毛细管电泳dna片段多态性分析

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1、第tx卷第w期色谱²¯qtx²qwt

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3、z年z月¸¯¼t

4、

5、zΞ毛细管电泳∆ΝΑ片段多态性分析韩富天33薛俊林炳承k中国科学院大连化学物理研究所大连ttystul提要对毛细管筛分电泳在片段多态性分析中的应用作了较为详细的论述o还对片段多态性研究的意义和作用进行了讨论∀关键词毛细管电泳o片段o多态性分类号yx{Ùx的发展中不断地显示其潜在的能力t ∀前言是由戊糖磷酸和碱基组合而成的一类线生命科学是当今乃至ut世纪最为重要的研究性大分子o分子量大小不同的片段有恒定的方向之一o它将给人类的生活带来巨大的变革∀生物电荷Ù质量比o

6、因此使用毛细管自由溶液区带电泳这工程研究给人类了解和战胜自然提供了强有力的武种依荷质比不同而分离的电泳方式不能进行器o其中基因工程研究是最为重要的一个环节o它以的分离∀鉴于此o必须在电泳中引入筛分机制∀在毛细管内填充筛分剂后o溶质在毛细管内不仅受到电体外重组为主导实现了生物技术从传统技术向高技术的转变o由此可能对困扰世界的重大问题场力的作用o而且还受到筛分剂的体积排阻作用o因诸如饥饿疾病能源和污染等提供解决方法o从而此具有相同荷质比但是分子大小不同的物质也可以对人类社会的生存和发展起到难以估量的推动作得到分离∀依据筛分介质的状态不同o毛细管筛分电用∀泳有凝

7、胶电泳和无胶筛分电泳之分o这两种分离方式都可以用于基因的分离分析∀片段多态性亦即基因的多态性是生命科学中的一个十分有趣而有重要意义的现象∀基因的毛细管电泳∆ΝΑ片段多态性分析多态性包括长度多态性和序列多态性两个方面的内容∀对基因的多态性进行分析有重要的现实意义∀片段多态性包括长度多态性和序列多态目前普遍使用聚丙烯酰胺平板电泳配合其它一性两个方面的内容∀长度多态性是指某些基因对于些生物技术来进行基因的多态性分析o方法虽然成不同个体或者在同一个体的不同生理状态下有长度熟但是却耗时耗力非自动化∀另外一种可以用来的差异o这种长度的差异来源于基因本身的性质差进行

8、基因多态性分析的手段为高效液相色谱法o但异k如高度重复序列卫星片段l或由于碱基是由于它的分辨率较低和成本较高而缺乏应用远的插入或缺失引起的基因突变∀基因的序列多态性景∀寻求一种方便快捷可靠而且自动化的基因多则指基因在碱基序列上的不同o这种基因序列上的态性分析方法是许多基因分析工作者的共同心愿∀不同往往来源于各种原因引起的基因碱基的替换o作为高效快速分析方法的毛细管电泳o近年来碱基替换的结果为基因长度仍保持o但是基因的碱已经成为分析化学中最重要的手段之一∀和传统的基序列发生了变化o亦即基因发生了点突变∀平板电泳方法相比o它具有高效高速高灵敏度的1

9、长度多态性分析特点o更为重要的是o它又是一种自动化的仪器分析基因的长度多态性分析包括以下几个方面的内方法∀目前毛细管电泳已被广泛地应用于蛋白质多容}其一o把一个基因用特定的限制性内切酶进行酶肽和核酸等生物大分子的分离分析研究o在基因领切o然后把内切片段做图谱o不同基因型的域的优势更加明显o被用于基因突变研究基因突变分子酶切后所得的片段长度各异o数目也不尽引起的遗传疾病肿瘤以及病毒感染疾病等的临床相同o这种方法叫限制性片段长度多态性分析kµ¨2诊断研究法医检验等领域的分离分析o并将在今后¶·µ¤¬±·©µ¤ª°¨±·¯¨±ª·«³²¯¼°²µ³«¬¶

10、°ol~对Ξ国家自然科学基金资助项目33通讯联系人本文收稿日期}t

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12、y2sv2uxo修回日期}t

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14、y2sy2uzvsu色谱tx卷基因的酶切产物进行毛细管电泳分析o然后对所得lo可以检测到基因的点突变∀所谓的的的电泳图谱进行比较o就可以判别基因型的异同∀其方法原理如下}如果双链中的某一个碱基发二o对一个基因的产物直接进行电泳分析o也生了突变而变成了另一个碱基o整个基因的构象只可以检测基因的长度变化o从而检测基因的缺失或会发生微小的变化o很难用电泳的方法把突变基因插入突变u 用此方法检测了致病的基因和正常基因分开∀而对于单链来讲o一个碱基o如¨

15、¯©¬等v 也通过基的变化就会引起整个链构型的较大变化o从而使运xs{和wxs¦ut的缺失突变~¨¶¬等因产物的直接分析检测到¨±±¨§¼氏病人基用毛细管电泳方法分离突变基因成为可能∀在分离因的插入突变∀其三o有的等位基因是由数目不等的之前o使用尿素等变性剂或热变性方法把双链重复单位串联起来组成的o依重复单位的长度不同变成单链o然后进行电泳分离o可以检测分别叫做°¬±¬¶¤·¨¯¯¬·¨k十几到几十个副产物l到基因的点突变∀在正常基因和突变基因的混合物和°¬¦µ²¶¤·¨¯¯¬·¨k几个副产物l~这种等位基因变性后进行电泳分离o除了得到少量复性双链的重复单位的

16、数目有种的或个体的特异性o针对k§¶l