可引起肌肉收缩。木实验以经典的蟾赊坐骨神经■腓肠肌标本为实验材料，探究和验证神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩特点及不应期与甘油处理对骨骼肌收缩的影响。2•材料2.1实验动物：蟾赊（中华蟾赊指名亚种，ZhuoshanToad）,雌性2.2实验仪器：RM6240多道生理信号采集处理系统（

6、RM6240biologicalsignalcollectingsystem,成都仪器厂）、神经肌肉标本盒（BB-3B型，成都仪器厂）、张力换能器（JZJO1型，成都仪器厂）、H・40实验支架（成都仪器厂）2.3实验器材：蛙板、探针、粗剪刀、银子、玻璃分针、大头针、锌铜弓、培养1111、木锤、陶瓷碗2.4实验试剂：任氏液（Ringefssolution）（由无机盐和蒸馆水配置而成，每升溶液含NaCl6.5g、KC10.14g、CaC120.12g,>NaHC030.20g、NaH2PO40.0lg,用于两栖类动物组织器官润湿

7、和营养）、20%髙渗甘油任氏液3•方法3.1标本制作及固定：3.1毁脑脊髓取蟾赊一只，用左手握住，使其头尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔处刺入颅腔，左右搅动，捣毁脑组织，在将探针退回，刺向尾侧，捣毁脊髓，此时蟾赊四肢松软。3.2下肢标本制备用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱，左手握住蟾赊后部，右手将粗剪刀沿两侧剪开腹壁。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷盆内。避开神经，用右手拇指和食指夹住脊柱，左手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将处理后的下肢标本置于盛有任氏液的培养皿中。3.3制备坐骨神经■腓肠肌标本洗净双手和用过的全部手术器械

8、。下肢标本俯卧，用大头针将标本固定于蛙板上，从背侧剪去脊柱，用玻璃分针游离出坐骨神经腹腔部，用棉线结扎，再用玻璃分针循股二头肌和半膜肌Z间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至胭窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半腱肌和半膜肌肌腱、股四头肌肌腱，自上向下剪断所有坐骨神经分支。