自编基因工程操作步骤学案

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1、山东省昌乐一中2011-2012高二生物学案必修三编号052012.1.4班级姓名1．2基因工程的基本操作程序编制：王福玲徐军胜审核：王福玲审批：【学习目标】：简述基因工程原理及基本操作程序。【重点难点】：1.基因工程基本操作程序的四个步骤。2.从基因文库中获取目的基因。3.利用PCR技术扩增目的基因。【自主学习】基因工程的基本操作程序主要包括4个步骤：　　　　　　的获取、基因表达　　　　的构建、将　　　　　　　　　　　　　　细胞、　　　　　　　　　　的检测与鉴定。一、目的基因的获取1、概念：目的基因主要是指编码蛋白质的　　　　　。也可以是一些具有调控作用的

2、因子。2、来源：（1）可以从自然界中已有　　　　　　　　　中直接分离出来。（2）从　　　　　　中获取目的基因。3、获取目的基因的方法：根据基因的有关信息，如基因的　　　　　　　序列，基因功能、基因在　　　　　上的位置、基因的转录产物　　　　，以及基因的翻译产物　　　　　等特性来获取目的基因。（1）利用PCR技术扩增目的基因：①PCR技术是一项在生物体外复制　　　　　　片段的核酸合成技术。②条件：提供已知　　　　　　的核苷酸序列，根据这段序列合成　　　　。（2）人工合成方法：当基因较小，核苷酸序列已知时，可以用人工方法合成（例如，通过　　　　　　直接合成）。二

3、、基因表达载体的构建1、表达载体的组成表达载体：目的基因、　　　　　　、　　　　　　、标记基因。启动子：它是一段有　　　　　　　　　，位于基因的首端，它是　　　　　　　的识别和结合部位，起动转录mRNA。终止子：位于基因的尾端，终止　　　　过程。标记基因：用于　　　　受体细胞是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。2、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中　　　　存在，并且　　　　　　给下一代，同时使　　　　　　能够表达和发挥作用。三、将目的基因导入受体细胞1、将目的基因导入植物细胞（1）农杆菌转化法：①转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细

4、胞内维持稳定和表达的过程，称为　　　　。②农杆菌特点：在自然条件下能感染　　　　　植物和　　　　植物，，对　　　　植物没有感染力；Ti质粒的　　　　可以转移至受体细胞，并整合到受体细胞的　　　　　　　　　上。（2）基因枪法又叫　　　　　　　　　　。5（3）花粉管通道法：利用花粉管通道使目的基因进入　　　　，然后进入　　　　　　。2、将目的基因导入动物细胞（1）方法：　　　　　　　　　　　　　。（2）操作程序：目的基因的　　　　　提纯→取卵（受精卵）→　　　　　　　→移植子宫内发育→新性状动物3、将目的基因导入微生物细胞（1）原核生物的特点：，　　　　　　　　

5、　　　　　　　　　　　　　　　。（2）常用的受体细胞：　　　　　　　　　　　。（3）转化：　　　处理细胞→　　　　　　细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收　　　　分子，完成转化。四、目的基因的检测与测定1、检测：（1）方法：　　　　　　　　　　　　　。（2）原理：碱基互补配对（3）内容：①检测转基因生物的染色体DNA上的　　　　　，原理是　　　　　　　技术。②检测目的基因是否转录出　　　，原理是　　　　　　　　技术。③检测目的基因是否翻译成蛋白质，原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。2、鉴定：个体生物学水平鉴定，如抗虫、抗病鉴定等。【自

6、学检测】1.下列正确表示基因操作“四部曲”的是（）A．提取目的基因→目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测和鉴定B．目的基因的检测和鉴定→提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞C．提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定D．基因表达载体的构建→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定2．下列不属于获得目的基因的方法的是（）A．利用DNA连接酶复制目的基因B．利用DNA聚合酶复制目的基因C．从基因文库中获取目的基因D．利用PCR技术扩增目的基因3.下列哪项不是基因表达载体的组

7、成成分（）A．启动子B．终止密码子C．标记基因D．复制原点4.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法（）A．基因枪法B．显微注射法C．农杆菌转化法D．花粉管通道法答案：CABB【课堂探究】一、目的基因的获取1、如何从基因文库中获取目的基因？2、PCR技术与DNA复制的异同点？二、基因表达载体的构建1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？52、绘一个基因表达载体示意图：三、将目的基因导入受体细胞1、课本15页思考与探究第2题、第3题2、.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因

8、吗？3、思考：早期基因工程为什么选用原核生物作为受体