临床标本的细菌学检查

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1、临床标本的细菌学检查第一节血液及骨髓标本一血液标本血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法。如从患者血液中检出细菌，一般应视为病原菌。常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、链球菌（A、B群、肺炎链球菌等）、肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等。（一）标本采集1.采血时间及次数2.抽血部位及抽血量(二)检验方法和操作流程1.操作过程血液及骨髓标本细菌学检验方法和操作流程3.报告方式培养7d无菌生长者报告“培养7d无菌生长”。查见细菌报告菌名和药敏结果。4.菌血症、败血症的诊断标准1）两次培养均出现同一种细菌（

2、可排除污染）；2）发病星期后血中抗体滴度上升。2.培养瓶中有细菌生长时的不同表现。第二节脑脊液标本脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值。正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌（A、B群和肺炎链球菌）、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。（一）标本的采集脑脊液无论涂片或培养必须于采集后立即送检不宜将其置于冰箱保存，否则影响检出率。脑脊液标本细菌学检验方法和操作流程图（二）检验方法和操作流程1.涂片检查(1)一般细菌涂片检查：例如：革兰阴性、

3、凹面相对的球菌，可能是脑膜炎奈瑟菌；链状排列的革兰阳性球菌；长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌，可能是流感嗜血杆菌。(2)结核分枝杆菌涂片检查(3)新生隐球菌涂片检查2.分离培养3.报告方式培养48小时，仍无菌生长者报告“培养2天无细菌生长”。查见细菌报告细菌，报告菌名和药敏结果。第三节呼吸系统标本下呼吸道的痰液是无细菌的，而经口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌（如草绿色链球菌）。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病菌，提示有上呼吸道感染。常见的病原菌主要有肺炎链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟

4、菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌。一痰标本（一）标本采集1.痰标本的采集时间2.标本采集方法(1)自然咳痰法(2)气管镜下采集法(3)气管穿刺法(4)结核分枝杆菌标本收集法：收集24H痰液以提高阳性检出率。呼吸系统标本细菌学检验方法和操作流程（二）检验方法和操作流程1.肉眼观察2.涂片检查其一依据100×镜下观察白细胞和上皮细胞数目多少来评定(如表)；其二是初步判定是否有病原存在。分级白细胞（个）上皮细胞（个）A>25<10B>25<25C<10>25痰标本镜下分类注：A、B两种情况的痰标本适合做培养，C不合适，应重新留标本（1）一般细菌涂片（2）结

5、核分枝杆菌涂片（3）放线菌及诺卡菌涂片3.培养（1）培养标本的选择：应选择粘液痰作涂片。（2）痰标本培养前处理：用无菌盐水将痰洗涤3次，加入等量的1%胰酶溶液（PH7.6)，37ºC水浴90min，使痰液均质化后备用。（3）分离培养4.报告方式痰标本培养48小时后仅有草绿色链球菌生长而无致病菌生长，报告“正常菌群”。查出的致病菌，报告菌名和药敏结果，同时报告细菌的量化指标。分级划线区菌落数目第1区第2区第3区少见（+）<10少量（++）>10<5中等（+++）>10>5<5多量（++++）>10>5>5表5-3痰标本在平板上的菌落量化指标二咽拭标本正

6、常咽试有多种上呼吸道的正常菌群（如草绿色链球菌）。若从患者标本中查出致病菌提示上呼吸道有细菌感染（如急、慢性扁桃体炎，咽炎，喉炎等）常见的病原菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、微球菌和棒状杆菌等）。（一）标本采集（二）检验方法和操作流程1.涂片检查（先培养后涂片）2.分离培养3.报告方式同痰标本检查。第四节穿刺液标本穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等）。正常穿刺液是无菌的，若从患者穿刺液中查见致病菌或条件致病菌提示该部位有细菌感染。胸腔感染的病原菌以结核分枝杆菌多见：腹腔感染的病原菌以肠道细菌如大肠挨希菌、粪肠球菌，以及

7、结核分枝杆菌多见：心包炎和关节腔液以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌多见。（一）标本采集（二）检验方法和操作流程1.涂片检查（先接种后涂片）2.分离培养（1）普通细菌培养：（2）厌氧菌培养（3）结核菌培养3.报告方式培养48h无细菌生长，报告“培养2天无细菌生长”。查见细菌，报告菌名和药敏结果。穿刺液标本细菌学检验方法和操作流程第五节泌尿、生殖道标本一尿液标本中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要价值。细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。有致病菌或条件致病菌生长，菌落计数>105/ml，提示感染（膀胱炎，肾盂肾炎、肾或

8、膀胱结核等）。常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等。（一）标本采集1.中段尿