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时间:2017-11-23
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1、常见临床标本的细菌学检验一、常见临床标本1、血液2、尿液3、粪便、肛拭子4、脓汁及脓拭子5、穿刺液(胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、鞘膜液)6、痰7、胆汁8、咽拭子9、空气二、标本采集的一般原则1、应在病程的一定阶段(一般为发病早期)尽可能在施实抗生素疗法、化学方法、血清学疗法之前采集标本。2、方法要恰当,标本应来自真正的感染部位,避免其它微生物特别是正常微生物的污染。3、所有采集的标本均应置于无菌容器中(灭菌不能使用消毒剂)加入适当保存液。4、标本应尽快接种(最好是床边接种),若必须传送时,应根据培养目的作保温、冷藏、厌氧运送。防止污染及扩散。5、检样不宜过少,否则
2、易干燥死亡。三、常见标本的采集(一般由临床医师执行)(一)血液:1、一般在发热高峰期采集(发热初期1-2天,此时阳性率较高)尽量在实施血清疗法、化学疗法和抗生素疗法之前进行。2、采血部位:一般为静脉(动脉阳性率更高些)。3、采血量:5-1ml,直接加入酚红葡萄糖肉汤中(血/肉汤=1:10)(防止血凝、稀释Ab等因子)如不能直接接种应置入已灭菌适量20%枸橼酸盐瓶中。尽快送检。4、如病人已实施治疗,应在酚红葡萄糖肉汤中加入相应对抗剂。磺胺类药物→对氨基苯甲酸5mg/100ml.青霉素→2u青霉素酶/ml其他抗生素→MgSO45mg/100ml(二)粪便:1、应尽量在用药前自
3、然排便;取有胧血、粘液部分2-3g(新鲜)液壮便应取絮壮物1-2ml于无菌广口瓶中。2、如无法获取粪便,应用直肠拭子,小儿入肛门2-3cm。成人入肛门4-5cm.取直肠粘液入无菌试管/保存液。3、如需保送运送测量PH7.0甘油PSB中(0.033mol/LPSB与等体积甘油混匀。PH7.0)(三)、脓汁1、创伤:先以无菌N·S清洗创口周围,再以棉签来取脓汁/分泌物→脓拭子置无菌试管。2、脓肿:先消毒患部表面皮肤,再以注射器抽吸/切开脓时接留脓汁1-2ml置无菌试管。3、厌氧菌:一定要由伤口深处取样,半小时内接种完毕。(四)咽拭子:1、由咽部扁桃体处采集分泌物(注意部位、方
4、式)2、如凝为白喉患者,则应先除去咽不表层分泌物去深层组织分泌物,再取样。3、凝为百日咳患者,可采用咳碟法。(五)痰:1、先让病人用清水嗉口数次,以除去口腔内大量杂菌。2、取清晨第一口咳出的痰,(晨痰)3、作结核杆菌培养可收集24h痰。(冰箱保存)(六)胆汁:1、行十二指肠引流水收集“胆汁乙”10-15ml。胆汁甲—胆总管()胆汁乙—胆素(柠黄色)胆汁丙—肝胆管(金黄色)胆汁丁—十二指肠()(七)穿刺液:1:原则上由临床医生先穿刺获得。2:采样量:胸水,腹水:5-10ml3:如需抗凝:3.8%枸橼酸钠。1:10(八)尿液:1、一般用导尿.5-10ml,也可用中段尿.(应消
5、注明),留中段尿应冲洗尿道口/外阴部(1:1000高锰酸钾,2%红汞.1:1000新洁尔灭,先消毒液冲洗,再无菌纱布或干棉球拭干)。2、作结核杆菌培养,留取24h尿,将沉淀部分送检。3、肾盂尿,应标明右、左,每侧分3份留联(导尿管插入输尿管。)4、通常宜取清晨第一次尿。5、采集后应立即送检,接种,一般不得超过1h,冰箱保存,不过6h。四、常见临床标本鉴定程序染色镜检变浊、色、质→BA→菌落→染色镜检1血液→酚红葡萄糖肉汤有菌落无改变→BA报告:无菌生长无菌落无菌落BA有菌落→染色镜检变浊、色、质→BA→菌落→染色镜检2穿刺液→血肉汤→有菌落无改变→BA→报告:无菌生长无菌
6、落染色3,拭子(咽、脓)BA菌落分类、编号、染色镜检染色镜检注:接种血平板时,拭子作原划线、接种环划开4、痰BA菌落分类、编号、染色TB培养罗氏斜面(先消化处理)4%NaOH6%H2SO45、尿液BA(直径=9.0cm,接种量0.01ml)注:将标本充分划开集菌(3000n/min15`)沉渣革兰氏染色BA无菌落报告:无菌生长有菌落染色镜检菌落计数报告:检出***菌**个/ml<1万/ml(或2种以上菌)污染,1-10万/ml可疑>10万/ml感染6、粪便(含肛拭子)SS、MaC(强弱各1个)无可疑菌落报告:无致病菌生长可疑菌落(透明/半、无酸色)增菌(一般不进行)T.T
7、增菌液(四硫磺酸盐肉汤)M.M增菌液(MgCL2孔雀绿肉汤)S.F增菌液(亚硫酸盐肉汤)沙门氏菌煌绿增菌液亚硒酸盐增液沙—志G.N志贺氏菌碱性蛋白胨水霍乱弧菌革兰氏染色球菌G+杆菌:根据菌落特征,细菌染色性,形态排列选择恰当生化反应,免疫学反应及动物试验报告G-杆菌KIA菌落描述:颜色,大小,溶血性,透明度,硬度,润湿度,表面光滑度,粘稠度,凸起度,边缘整齐度根据KIA结果选择适当生化反应项目+/+IMViC七叶++———-/+IMANSUCCUPA____I项“+”非沙门氏菌——+++I项“+”非志贺氏菌+变+普-/-→I葡
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