《生理科学实验作业范本》1c班-朱榕生-21

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1、专业：一临床庾学■用沪丿、叨实验报告姓名：朱榕生学号：3110103610日期：2013918地点：C412课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称:缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响同组学生姓名：颜辉乐辰升指导老师：沈静实验21缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响朱榕生颜辉乐辰升（浙江大学医学院2011级临床医学专业1C班第1组，浙江，杭州，310058）zhu「ongsheng@zju・edu・cn［摘要］目的学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型的方法，观察不同类型缺氧时皮肤黏膜颜色的变化特点；观察不同中枢

2、神经系统机能状态及体温对缺氧耐受的影响；了解临床应用冬眠及低温疗法的意义以及对照实验和控制实验条件重要性。方法通过测定耗氧量和小鼠的存活时间來观察中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响。通过复制乏氧性缺氧、CO中毒、注射NaNO2及注射NaNO2和美兰的动物模型，来观察不同缺氧类型动物在缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。结果注射氯丙嗪并低温处理的小鼠平均存活时间为33.50±3.72分钟，平均总耗氧量为20.15±2.45ml,平均总耗氧率为0.028±0.004；注射生理盐水处理的小鼠平均存活时间为15.50±2.72分钟，平均总耗氧量为17.85土.52ml,

3、平均总耗氧率为0.054土0.01。注射氯丙嗪并低温处理的小鼠总耗氧率显著小于注射生理盐水处理的小鼠（P<0.01）。注射亚硝酸钠和生理盐水的小鼠存活吋间为9.20±3.32分钟；美兰治疗的小鼠存活时间为19.00±6.88分钟。亚硝酸钠中毒后经美兰治疗的小鼠存活时间显著长于注射生理盐水的小鼠（PV0.01）o结论抑制中枢神经系统可以显著降低小鼠总耗氧率。不同类型乏氧均可造成小鼠缺氧死亡。美兰可以有效缓解亚硝酸钠造成的缺氧。［关键词］小鼠；缺氧模型；屮枢神经系统；氯丙嗪；亚硝酸钠缺氧(hypoxia)是组织供氧不足或/和用氧障碍，所导致的机体代谢、机能和形态结构发生异

4、常改变的病理过程。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。本实验模拟了乏氧性缺氧和血液性缺氧的模型，并分析了中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响。1.材料与方法1.1实验对象小鼠6只1.2实验仪器125、500mlT口瓶各1只；测耗氧装置1.3实验药物50g/L亚硝酸钠溶液，10g/L美兰溶液、2.5g/L氯丙嗪溶液、生理盐水，CO气体，钠石灰1.4中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响1.4.1装置原理量筒充以一定量的水，移液管用胶管与缺氧瓶塞上的一个管子相连并构成一密闭的空间(图1)。小鼠在这密闭的缺氧瓶

5、中，不断消耗氧气，产生的C02被钠石灰吸收,瓶内气压逐渐降低而产生负压，移液管内液面因瓶内负压而上升，而量筒内的液面却下降，量筒内液血下降的臺升数即为小鼠的耗氧量。鼠死后从量筒上读11!液血下降的毫升数，即为小鼠的总耗氧量(A)。1.4.2取性别相同，体重相近的小鼠2只，并准确称取体重。按随机分配的原则，将其屮1只鼠作为实验组，另1只作为对照组。实验组鼠按0.lml/10g体重腹腔内注射2.5g/L氯丙嗪，安放在冰浴的沙布上10、15分钟，使呼吸频率降为70~80次/分；对照组鼠按0.lml/10g体重腹腔注射生理盐水，放置室温10~15分钟。1.4.3将2只小鼠分别

6、放入125ml的广口瓶内，按图1连接测耗氧装置。缺氧瓶测耗氧装置图11.4.4从密闭测耗氧装置开始计吋至鼠死亡，记录小鼠存活吋间，用测耗氧装置测定总耗氧量（A）o根据总耗氧量A（ml）,存活时间T（min）,鼠体量W（g）三项指标，求出总耗氧率R（ml/g/min）：R（ml/g/min）=A（ml）-rW（g）4-T（min）1.4.5列各项指标的原始数据表并进行统计处理，数据以x±S表示，对实验组和対照组的T、R作t检验。1.5不同原因造成不同的缺氧类型1.5.1CO中毒和乏氧性缺氧小鼠模型制作取性别相同、体重相近的小鼠2只，随机分为CO中毒组和乏氧缺氧组。观察小

7、鼠活动情况及耳、尾、口唇的颜色。将其中一只小鼠分放入500mLT口瓶内，塞紧瓶塞。用10ml注射器抽収CO气体10ml,注入刚密闭的广口瓶内，形成2%C0的空间环境。另一只放入内置钠石灰的125ml密闭广口瓶内。1.5.2实验观察记录注入CO或置于密闭环境中小鼠死亡的时间。解剖小鼠尸体，记录肝、肺、血液颜色变化。记录呼吸频率（注入CO前，注入后每5min/2min计1次（次/10s））,观察小鼠行为（挣扎、痉挛）及耳、尾、唇的颜色。1.5.3亚硝酸钠中毒収性別相同、体重相近的小鼠2只，随机分为亚硝酸钠组和亚硝酸钠加美兰组。观察皮肤黏膜色泽。两组小鼠腹