脐带血间充质干细胞的研究进展

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1、万方数据-70·脐带血间充质千细胞的研究进展李云涛石琳熙近年研究结果表明，除了造血千细胞外，脐带血中还存在与骨髓间充质干细胞(鼬姗chyⅢal8temceU，Msc)相似的细胞群，这类细胞在特定诱导条件下可向多种组织细胞分化。由于脐带血具有资源丰富、采集简单且无损伤等优势，如果对脐带血MSC进行开发和应用，将能为组织工程提供新的种子细胞，对于细胞组织工程及其应用具有深远意义。现就目前相关研究做一综述。一、脐带血中存在Msc对于脐带血中是否存在类似骨髓的MSC曾经有过争论，有研究者认为，脐带血中根本没有类似于骨髓Ms

2、c的细胞⋯。其他研究者则认为，从早产儿脐带血能培养出MsC，但足月胎儿脐带血不能得到MSc【2J。但是越来越多的研究者证实。脐带血中存在MSc，其含量在足月胎儿脐带血每106个单个核细胞中有O．05—2．’80个H】，低于骨髓Msc(每106个单个核细胞中有2—5个)。并且脐带血中Msc的频率随妊娠时间的延长而逐渐下降【2】，这种现象可能与发育过程中造血部位向骨髓的迁移有关。二、脐带血MSc的形态和表面标志脐带血MsC在形态上与骨髓MsC类似，为典型成纤维细胞样，呈漩涡状生长。体外扩增15—20代，形态无明显改变。

3、指数生长期倍增时问与培养条件有关，在含lO％胎牛血清时为48—60h，低血清条件(2％胎牛血清)下为60一72h【4】。目前仍然缺乏特异性识别脐带血Msc的标志，尽管sH2(cD。∞)、sm(CD73)、sH4(CD，3)、S豫。一1等曾被认为是MSc的表面标志。但后来发现这些标志并非Msc所特有。大多数学者认为，脐带血Msc具有与骨髓MSC相似的免疫表型，不表达造血细胞标志(CD补CD盯、CDl4、CD2、CD，、CDl5、CDl6、CDl9、cD24、CD孙cD3I、cDl3”血型糖蛋白A)，选择素家族CD繇L

4、、CD配，和内皮标志CD3。阴性，其他分子如CDil7、cDI格、cD舯、CD硒阴性，表达cDl3、CD嚣、CD“、CD帕b、cD49d、c仇l、CD嚣等，人MSC标志CDI价CD7，阳性，HLA—ABC阳性而HLA—DR阴性pJ】。对CD∞表达的报道不一，这可能是由于分离培养方法不同所致。三、脐带血Msc的多向分化能力具有多向分化能力是MsC最重要的生物学特征，脐带血Msc表达转录因子Oc“【6J，这种转录因子出现子类胚胎干细胞的高增殖潜力未分化细胞，提示脐带血Msc可能是作者单位：650031昆明医学院第一附屠

5、医院血液科(李云涛)；昆明医学院微生物免疫教研室(石琳熙)-综述与讲座·非常原始的细胞群。大量的体内外研究结果证明。脐带血MSc同骨髓MSC相似，也具有广泛的分化潜能。但脐带血Msc在分化能力上与骨髓MSC之间存在一定的差别，如脐带血MsC的成骨分化能力强于骨髓Msc，而成脂分化能力弱于后者‘71。．在含有地塞米松、维生索C、B一磷酸甘油的诱导条件下，脐带血MsC可分化为成骨细胞。诱导后细胞出现矿化结节，表达成骨细胞标志基因产物∞teopo越n(hosP)和睁teocalcin(hoc)并且逐渐增加I型胶原的表达p

6、J。虽然K唧等H1认为，脐带血Msc没有类似骨髓MsC的成脂分化能力，但多数研究者的研究结果表明在地塞米松、1一甲基一3一异丁基黄嘌呤、胰岛素、吲哚美辛诱导后，脐带血Msc可分化为脂肪细胞p1。将脐带血Msc在三维培养中以转化生长因子B(TGF—B)诱导时，在细胞外可以观察到软骨特异细胞外基质成分一硫酸蛋白多糖，分化细胞表达软骨细胞标志基因产物Ⅱ型胶原、syndec蚰(1IsDC)以及pedec蚰(1lPmN)。在诱导MSc的软骨分化过程中，TGF—B：和p，具有较B。更强的诱导效应。利用地塞米松、肝细胞生长因子、

7、制瘤素M等可诱导脐带血MsC向肝细胞分化，分化细胞形态由纺锤型变为肝细胞样的立方型，表达多种肝细胞相关的基因产物。诱导l周后超过70％的细胞人白蛋白阳性。诱导6周后，可以观察到分化的肝细胞样细胞摄取低密度脂蛋白的现象，表明诱导后的细胞具有类似肝细胞的表型和功能一J。研究结果证实，脐带血MSc能够分化为神经外胚层细胞。将脐带血Msc分步加入含不同诱导分化剂的培养基中，细胞形态出现类似神经细胞的变化。如具有延伸的神经突样结构的胞体，在细胞密度较高的区域呈现网络样结构等。RT—PCR检测发现，这些细胞表达神经胶质细胞和神

8、经元标志基因。未分化细胞则不表达。同时，细胞还表现出类似神经细胞的某些电生理特征。在增加细胞外钾离子浓度时观察到细胞内钙离子浓度迅速增加，而在相同条件下未分化细胞则没有这种变化，表明分化细胞存在静息膜电位和电压敏感钙通道。应用膜片钳技术检测结果也表明，神经分化诱导后的细胞存在钾通道电流缓慢激活，出现外倒转，与神经元的电生理相似，但是未观察到典型神经元的钠通道