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《《陈新-生理科学实验教学资料》预习报告-实验21-药动学实验》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、预习报告实验21药动学实验实验日期：4月19日时间：温度：组员：黄婷沈童受试对象：小鼠、家兔性别：一、药物在体内的分布【目的】观察小白鼠口服磺胺W密喘（sodiumsulfadiazine,SD-Na）后一定时间血液、肝脏、脂肪组织中药物的浓度，以了解药物在体内分布的情况。【材料】体重25克以上雌性小鼠；80-2型离心机，组织匀浆器，7200型数字式分光光度仪或721分光光度计；酸式及碱式滴定管（供加试剂用）o150g/L磺胺U密喘钠溶液，5%三氯醋酸溶液，5g/L麝香草酚溶液，5g/L亚硝酸钠溶液。【方法】1.测定血中SD浓度（1）
2、取小白鼠一只,用SD-Na溶液1.5g/kg（150g/LSD-Na,0.1ml/10g）灌胃，记录给药时间,于给药后45%0分钟剪断股动脉或取眼球放血，将血滴入含有肝素或枸橡酸钠的离心管中。（2）取血0.2ml置另一试管内，加5%三氯醋酸溶液9.8ml,充分振荡后放置10分钟，过滤。（3）取滤液6ml,加入5g/L亚硝酸钠溶液0.5ml,充分摇匀后再加入5g/L麝香草酚溶液（以200g/L氢氧化钠溶液配制）1.0ml,摇匀，放置10分钟后，用7200型分光光度计测定（460nm波长），记录所得光密度，从标准曲线查得磺胺喘噪浓度，所得
3、数即为血中SD-Na浓度。2.测定肝、脂肪中磺胺嗪呢浓度（1）小鼠放血后，打开腹腔取肝脏及脂肪组织（睾丸或卵巢附近处脂肪组织较多，此外两腹股沟处皮下亦有一定数量脂肪组织供取用）于培养皿中，肝脏和脂肪组织分别剪碎。（2）秤取0.5克肝组织置于盛5%三氯醋酸溶液2.0ml之匀浆器中研碎，将匀浆倒入另一中试管,再加5%三氯酷酸2.0ml研磨一次，匀浆也倒入上述试管屮，然后以5%三氯醋酸溶液洗涤匀浆器,溶液也倒入上述试管中，总容积达10ml为止，充分振摇，静置10分钟，过滤。（3）取滤液6ml,加入5g/L亚硝酸钠溶液0.5ml,充分摇匀后再
4、加入5g/L麝香草酚溶液1.0ml,摇匀后静置10分钟，用7200型分光光度计测定（460nm波长），记录所得光密度，从标准曲线上查得磺胺“密咙钠浓度，将此数值乘以2/5（因所取组织量为0.5g）即为肝中SD-Na浓度。（4）依同法测定脂肪组织屮SD-Na浓度。3.标准曲线的制备：于一系列试管中，分别加入lg/L、0.8g/L、0.6g/L>0.4g/L、0.2g/L、O.lg/L、0.05g/L的SD-Na溶液0.2ml,再分别加入5%三氯醋酸溶液9.8ml,摇匀，取6ml再依次加入5g/L亚硝酸钠溶液0.5ml,5g/L麝香草酚液
5、lml,摇匀后静置10分钟，以7200或721型分光光度计（460nm波长），记录各管的光密度。以光密度为纵座标，SD-Na浓度（mg/100ml）为横座标，在座标纸上绘一标准曲线。【观察项目】测定血、肝和组织中的SD-Na浓度并将数据填入表中。表•小鼠口服SD・Na后不同组织的含量比较组织SD浓度（mg/100ml）血肝脂肪二、静脉注射苯酚磺酥的药动学参数计算【目的】了解药动学研究的方法学。通过给正常家兔和肾功能受损家兔静脉注射苯酚磺酿(Phenolsulfonphthalein,PSP)实验，观察PSP在体内随时间变化的代谢规律，
6、学习药动学参数的计算方法，了解肾功能受损对药动学的影响。【材料】家兔两只；离心机，7200数字型分光光度计；6g/LPSP溶液，60g/L升汞溶液，200g/L氨基甲酸乙酯或10g/Lsodiumpentobarbital,稀释液(0.9%NaCI29ml+lNNaOHlml),lOg/L肝素钠。【方法】1.肾功能受损家兔实验前48小时给家兔皮下注射60g/L升汞溶液0.2ml/kg,至实验开始时该兔的肾功能己受相当损害，此即肾功能受损兔。2.取肾功能正常及肾功能受损的家兔各1只，称重后用200g/L氨基甲酸乙酯5ml/kg行静脉麻醉
7、(lg/kg体重)，肾功能受损家兔麻药剂量减至2/3。兔麻醉后背位固定于兔板，切开颈部皮肤，分离肌层，暴露颈动脉，并游离约3~4cm长，结扎远心端，用动脉夹夹住近心端，在靠近结扎的部位用眼科手术剪在动脉壁上剪一"V〃形小切口，插入动脉插管，结扎固定。取血吋松开动脉夹即可。3.从耳缘静脉注射10g/L肝钠素lml/kg,在另一侧耳缘静脉注射6g/LPSP溶液(0.2ml/kg体重)。注射后第2、5、10、15、20、25分钟分别从颈动脉取血2ml(注意每次取血前应将导管内的陈血放去)，置于刻度试管内，离心10分钟(2000转/分)后取血
8、浆0.2ml,置于另一试管，加稀释液3ml摇匀待测定。4.PSP血浆浓度计算以7200分光光度计在波长520nm处测定PSP含量。先用稀释液调零，然后测定稀释血浆的吸光度。将测到的吸光度乘以8.13(实验室己利用不同浓度
