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1、专业:预防医学0501姓名:朱晶晶用沪/叨实验报告囂益囂注地点:生理学实验室课程名称:生理科学实验实验类型:研究型实验实骑项目名称:肾上腺素、乙酰胆碱、钾和钙离子对离体蟾赊心脏活动的影响同组学生姓名:汪晓敏指导老师:陆源肾上腺素、乙酰胆碱、钾和钙离子对离体蟾赊心脏活动的影响朱晶晶3051861005浙江大学医学院预防医学0501班【摘要】目的:学习离体心脏灌流的方法。观察钙、钾离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蛛心脏活动的影响并探讨各作用机制。方法:应用微机生物信号采集处理系统记录分别加入上述药物后蟾赊离体心脏搏动变化曲线
2、。结果:用低钙任氏液灌流后,实验组的舒张末期张力为(0.89±0.32)g,收缩末期张力为(1.71+0.67)g,心率是(34.88±14.85)bmp;用高钙溶液灌流后,实验组的舒张末期张力为(0.41±0.11)g,收缩末期张力为(6.30±2.94)g,心率是(36.38±9.81)bnip;用高钾溶液灌流后,实验组的舒张末期张力为(0.55±0.30)g,收缩末期张力为(1.85±1.25)g,心率是(28.13±14.61)bmp;用肾上腺素灌流后,实验组的舒张末期张力为(0.35±0.11)g,收缩末期张力为(
3、9.62±3.20)g,心率是(35.50±10.82)bmp;用普奈洛尔溶液灌流后,实验组的舒张末期张力为(0.51+0.27)g,收缩末期张力为(3.09±2.08)g,心率是(34.88±10.19)bmp,加灌肾上腺素后,实验组的舒张末期张力为(0.50±0.22)g,收缩末期张力为(3.15±2.14)g,心率是(34.75±10.05)bmp;用乙酰胆碱灌流后,实验组的舒张末期张力为(0.60±0.32)g,收缩末期张力为(2.30±1.66)g,心率是(32.88±9.82)bmp,加灌阿托品后,实验组的舒张末
4、期张力为(0.46±0.20)g,收缩末期张力为(3・39±2.07)g,心率是(31.75土&94)bmp。结论:血钙浓度升高,心脏收缩加强;血钙浓度降低,心脏收缩力减弱。钾离子浓度升高,心肌收缩、传导都减弱,导致心肌收缩力减弱,心动过缓。肾上腺素能够激活卩受体,使得心脏收缩加强。普奈洛尔能够非选择性地阻断卩受体。能使节律减慢,心肌收缩力降低。乙酰胆碱能与其对应的受体结合,使心肌收缩能力减弱。阿托品能够阻断M受体,提高心脏收缩能力。1.材料和方法1.1材料1.1.1实验动物:中华蟾赊1.1.2实验试剂:肾上腺素,乙酰胆碱,
5、普奈洛尔,阿托品,以上均购于美国Sigma公司;氯化钾,氯化钙,任氏液(Ringer,ssolution),低钙任氏液,其余试剂为市售分析纯试剂。1.1.3实验器材:RM6240多道生理信号采集处理系统(成都仪器厂),JZJ01张力换能器(成都仪器厂)。蛙类手术器械,蛙心插管,滴管,铁支架1.2方法1.2.1仪器连接和参数张力换能器与RM6240多道生理信号采集处理系统相连,RM6240多道生理信号采集处理系统采样频率:400Hz,吋间常数:直流,滤波:30Hz,灵敏度:7・5g。1.2.2离体蟾赊心脏标本制备蟾赊毁脑脊髓,
6、蟾赊仰卧于蛙板,打开蟾赊胸腔,暴露心脏,结扎下腔静脉,靠头端结扎右主动脉,在左、右主动脉下穿线,在右主动脉根部剪一斜口,将插管插入动脉圆锥,在心室收缩时将插管插入心室,结扎固定,游离心脏。1.2.3心脏与换能器连接将蛙心插管固定在夹具,蛙心夹连线通过滑轮连至张力换能器。用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖,调节微调使心脏舒张期至lgo2.观察项目2.1向插管中加入lml任氏液,心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45s。2.2无钙任氏液lml替换插管内的任氏液,心搏曲线稳定后记录45s。2.3用任氏液洗脱3次,加入lml任氏液,待曲线稳
7、定45s后,向灌流液中加11X10*MCaCl2溶液25)11,心搏曲线稳定后记录45s。2.4用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1ml任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中加5X10_:iMKC1溶液25(11,心搏曲线稳定后记录45s。2.5用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入lml任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中加6X1001的adrenaline(Adr)溶液25(11,心搏曲线稳定后记录45s。1.6用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1ml任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中力口5X10'Mpro
8、pranolol(Pro)溶液25(11,心搏曲线稳定后记录45s,再加入6X10'5M的Adr溶液25
9、11,心搏曲线稳定后记录45s。1.7将上述溶液吸出,用新鲜任氏液换洗数次,加入lml任氏液,待曲线稳定后记录45s,在任氏液中加6X106M的acetylcholine(ACh)溶液