补阳还五汤对急性脊髓损伤大鼠Reg-2、mTOR、Olig-2蛋白表达的影响

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时间:2019-09-17

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1、中图分类号论文编号学科分类号密级ShanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文Re-2补阳还五汤对急性脊髓损伤大鼠、mTOR、gO-2lig蛋白表达的影响Effectof-BuanhuanwuDecoctionontheExressionofRe2mTORygpg,,O-tswrrlig2inRaithSpinalCodInuyj研究生姓名:高玉亭导师姓名:张波副教授、职称学科、专业名称:中医基础理论研究方向:中医治法治则研究.申

2、请学位类型:科学学位二0—七年六月五曰山西中医学院学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研宂工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名:2。年月日今岭^关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山西中医学院有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留或向国。家有关部门机构送

3、交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅本人授权山西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名论文导师签名:{J年今月,十曰中文摘要目的:研究补阳还五汤(BuyanghuanwuDecoction,BYHWD)对急性脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)大鼠运动功能以及再生基因蛋白-2(regeneratinggeneprotein-2,Reg-2)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(thema

4、mmaliantargetofrapamycin,mTOR)、少突胶质细胞转录因子-2(oligodendrocytetranscriptionfactor-2,Olig-2)表达的影响,并与甲基强的松龙(Methylprednisolone,MP)进行对照,探讨补阳还五汤干预脊髓损伤的作用机制。方法:将24只大鼠随机分为正常组(CONTROL)、损伤组(SCI)、补阳还五汤组(BYHWD)和甲基强的松龙组(MP)4组,每组各6只。采用Allen’s法建立大鼠SCI模型,造模成功后1、3、5、7d采用BBB运动功能评分法(BassoBeatt

5、ieBresnahanIocomotorratingscale)和斜板实验(Inclinedplanetest)评估大鼠运动功能恢复效果。正常组(CONTROL)不作处理,等量生理盐水灌胃7d;损伤组(SCI)脊髓损伤后常规饲养7d;补阳还五汤组(BYHWD)脊髓损伤后BYHWD(15g/kg·d)灌胃治疗7d;甲基强的松龙组(MP)脊髓损伤后MP(30mg/kg·d)腹腔注射7d。术后7d深度麻醉处死动物,取损伤节段脊髓组织约1.0cm,进行HE染色,并采用免疫组化、免疫荧光和Western-blot法检测大鼠脊髓组织Reg-2、mTOR、

6、Olig-2蛋白表达变化。结果:1.SCI组BBB运动功能评分和斜板功能评分显著下降;给药1、3d后,BYHWD组和MP组BBB运动功能评分和斜板功能评分与SCI组相比无差别(P>0.05);给药5d后,BYHWD组和MP组BBB运动功能评分和斜板功能评分与SCI组相比恢复效果更好,差异有统计学意义(P<0.05),BYHWD组和MP组无差异(P>0.05);给药7d后,BYHWD组和MP组BBB运动功能评分和斜板功能评分与SCI组相比恢复效果明显更好,差异有统计学意义(P<0.01),BYHWD组和MP组无差异(P>0.05)。2.HE染色

7、结果表明,SCI组损伤节段脊髓组织结构紊乱,瘢痕形成,部分神经元结构模糊,炎性细胞浸润。给药7d后,BYHWD组和MP组脊髓组织纤维排列有一定的方向性,神经胶质细胞增殖,炎性细胞浸润减少。3.与CONTROL组比较,SCI组脊髓组织中Reg-2和mTOR蛋白表达升高(P<0.05)。给药7d后,与SCI组比较,BYHWD组和MP组脊髓组织中Reg-2和Olig-2蛋白表达均升高(P<0.05),mTOR蛋白表达降低(P<0.05);与MP组比较BYHWD组脊髓组织中mTOR蛋白表达更低(P<I 0.05)。结论:1.补阳还五汤可以改善脊髓损伤

8、大鼠的运动能力,其效果与糖皮质激素甲基强的松龙相当;2.补阳还五汤可以减少脊髓损伤大鼠神经元细胞凋亡,促进神经胶质细胞增殖,抑制炎性细胞浸润;3.补阳还五汤可以升高

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