厚壳贻贝M7 lysin基因的序列分析【毕业论文】

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1、本科毕业论文目录本科毕业论文（20届）厚壳贻贝M7lysin基因的序列分析专业：生物科学本科毕业论文目录目录摘要IAbstractII引言11材料与方法21.1实验材料21.2仪器与设备21.3药品与试剂21.4实验方法21.4.1PCR扩增21.4.2产物回收与测序31.4.3连接产物转化大肠杆菌感受态41.4.4数据处理与分析42实验结果52.1厚壳贻贝M7lysincDNA序列分析52.2厚壳贻贝M7lysin氨基酸序列分析63讨论73.1厚壳贻贝M7lysin序列分析73.2M7lysin的分子标记特征7小结8参考文

2、献9致谢11本科毕业论文中文摘要摘要[摘要]M7lysin位于贻贝精子顶体中，是溶解卵黄膜、促进受精作用的重要蛋白质，决定了贻贝种间精卵识别的特异性。本实验提取厚壳贻贝雄性性腺总RNA并反转录为cDNA，作为模板，通过兼并性引物进行PCR反应获得目的片段，再将PCR扩增条带进行割胶回收，连接入T载体并转入大肠杆菌，筛选阳性克隆测序。发现其开放阅读框cDNA为543bp，与贻贝、地中海贻贝、盖勒贻贝具有较高的相似性；在线翻译所得蛋白质片段中含有180个氨基酸，分子量为20kD，等电点为8.48；通过M7lysin氨基酸序列构建

3、系统进化树发现，贻贝和地中海贻贝亲缘关系最近，其次为盖勒贻贝，最后是厚壳贻贝。上述研究结果提示，M7lysin可作为分子标记研究贻贝进化特征，并有利于揭示贻贝的生殖机理，为贻贝的杂交育种提供参考。[关键词]厚壳贻贝；M7lysin；克隆；测序9本科毕业论文英文摘要Abstract[Abstract]M7lysinislocatedinthemusselspermacrosome.Asanimportantproteinforfertilizationitcandissolvevitellinemembraneanddeter

4、minethespecificityofsperm-eggrecognitionofmussel.Inthisstudy,weclonedM7lysinofMytiluscoruscuswithhomologycloningmethod,andexpresseditinprokaryotes.Theresultsshowedthattheamplifiedproductwasabout540bpfragment.ThefurthersequencingfoundthatthecDNAofopenreadingframewas

5、543bp,andithadhighsimilaritywithMytilusedulis,Mytilusgalloprovincialis,Mytilustrossulus.Theproteinincluded180aminoacidsthroughonlinetranslation,itsmolecularweightwas20kD,anditsisoelectricpointis8.48.ThephylogenetictreefromtheaminoacidsequenceofM7lysinshowedthatMyti

6、lusedulisandMytilusgalloprovincialishadclosestrelationship,followedbyMytilustrossulus,andfinallyMytiluscoruscus.Thisbandwasconsistentwiththeexpectedmolecularmas.TheseresultssuggestthatM7lysincanbeusedasmolecularmarkerstostudymusselevolution,revealthemussel'sreprodu

7、ctivemechanism,andfurtherprovideareferenceforthecrossbreedingofmussels.[Keywords]MytiluscoruscusGould;M7lysin;cloning;sequencing9本科毕业论文引言引言贝类是典型的广播生殖细胞、体外受精的无脊椎动物，其精子在卵细胞表面经历复杂的顶体反应，并最终与卵细胞膜相融合，这就决定精卵细胞中必定存在某种特殊的物质，使两性细胞能在广阔的水体中得以识别并结合。经前人研究发现，软体动物精子顶体当中的细胞溶素（lysin

8、）在此过程中发挥了重要作用。作为典型的海产无脊椎动物，贻贝的受精作用和胚胎发育都在体外进行，但研究发现，虽然很多种贻贝共同生活在相同的海水环境中，而且生殖季节相互交叠，却很少产生种间杂交现象，其原因就是异种间配子不能识别，无法受精，即存在生殖隔离现象。研究表明，成熟的贻贝精子具有发达的顶体