不同胎龄人脐带血间充质干细胞的研究

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1、中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：主兰兰日期：Ⅵ

2、o。s以中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离

3、校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：日期：塑!!!!二堑目录一、摘要中文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．4二、英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．8三、论文一1，．一j一日U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·9材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．10实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．18结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。19本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20四、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21五、附录综j苤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．23致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．30个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31·中文论著摘要·不同胎龄人脐带血间充质干细胞的研究目的间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)是来源于发育早期的中胚层和外胚层，具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入和自我复制等特点的一类细胞，在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为骨、软骨、肌肉、脂肪、内皮等多种表型组织细胞，传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。MSC

6、s多取材于骨髓，属侵袭性取材，制约其应用于临床Ⅲ。脐带lln(umbilicalcordblood，UCB)是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液，含有丰富的干细胞，临床常采集脐带血中造血干细胞用于治疗血液类疾病。最近几年来有研究表明，脐带血中也存在MSCs[21。由于脐带血来源丰富，采集方便，排斥小，无伦理争议等优点，脐血来源MSCs作为移植用细胞越来越受到重视。脐带血MSCs缺少特异性表面标志物，此类细胞表达CD29、CD44、CD73、CD90和HLA．ABC，CDl05和CDl06，不表达CDl4、CD34、CD45、CDl33和HLA．DRt31，并可分化为成骨、软骨

7、、成脂和成肌样细胞【4_5】。有学者应用流式细胞学单管多色染色技术分析脐带血内MSCs的数量【6l，每百万个有核细胞当中含有8．8士4．3个MSCs细胞，而骨髓样本当中每百万个有核细胞当中含有13．2士5．8个MSC细胞。分析了脐血MSCs表面抗原表达情况，建立了应用流式细胞学单管多色染色分析脐带血内MSCs数量的方法。有报道【7】说脐带血中MSCs数量变化较大．脐带血中MSCs的数量能有多少，随着胎儿成熟，其数量是否发生变化，MSCs体外培养其生长速度如何，培养的成功率如何，脐带血中MSCs在胎儿发育中是扮演了什么样的角色，发挥了怎样的作用都是值得探讨的问题。本实验应用单管多色荧光染色技术

8、分析了不同胎龄脐带血中CD44、CDl05阳性而CD34、CD45阴性细胞的数量，以比较不同胎龄脐带血中MSCs数量的差别，并分析脐带血成功培养出MSCs的影响因素，比较不同胎龄脐带血获得的MSCs的生长特性，为进一步探讨脐带血MSCs生物学特性打下基础。方法l、单管多色染色行流式细胞学分析脐带血中MSCs的数量(1)无菌条件下取正常脐带血52份，胎龄从28周～42周，产妇及胎儿无血液系统疾病及其他影响造血功