人脐带血间充质干细胞技术研究进展2

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1、人脐带血间充质干细胞技术研究进展胡晓玉(盐城师范学院生命科学与技术学院095班学号：09243402邮编;224000)摘要：人脐带中富含间充质干细胞（MSCs）。这些细胞能表达多种间充质干细胞标志物及多种干细胞相关基因，能分化为3个胚层衍生的多种成熟细胞、合成多种营养因子和细胞因子、支持造血干细胞等细胞的增殖和功能，并具有低免疫原性。本文主要对脐带血间充质干细胞的分离培养，生物学特性,分化能力以及应用方向作简要综述。关键词：脐带；间充质干细胞；分化中图分类号：Q81文献标识码：A文章编号：ISSN1006-2947(2011)02-0001-06Resea

2、rchprogressofmesenchymalstemcellsfromhumanumbilicalcordbloodtechnologyHUXiao-YuYanchengteacherscollegeofcollegeoflifesciencesandtechnologyclass095Studentnumber：09243402Zipcode:224000Abstract:Richinhumanumbilicalcordmesenchymalstemcells(MSCs).ThesecellsExpressmultiplemarkersinmesenc

3、hymalstemcellsandmultiplegenesrelatedtostemcells,canbedifferentiatedinto3mesoderm-derivedvarietyofmaturecellsof,synthesisandavarietyofnutritionalfactorssuchascytokines,hematopoieticstemcellproliferationandfunctionofcells,andhavelowimmunogenicity.Thisarticleonumbilicalcordbloodmesen

4、chymalstemcellisolationandcultureof,biologicalcharacteristics,differentiationandapplicationsprovideabriefsummary.Keywords:umbilicalcord;mesenchymalstemcells;differentiation(引言)间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）应具有如下基本特征：⑴贴壁生长；⑵具有特定的表面标志，如不表达CD14、CD34、CD45、HLA-Ⅱ，但表达CD29、CD73和CD105；⑶能

5、进行自我更新，也能在体外分化为骨、软骨和脂肪等多种细胞系。虽然不同研究组对人脐带中分离出的细胞给出基质细胞、基质干细胞和MSCs等多种命名，但通常均具有上述基本特征。人脐带来源的MSCs具有如下优点：⑴获取过程无伦理和道德等约束。⑵含量高、增殖能力强。⑶获取成功率高。⑷其获取过程为非侵袭性操作。⑸细菌和病毒感染风险低。⑹具有多分化潜能而无形成畸胎瘤的风险。⑺低免疫原性。因此，有理由相信人脐带MSCs将在细胞治疗和组织工程等方面具有广泛的应用前景。1MSCs的分离分离方法1）密度梯度离心法：此方法最常用，先是用淋巴细胞分离液从脐血中分离出单个核细胞，再依据MS

6、Cs在体外培养中贴壁生长的特性，用贴壁筛选法，将其从造血系统细胞中分离出来。2）流式细胞仪分离法：根据间充质干细胞大小不同或细胞表面的一些特殊标记CD44、CD29和CD105等，采用流式细胞仪对其进行分选；3)免疫磁珠分离法：原理是使用表面覆有特异性抗体的磁珠与间充质干细胞结合，再用永久磁铁吸引出间充质干细胞；4)羟乙基淀粉沉淀法：此方法是将医用HES与脐带血按一定比例混合，静止沉淀一定时间，取上清液离心后再根据其贴壁选择性，分离出MSCs；5)沉淀法与离心法结合：是将脐带血用HES沉淀后，再重复密度梯度离心法的操作来获取MSCs。除上述方法外，也有学者利

7、用单细胞克隆的方法获得纯MSCs的细胞株，但该方法不便于大量获得MSCs。1MSCs的培养对于MSCs的培养，目前还没有统一的方案。所采用的培养基大致有以下几种：IMDM培养基，LG-DMEM培养基，DMEM+F12培养基以及MesencultTM培养基；所应用的血清浓度也有不同的报道：LeeOK所用浓度为20%；程范军等则将2%与10%血清浓度做对比得出的结论是，采用低浓度血清培养体系，更有利于MSCs的倍增和增值维持；而对于MSCs种植密度的选择也没有统一的认识。但多数实验研究认为，原代培养的脐带血MSCs多在培养24～48h后出现贴壁，1周左右呈梭形，

8、并成克隆性生长，4～5周可达80%以上的融合。起初培