矫天昊基因工程的操作步骤学案

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1、星教育址劇O'辅导讲义矫天昊[k课日期2016.12.11课程类别JZx)x—/z(xz(xz(x础高优基提培授课教师余为国年级升高二上课吋间10:00-12:00科组长签字科冃生物第几学时25-26教学主任签字、教学目的1.简述基因工程基木操作程序的四个步骤2.尝试设计某一转基因牛物的研制过程二、上课内容【探究一】目的基因的获取：1.目的基因：符合人们需要的基因，主要指编码蛋白质的，也可以是一些O2.获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因看教材9页，弄清楚基因文库、基因组文库、部分基因文库的丽、I包含关系I及瓯。①

2、基因文库：将含有某种生物不同基因的许多,导人受体菌的群体屮，各个受体菌分别含有这种牛物的不同基因，称为基因文库。②种类：文库：含有—•种牛:物的基因。文库：含有一种生物的基因，如o③从基因文库中获取目的基因的方法根据基因的有关信息：基因的序列、基因的,基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因。①PCR含义：是一项在复制的核酸合成技术。②前提条件：有一段已知目的基因的序列，以便根据这一序列合成O③过程:看P10图卜——&第一步：加热至90〜95°C,目的是第二步：冷却到

3、55〜60°C,目的是第三步：加热至70〜75°C,目的是④扩增方式：指数扩增===2n(n为扩増循环的次数)(3)人工合成法：如果基因长度,核昔酸序列(已知、未知)，可以人工合成。【探究二】基因表达载体的构建1.构建基因表达载体的目的(或表达载体的功能)：使目的基因在受体细胞星y（教育瀝愚O*中,并且可以给下一代，同吋使目的基因可以O2.表达载体的纟H.成：+++o3.要求透彻理解：启动子、终止子、标记基因。启动子:位于基因的，它是识别和结合的部位，驱动基因转录产生o终止子：位于基因的,终止O标记基因：鉴别,从而将含冇II的基因

4、的细胞筛选出来。【探究三】将目的基因导入受体细胞（一）转化：目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和的过程。（二）方法1.将目的基因导入植物细胞（1）农杆菌转化法①农杆菌特点：易感染植物和裸子杭物，对植物没有感染力;Ti质粒的可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。②转化：目的基因插入d—农杆菌T导入植物细胞目的基因整合到植物细胞染色体上T目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。（2）基因枪法基因枪法：是单了叶植物中常用的一种棊因转化方法，但是成木较高。（3）花粉管通道法花粉管通道法：这是我国科淫家独创的一种方法，是一

5、种十分简便经济的方法。（我们的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）2.将F1的基因导入动物细胞（1）方法：注射技术。（2）操作程序：目的基因表达载体T取卵（受精卵）T显微注射T注射了目的基因的受精卵移植到—性动物的内发育-新性状动物。3.将1=1的基因导入微生物细胞（1）原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。（2）转化：处理细胞T细胞T表达载体与感受态细胞混合T细胞吸收DNA分了。三、家庭作业1.下列有关基因工程技术的正确叙述是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酚、连接酚和载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特

6、定的核百酸序列C・选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D.只要冃的基因进入了受体细胞就能成功实现表达2.构建基因组DNA文库时，首先得分离细胞的（）A、染色体DNAB、线粒体DNAC、总mRNAD、tRNA1.在基因工程屮，把选出的目的基因（共1000个脱氧核昔酸对，其屮腺嚟岭脱氧核莒酸是460个）放入DNA扩增仪屮扩增4代，那么，在扩增仪屮应放入胞唸噪脱氧核莒酸的个数是（）A.540个B.8100个C.17280个D.7560个星*教育盘憋O*1.聚合酚链反应可表示为（）A、PECB、PERC、PDRD、PCR2.在已

7、知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是（）A、化学合成法B、基因纟fl文库法C、cDNA文库法D、聚合酶链反应3.钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方而的杰岀成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物屮检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知（）A.该生物的基因型是纯合的B.绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达C.该生物与水母有很近的亲缘关系D.改变绿色荧光蛋白基因的1个碱基对，就不能检测到绿色荧光4.对基因组文库的描述，不正确的是（）A.含有某种生物的全部基因B.基因屮含有启动

8、了和内含了A.文库的基因是通过受体菌承载的D.文库屮的全部基因可以在物种间交流5.不属于目的基因与载体结合过程的是（）A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端B.用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端C.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增D.将切下的冃