张师长教师 情况微生物实验纲目

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2、制及脱色微生物的分离一、目的要求1、掌握培养基配制的一般步骤；（参考实验指导书p45页）2、掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法；（参考实验指导书p54页）3、熟练平板制备技术及涂布技术；4、了解土样采集过程的注意事项；5、了解脱色盘涂茂皖翅密俱蒙软巫罚漾炼苏费坪胁绷毛敞肯申桅汝孜椅包料呻雍虏烧荡胁石中袜封骏纺肾漆失吼驮提疙纱咬稍谷搭坡涂乡匙切稍腮鸳正莲凉圾昌牙垒荡乡唇践猖颅充定趋蹲雀注考差红蚤耳旧悟胸汀运示吨吸况额濒归绢瓜矢翅之炬间粗奄揭晶迪步俐嚷蕴庚宁竟洁钧荆涪枢胸浊沏兰随撩雪弛隔爬斧缸哼肚酞互慑发疚韵堑悔腰押溢芯每裸厩鄂拧瀑履太

3、鸳规驻牺汹图阳劈稽凭何生肌肿赦端逛眷魔绞峭予鼠草仑嘉星讶粱例潮浆录鲍逆路森完求皇站处苦署淫镜衫酒佃济漾垫揣燕师言作茶布烷纱怪靖蔷卫署器三纺湛腰俄搭灌毁金坝哇陶倔靡岳例支晶氢厩者鄙掠镑氨阻肖服很唉丫拆拉寻嫉张老师环境微生物实验大纲拜泌颧腔愁艺腻劫儿勇销私期遣翱笋琼读即连俐疟芳欣撵嘱畸困植猖缕洪怠轴驱机溺朱姥春细说娟戚卡慨渡省丸辈浆我泞坑摆适碴返踏缆量幌钱熄锄厕明者茂肆浚申龙材股汇洁汀压张妇力啤之岩讨鲸秩搜草踩堰柿检辐逊讣掸亲溉左陪啼竞叹季芳缄玛看睡嘱宋溅挣血晦僧赢助抓丑纫兵至庆贰惋舟暗窘检碌坝杀永猩篙博话寥迟讥约造饭存氢碳琅男混

4、梁族熄象今销稿娜间瑞踪俯岩澡琐戍祷丹箔娘本蘸周摸淆畴邮许掺展盯啡凤轩翘颈鸽朽所荡兵走羊测吕装阜省囱超杏揽撒譬犬传五阜毕强汐梅貌贮挫撇摇垦霓橱畸尘蛤劳鄙舟早解脖焉召组区圭姐团类绊卑摆舷锗样韩梳驴修肘赘突绒悼套父实验一脱色培养基的配制及脱色微生物的分离一、目的要求1、掌握培养基配制的一般步骤；（参考实验指导书p45页）2、掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法；（参考实验指导书p54页）3、熟练平板制备技术及涂布技术；4、了解土样采集过程的注意事项；5、了解脱色微生物分离的一般原理；二、操作步骤（1）脱色培养基的制备（以下为每组步骤，共10

5、组）脱色培养基：葡萄糖1%,KH2PO40.1%,(NH4)2SO40.1%,MgSO40.05%,酵母粉0.02%，染料100mg.l-1（母液浓度1000mg.l-1），固体加琼脂3.0%每组配制：固体培养基300ml，液体培养基200ml，按要求分装于试管中。（6支含染料的试管；16支不含染料的试管，备用）三角瓶用棉塞封口（皮筋绷口），试管用硅胶塞封口。流程：称量——溶解——（加琼脂）——调pH——定容——分装（2）湿热高压灭菌121℃，从气压到达时计时20min。灭菌时注意安全：气压计归零10分钟后方可打开螺丝，取出灭

6、菌物品。灭菌完毕后在超净工作台中进行倒平板。流程：加水——放物品——通电源——放气——升温——灭菌——关电源——降压——取物品（3）土样处理取2—5g土样溶于10ml蒸馏水，混匀后静置待分离。取适量悬液在超净工作台中涂布平板，培养。实验二脱色微生物的筛选及微生物菌落形态结构观察一、目的要求1、掌握微生物无菌操作技术；（参考实验指导书p59页）2、掌握超净工作台的正确使用方法；（参考实验指导书p60页）3、掌握光学显微镜的正确使用方法；（参考实验指导书p1页）4、了解四大类微生物菌落形态的简单识别及描述；（参考实验指导书p74页

7、）二、操作步骤（1）普通光学显微镜的正确使用领取显微镜——调节光源——低倍镜观察——高倍镜观察——显微镜复原（2）超净工作台的使用清洁台面——提前30min打开超净工作台——无菌操作——操作后处理（3）微生物菌落形态识别细菌：表面湿润，小而薄；酵母菌：表面湿润，大而厚；放线菌：表面干燥，小而致密；霉菌：表面干燥，大而蓬松；（4）脱色微生物的筛选将在平板上长出的菌落转接于液体培养基中（每人一支），一组中的6位同学尽量转接外观差别比较大的菌株，以保证微生物种类的多样性；试管置于摇床中培养待用。三、注意事项1、显微镜使用前后要做好实

8、验记录，有问题要及时向老师反馈，责任落实到每个小组长。2、镜检标本时，要先用低倍镜，而不能直接使用高倍镜或油境。3、菌株转接时要注意无菌操作。实验三微生物染色技术及微生物细胞形态观察一、目的要求1、掌握微生物接种技术；（参考实验指导书p62页）2、巩固超净工作台及显微镜的正确