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《GBT5413.12-1997 婴幼儿配方食品和乳粉 维生素B2的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、GB(T5413.12-1997前言本标准给出两种方法，方法一是荧光法，重现性好，准确度高。方法二是高压液相色谱法，测定速度J决。本标准方法一为仲裁法。本系列标准从实施之日起，代替GB5413-85,本标准由中国轻工总会提出。本标准由全国乳品标准化中心归口。本标准负责起草单位‘国家乳制品质量监督检验中心、浙江省轻工业研究所。本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司。本标准主要起草人:李茂胜、任一平、黄百芬、郎昭斌、陈青俊、王芸。中华人民共和国国家标准婴幼儿配方食品和乳粉GB/T5413.12-1997维生素B2的测定代替
2、GB5413-85Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren-DeterminationofVitaminB2content1范围本标准规定了用荧光法和高压液相色谱法测定维生素B,的方法.本标准方法一适用于乳粉中维生素B2含量的测定;方法二适用于婴幼儿配方食品和乳粉中维生素B,的测定。方法一荧光法2方法提要样品在稀盐酸溶液中经消化，调整pH值，过滤，除去蛋白质等物质后，滤液加高锰酸钾氧化除去干扰物，此溶液中维生素B，在激发波长440nm、发射波长565nm下可产生最大荧光强度，与标准样品做对照试验，可得维生素B:含量。3
3、试荆所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。3.1盐酸,c(HC1)为0.lmol/L,3.2氢氧化钠:c(NaOH)为400g/L,3.3冰乙酸。3.4高锰酸钾:c(KMnO,)为40g/L,3.5过氧化氢:体积分数为3%.3.6连二亚硫酸钠(NaS104·2H20),3.7维生素B:标准溶液3.7.1维生素B,标准贮备液，浓度为100pg/mL,准确称取于暗处五氧化二磷条件下干燥过夜的维生素B250.Omg,溶于。.02mol/L的乙酸中，定容至500mL，甲苯条件下于冰箱中保存。3.7.2维生素B:标准中间液，浓度为1Opg/mL,
4、用。.02mo1/L乙酸稀释100mL标准贮备液至1000mL，在甲苯条件下于冰箱中保存。3.7-3标准工作液，维生素B:的浓度为lpg/mL,用水稀释10mL标准中间液至100mL。当天配制。国家技术监借局1997一05一28批准1998一09一01实施GB/T5413.12-19974仪器常用实验室仪器及:4.1荧光分光光度计。5操作步驻5.1抽提于150mL三角瓶中准确称取5g左右样品，加人盐酸(3.1)60mL，用铝箔纸盖住瓶口，在137.2-161.7kPa压力下(1251C)消化30min后用氢氧化钠(3.2)调节pH至5.8，再用盐酸(3.1)调节pH至4.5，将
5、此抽提液移入100mL容量瓶中以燕馏水定容，过滤，吸取25mL滤液于250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。5.2抽提液的氧化5.2.1吸取4份样品抽提液(5.1)，每份lOmL，于4个试管中。5.2.2于其中二个试管各加1mL标准工作液(3.7.3),5.2.3于另外二个试管中各加1mL水。5.2.4加1mL冰乙酸(3.3)于每一试管中，混匀。5.2.5加高锰酸钾溶液(3.4)0.5mL于每个试管中，混匀。5.2.62min后各加过氧化氢(3.5)0.5mL,混匀，使其褪色。5.3荧光测定依次测定每管荧光强度，激发波长440nm，发射波长565nm,样液管(未加标准工作液者)
6、经荧光测定后，各加20mg连二亚硫酸钠(3.6)混匀，立即测定荧光，在5s内读数。6分析结果的襄述(I.一1,)XcXD样品中维生素B:含量(mg/l00g)二X100.··一(1)(I,:一1,)X10Xm-X10丽式中:I,-空白样品荧光值;I,—样品荧光值;I=—样品加标样荧光值;‘—标样质量浓度，pg/mL,D—样品稀释倍数;m—样品的质量，9。值必须在。.66-1.5之间.了允许差同一样品两次测定值之差不得超过两次测定平均值的5%.方法二高压液相色谱法8方法提英样品在稀盐酸环境中高温水解、酶解，经ODSC,，反相色谱柱分离，在荧光检测器(E.:462,Em522nm)
7、中检测，用外标法定量维生素B:的含量。6B/T5413.12-19979试剂所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。9.1浓盐酸。9.2无水乙酸钠。9.3冰乙酸。9.4甲醇:色谱纯。9.5核黄素(维生素B}):标准品。9.6盐酸溶液:c(HCI)为0.1mol/L。吸取4.5mL浓盐酸，溶于500mL去离子水。9.7盐酸溶液:c(HCI)为0.0lmol/L。吸取上述0.1mol/L盐酸50mL，配制成500mL.9.8乙酸钠溶液(pH=4.5):c(
