厚壳贻贝lysin基因的克隆【毕业论文】

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1、本科毕业论文目录本科毕业论文(20届)厚壳贻贝lysin基因的克隆专业:生物科学本科毕业论文目录目录摘要IAbstractII引言11材料与方法21.1实验材料21.2实验仪器和设备21.3实验药品和试剂21.4实验方法21.4.1总RNA的抽提21.4.2cDNA的合成31.4.3模板的有效性检测31.4.4厚壳贻贝M7lysin基因的克隆42结果52.1总RNA纯度和完整性情况52.2β-actin扩增结果52.3厚壳贻贝M7lysin基因的克隆63讨论与总结73.1总RNA的提取73.2厚壳贻贝M7lysin7小结9参考文献10致谢11本

2、科毕业论文中文摘要摘要[摘要]M7lysin位于贻贝精子顶体中,是溶解卵黄膜、促进受精作用的重要蛋白质,决定了贻贝种间精卵识别的特异性。本实验采用Trizol法提取厚壳贻贝雄性性腺组织总RNA,反转录为cDNA作为模板,克隆M7lysin基因。结果显示,所提取的总RNA以琼脂糖凝胶电泳检测得到28S、18S、5S三条清晰亮带,证实了所提取到的总RNA是完整的,可用于进一步实验研究;总RNA样品经过反转录得到cDNA作为模板,经PCR扩增得到约270bp管家基因β-actin扩增图谱,证明模板可用;根据已发表的贻贝M7lysin基因序列设计兼并性

3、引物,经PCR扩增得到540bp的目的条带,与预期大小一致,推断为厚壳贻贝M7lysin分子。[关键词]厚壳贻贝;M7lysin;克隆;RNA;提取;检测9本科毕业论文英文摘要Abstract[Abstract]M7lysininmusselsinthespermacrosomeisdissolvedyolkmembrane,andpromotetheimportanceoffertilizationproteins,determinesthemusselspeciesspecificityofsperm-eggrecognition.Inth

4、isstudy,thickshellwasextractedbyTrizolYiBeixiongOrganizationofgonadalRNA,reversetranscriptiontocDNAasatemplate,clonedM7lysingenes.TheresultsshowedthattheextractedtotalRNAbyagarosegelelectrophoresisdetectedby28S,18S,5Sthreeclearbrightband,confirmingthetotalRNAisextractedtocom

5、plete,canbeusedforfurtherexperimentalstudies;totalRNAsamplesAfterreversetranscriptioncDNAasatemplate,thePCRamplifiedbyabout270bpwasamplifiedhousekeepinggeneβ-actinpatternsshowthatthetemplatecanbeused;musselsM7lysinbasedonthepublishedgenesequenceofdegenerateprimers,PCRamplifi

6、ed540bppurposebands,consistentwiththeexpectedsizededucedforthethickshellmusselM7lysinmolecules.[Keywords]Thickshellmussel;M7lysin;clone;RNA;extraction;detection9本科毕业论文引言引言厚壳贻贝(MytiluscoruscusGould)隶属于软体动物门、双壳纲、异柱目、贻贝科。贻贝肉制品称“淡菜”,营养丰富,含蛋白质53.5%,脂肪6.9%,糖17.6%,无机盐8.6%,以及各种维生素和碘

7、、铁、钙等物质,且肉质鲜美,又具有极大的药用价值。《本草纲目》载述贻贝可治疗虚痨伤惫,经血减少,吐血久痢等。现代药理学结果也表明,贻贝可治疗口角炎,舌炎,眼疾和贫血等。另外,贻贝的壳是贝雕工艺的原料,又可加工为贝壳饲料。由此可见,贻贝浑身是宝,其经济价值不容忽视。海洋无脊椎动物在受精过程中将精子及卵细胞广播于水中,二者通过化学吸引力结合到一起,精子顶体泡打开,内容物质释放并溶解卵黄膜,精子从打开的卵黄膜孔道进入,从而使卵子受精,并随后完成胚胎发育过程。在此受精过程中,精子顶体蛋白在溶解卵黄膜过程中起到重要作用,决定受精作用的特异性,目前关于该种

8、蛋白特征研究最清楚的是鲍lysin和海胆bindin。细胞溶素(lysin)是所有动物繁殖蛋白中了解的最透彻的一种,作为一种非酶蛋白质,lysin 可

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