抗凝系统与纤溶系统检查

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1、项目抗凝系统与纤溶系统检查模块1抗凝系统的检验血液凝固的控制1.血管内皮的抗凝作用;2.纤维蛋白的吸附、血流的稀释及单核巨噬细胞的吞噬作用;3.生理性抗凝物质(1)丝氨酸蛋白酶抑制物抗凝血酶III:由肝细胞和血管内皮细胞分泌的一种糖蛋白。抗凝血酶III可以与FIXa、FXa、FXIa、FXIIa和凝血酶分子中的丝氨酸残基结合,使凝血因子和凝血酶活性中心失活。肝素辅助因子。(2)蛋白质C系统(3)组织因子途径抑制物(4)肝素:由肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生的一种粘多糖。抗凝机制:a.可与抗凝血酶III结合,增强抗凝血酶III的抗凝作用。b.还可刺激血

2、管内皮细胞释放组织因子抑制物和其他抗凝物质来抑制凝血过程。1、静脉采血(同前)2、凝血酶时间测定(TT)【实验原理】凝血酶可使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。在血浆中加入“标准化”的凝血酶后,血浆凝固所需时间称为凝血酶时间。【试剂】1.0.1mol/L草酸钠溶液。2.凝血酶溶液用生理盐水调至使正常血浆在16-18s凝固为标准。【操作方法】取抗凝血浆0.1ml于小试管内,置37℃水浴中,加凝血酶溶液0.1ml,同时开动秒表,记录凝固时间。重复2-3次,求平均值。【质量控制】血浆在室温下放置不能超过3h,EDTA盐和肝素抗凝血不宜做本试验。TT终点以出现混

3、浊的初期凝固为准。【临床意义】正常为16-18s,超过正常对照3s为异常。TT延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在,如SLE、肝病、肾病等;低(无)纤维蛋白原血症、FDP增多、DIC等。模块2纤溶系统的检验止血栓的溶解纤溶意义:1维持血液于流体状态2溶解血栓使血流通畅1、静脉采血(同前)2、血浆纤维蛋白原检测(Fg)【实验原理】以凝血酶作用于受检者血浆中的纤维蛋白原,使其发生凝固,测定凝固所需时间。血浆纤维蛋白原的量与凝固时间程负相关,将检测结果与标准曲线对比可得出纤维蛋白原含量。【试剂】1.凝血酶溶液2.参比血浆3.蒸馏水和血浆稀释液【操作方法

4、】取1:10稀释的抗凝血浆0.2ml于小试管内,置37℃水浴中预热2min,加凝血酶溶液0.1ml,同时开动秒表,记录凝固时间。重复2-3次,求平均值。与参比血浆检测结果制成的标准曲线或回归方程比较,得出检测结果。【质量控制】血浆在室温下放置不能超过3h,EDTA盐和肝素抗凝血不宜做本试验。参比血浆应与待测血浆一起检测,保证结果的可靠性。【临床意义】正常为2-4g/L。纤维蛋白原增高除生理情况下的应激反应、妊娠后期外,主要出现在感染、灼伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤、糖尿病、妊高征、败血症及某些恶性肿瘤及急性肾炎尿毒

5、症等。纤维蛋白原减少则见于DIC、原发性纤溶亢进症、重症肝炎、肝硬化和溶栓治疗时。3、血浆D-二聚体检测(Fg)【实验原理】胶乳凝集法:D-二聚体是教练纤维蛋白降解产物之一,为继发性纤溶的特有代谢产物。被检测血浆中加入标记D-二聚体单抗的胶乳颗粒悬液,如果血浆中D-二聚体含量时,便与胶乳颗粒上的抗体结合,胶乳颗粒则发生凝集。根据被检测血浆的稀释度可计算血浆。【试剂】D-二聚体检测胶乳凝集试剂盒【器材】微量加样器、离心机等【操作方法】1、制备被检者枸橼酸那抗凝的新鲜血浆。2、取胶乳试剂20μl,至于胶乳反应板的圆圈内,加入被检者新鲜血浆20μl,迅

6、速搅匀,轻摇3-5min。3、在较强的光线下观察结果,出现明显均匀的凝集颗粒者为阳性(D-二聚体含量大于0.5mg/L),无凝集颗粒者为阴性(D-二聚体含量小于0.5mg/L)【质量控制】实验所用试剂盒应置于2-8oC保存,勿冻结,使用前从冰箱拿出,室温平衡。胶乳反应板应保持清洁干燥。测定温度高于20oC或低温环境应延长1-2min观察结果。【临床意义】正常为小于0.4mg/L。1.DIC时,D-二聚体检测阳性或增高,为诊断DIC的重要依据。2.深静脉血栓形成、心肌梗死、重症肝炎、肺栓塞等血栓性疾病D-二聚体增高。3.D-二聚体在继发性纤溶症时阳

7、性或增高,而原发性纤溶症时阴性或不增高,是鉴别两者的重要指标。4.作为溶栓治疗有效的观察指标。模块3弥散性血管内凝血病例李某,女,25岁,已婚,职员。因妊娠39+周,伴下腹痛作产3小时,于1998年10月28日下午5时入我院产科。该孕妇末次月经为199,8年1月3日后停经,妊娠约3个月时有晨起恶心、作呕、胃纳欠佳,经检查确诊为妊娠。于妊娠6个月开始在我院作产前检查,据称均为正常。于妊娠8个月在产前检查时,据说血压偏高,达20/13kPa。下肢有轻度浮肿,尿常规检查偶有蛋白(+)。医生说“有轻度妊娠高血压综合症”,以后一直服药并作产前检查,其余无不

8、适。3个小时前开始下腹部有阵发性痛而即来就诊入院。既往史:无肺结核、肝炎病史,无肾病、高血压病史,平时无感冒。个人史:无特殊嗜好,已作乙

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