《生物化学实验》教学大纲

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1、《生物化学实验》教学大纲  一.实验目的  二.实验内容  三.实验学时安排  四.考试方法  五.参考教材     一.实验目的  生物化学是一门实验性学科,其所有知识均来自于实验。本课程着眼于学生学习和掌握生物化学课程的基本理论、基本知识以及实验技能,培养学生具有初步分析问题和解决问题的能力。  生物化学实验课通过学习滴定、比色、纸层析、电泳、生化制备等基本实验技术,分析研究糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素等生化物质及某些代谢过程,培养学生具有初步的科学实验能力及严格的科学作风,同时验证生物化学的某些基本理论知识,加深感性认识,并锻炼初步的综合实验能力。返回顶部二.实验内容·实验

2、一 糖的呈色反应及还原糖的检验一.实验目的  学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法;了解鉴定还原糖的方法及其原理。二.实验内容  Molish反应、蒽酮反应、Seliwanoff反应、Bial反应、Fehling反应。三.实验过程1.呈色反应(1)Molish反应(2)蒽酮反应(3)Seliwanoff反应(4)Bial反应1.还原糖的检验(1)Fehling反应(2)Benedict反应(3)Barfoed反应四.作业与思考1.列表总结和比较本实验7种颜色反应的原理及其应用.2.应用Molish反应和Seliwanoff反应分析未知样品时,应注意些什么问题?3.举例说明那些糖属于还原

3、糖.·实验二 脂类组成对脂类单分子层通透性的影响一、实验目的  学习制作脂类单分子层和鉴定它的原理及方法,比较不同脂类所形成的脂类单分子层通透性的差异。二、实验内容  以脂类单分子层作为模式膜,用甲烯蓝为指示剂,观察不同脂类单分子层通透性的影响。三.实验过程1.溶液准备2.分光光度计测样四.作业与思考1.试述生物膜的基本结构与功能2.解释下列名词:双亲媒性分子、脂类单分子层、磷脂双分子层、膜的内在蛋白质和外在蛋白质.·实验三 蛋白质浓度的测定(1)——Folin-酚法一、实验目的  学习Folin-酚法的原理及方法,制备标准曲线,测定未知样品中蛋白质含量。二、实验内容  制备Foli

4、n-酚法标准曲线,测定未知样品蛋白质浓度。三.实验过程1.制备Folin-酚法标准曲线2.测定未知样品蛋白质浓度3.计算四.作业与思考1.Folin-酚法测定蛋白的原理是什么?2.有哪些因素可以干扰Folin-酚测定蛋白含量?3.作为标准蛋白的牛血清清蛋白或酪蛋白在应用时有何要求?·实验四 蛋白质浓度测定(2)——紫外线吸收法一、实验目的学习紫外线(UV)吸收法测定蛋白质含量的原理,了解紫外分光光度计的构造原理,掌握它的使用方法。二、实验内容标准曲线的绘制及未知浓度蛋白质溶液的测定。三.实验过程1.标准曲线的绘制2.样品测定四.作业与思考1.本法与其它测定蛋白质含量法相比,有哪些优点

5、?2.若样品中含有干扰测定的杂质,应如何校正实验结果?·实验五 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法一、实验目的  了解氨基酸滤纸层析的原理及操作方法。二、实验内容  进行氨基酸的纸层析及定性鉴定。三.实验过程1.滤纸的剪裁1.点样2.展层3.定性鉴定5.定量测定四.作业与思考1.做好本实验的关键是什么?2.实验操作过程,为何不能用手接触滤纸?3.影响Rf制的因素有哪些?·实验六 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳一、实验目的  了解电泳的一般原理,掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术,测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。二、实验内容  进行血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳并进行结果判断。三.实验过程1.

6、仪器与薄膜的准备2.点样3.电泳4.染色与漂洗5.透明6.结果判断与定量四.作业与思考1.根据人血清中血清蛋白各组分等电点,如何估计它们在pH8.6的巴比妥—巴比妥钠电解缓冲液中移动的相对位置2.简述醋酸纤维素薄膜电泳原理及优点·实验七 蛋白质和氨基酸的呈色反应一、实验目的  学习常用的鉴定蛋白质氨基酸的方法及其原理;学习几种特定氨基酸的特殊颜色反应及其原理。二、实验内容  双缩脲反应、茚三酮反应、黄色反应、茚三酮反应。三.实验过程1.加样2.观察四.作业与思考1.综合分析、对比蛋白质和氨基酸各种鉴定方法的特点和用途?2.如果蛋白质水解作用一直进行到双缩脲反应呈阴性结果,能对此作何结

7、论?3.茚三酮反应的阳性结果是否是同一色调?若不是,为什么?·实验八 蛋白质的沉淀、变性反应一、实验目的  了解蛋白质的沉淀反应、变性作用和凝固作用的原理及它们的相互关系;学习盐析和透析等生物化学的操作技术。二、实验内容  可逆沉淀反应,不可逆沉淀反应。三.实验过程1.蛋白质的可逆沉淀反应—蛋白质的盐析作用2.蛋白质的不可逆沉淀反应(1)重金属沉淀蛋白质(2)有机酸沉淀蛋白质(3)无机酸沉淀蛋白质(4)加热沉淀蛋白质3.蛋白质可逆沉淀与不可逆沉淀的比较四.

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