高级生物化学

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1、原核转录与真核转录的比较答:1原核生物中mRNA的转录与翻译几乎是同步发生的,而真核生物,转录是发生在细胞核内,翻译则在核外进行.转录合成的RNA必需穿出核膜才发挥作用.2RNA聚合酶不相同,原核生物中RNA由一种聚合酶合成.真核生物中有三种类型的RNA聚合酶.3启动子不同真核生物的启动子与原核生物的很相似,也位于转录起始部位的5/端,但存在着几个重要区域.例如在距起始部位最近的一个是-25区,称为TATA匣子,与原核生物的-10顺序(TATAAT)很相似.4转录后RNA加工修饰不同其中mRNA最为突出.真核生物mRNA分子的寿命较长,不像原核生物的

2、只有几秒钟.而且不用加工修饰.真核生物mRNA在5/和3/端都要修饰,5/端要形成一种称作帽子的复杂结构.3/端则要加上一段多聚腺嘌呤核苷酸[poly(A)]的顺序。Replicator:起始子，决定DNA复制起始的序列。Initiator:起始因子，识别并作用起始子，启动复制的蛋白质。必需氨基酸（essentialaminoacid）:必须从食物中摄取，以维持生物体正常功能的氨基酸，赖（Lys）、苏（Leu）、异亮（Ile）、苯丙（Phe）、甲硫（Met）、缬（Val）、色（Trp）。蛋白质一级结构（primarystructure）：蛋白质的多肽

3、链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键位置。特点为是基础结构、稳定结构。测定蛋白质一级结构的一般步骤（1）测定蛋白质分子中的多肽链数目（2）拆分蛋白质分子的多肽链（3）测定多肽链的氨基酸组成（4）测定多肽链的C端（肼解法）和N端（丹磺酰氯法）残基（5）断裂多肽链内的二硫键（6）用两种以上的方法将多肽链断裂为数个肽段（E法和化学法（溴化氰法））（7）测定肽段的氨基酸顺序（Edman法）（8）用拼版法确定多肽链的氨基酸排列顺序（9）确定肽链间的二硫键蛋白质一级结构测定的常用方法㈠末端残基的测定：⑴N-端残基的测定：丹磺酰氯法（DNS）,该法原理与Sanger法

4、相同，但产物有荧光，因此灵敏度高。②Edman法③氨肽酶法。（2）C-端残基的测定：肼解法、还原法、羧肽酶法。㈡二硫键的断裂与巯基的保护。㈢多肽链的断裂：至少要用两种不同的方法①酶法②21化学法。酶法：用不同的蛋白酶水解同一肽链，得到不同的肽段，常用的蛋白酶及其专一性为：胰蛋白酶：羧基端为Lys和Arg的肽键；胰凝乳蛋白酶：羧基端Phe,Trp和Tyr的肽键；化学法：常用溴化氰法。㈣肽段氨基酸顺序的测定：常用Edman法。㈤多肽链氨基酸顺序的确定：拼版法。稳定蛋白质三维结构的作用力（1）氢键（2）离子键（3）配位键（4）疏水作用：是在极性环境中，氨基

5、酸的疏水基团之间的聚集力。（5）二硫键是Cys残基的硫氢基之间通过氧化形成的共价键，存在较少，但是由于它是共价键，所以在维持蛋白质分子构象中也起主要作用，分为链间二硫键和链内二硫键。（6）范德华力当分子间结合的结构最匹配时，范德华力最大。蛋白质的立体化学原理（1）肽键平面（peptideplane）形成原因：共轭，肽键不能自由旋转。结果：形成刚性平面，又叫酰胺平面。（2）二面角（dihedralangle）共用同一原子的两个平面间的夹角称为二面角，决定主肽链骨架的构象。（3）非键合原子最小接触距离决定R基及其原子在空间的排列。蛋白质的二级结构（sec

6、ondarystructure）在规则氢键指导下，局部主肽链在空间的排列。1、螺旋（helix）：螺旋的表示方法“nsR或L”，其中n表示上升一圈的氨基酸数，s表示氢键形成的环中所含的原子数，R或L表示螺旋的旋转方向。2、β折叠片（β-pleatedsheet）：多个β折叠股平行排列通过氢键形成β折叠片。平行的每个重复周期为0.65nm，反平行0.7nm。3、回折（reverseturn）或称转角（turn）。4、β-发夹（β-hairpin）：它是由一条构想伸展的肽链弯曲，彼此靠近并呈反向平行的发夹状状结构（刚性结构），包含10或11个氨基酸残基，

7、两条等长的肽段依靠1～6个氢键连接起来。5、无规则卷曲（randomcoil）：这是一种没有一定规律的结构（软性结构），但是又是蛋白质执行功能的结构部位。6、三股螺旋（triple-strandedhelix）：存在于胶原蛋白（甘—脯—21羟脯）中的一种特殊结构，胶原蛋白分子由三条分子量约为120000的肽链组成。每条肽链形成左手螺旋（特点是轻微的螺旋），但内部没有氢键，三条这样的螺旋又形成右手三股螺旋，肽链间借助Gly残基的肽键之间形成氢键交联在一起，是一种超螺旋结构。7、β-突起（β-bulge）：在β-折迭结构中片层出现弯曲，使局部肽链之间不是

8、平行结构。蛋白质的超二级结构（supersecondarystructure）：指相邻二级结构单元按一定规律