临床分离鸡毒支原体粘附素蛋白编码基因pvpA的分子特征

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时间:2019-07-13

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1、8期陈继荣等:临床分离鸡毒支原体粘附素蛋白编码基因pvpA的分子特征7临床分离鸡毒支原体粘附素蛋白编码基因pvpA的分子特征陈继荣,曾振灵,邓碧琴,阎化领,李旭宁,蒋红霞(华南农业大学兽医学院/广东省兽药研制与安全评价重点实验室,广州510642)摘要:【目的】探讨中国临床分离鸡毒支原体粘附素蛋白(PvpA)编码基因pvpA的分子特征,为进一步了解鸡毒支原体致病机制、建立新的鉴别诊断方法奠定基础。【方法】利用巢式PCR法对41株广东、四川和北京地区临床分离的鸡毒支原体和3株参考株的pvpA基因进行扩增并测序,分析中国临床分离株pvpA的基因变异特征。【结果】所有临床分离株pvpA基因分子

2、特征与强毒株S6,BG44T一致,与疫苗株F36完全不同。临床分离株pvpA基因C-末端DR-1、DR-2区域(第670位~第1056位)GC的含量为53.52%,明显高于鸡毒支原体的平均GC含量;所有临床分离株及S6、BG44T在DR-1和DR-2之间丢失60个碱基。推测该区域编码的氨基酸序列富含脯氨酸,高达30.27%;重复四肽Pro-Arg-Pro-X共出现10次,X为甲硫氨酸6次、甘氨酸1次、天冬酰胺1次、谷氨酰胺2次。而疫苗株F36PvpA只有DR-1区域,与R株相比间隔25肽缺失了24个肽,DR-2区域全部丢失。【结论】临床分离株pvpA基因变异特征与强毒株S6一致,与疫苗株

3、F36的变异特征有显著差异,可以把pvpA基因作为靶标以建立临床鸡毒支原体流行病调查和诊断的新方法。关键词:鸡毒支原体;pvpA基因;粘附蛋白;变异MolecularCharacterizationofAdhesin-EncodingGenepvpAAmongIsolatedMycoplasmagallisepticumfromGuangdong,SichuanandBeijingCHENJi-rong,ZENGZhen-ling,DENGBi-qin,YANHua-ling,LIXu-ning,JIANGHong-xia(CollegeofVeterinaryMedicine,Guan

4、gdongKeyLaboratoryforVeterinaryDrugDevelopmentandSafetyEvaluation,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642)Abstract:【Objective】ThemolecularcharacterizationoftheMycoplasmagallisepticumpvpAgenewhichencodesaputativecytadhesinproteinwasinvestigated,whichwouldbehelpfulfordevelopinganewdetectio

5、nanddiagnosismethodsbyusingthevariablepvpAgeneasthetargetaswellasbetterunderstandingthepathogenicmechanismofM.gallisepticum.【Method】ThepvpAgenesofboth41isolatedM.gallisepticumfromGuangdong,SichanandBeijingand3referencesM.gallisepticum(S6,BG44T,andF36)wereobtainedbynest-PCR,andsequenced.【Result】It

6、showedthatthepvpAgenesof41M.gallisepticumisolatessharedtheidenticalvariationwithS6,BG44T,andshowedsignificantdifferenceswithliveM.gallisepticumvaccine,F36.TheG+CcontentbetweenDR-1andDR-2ofpvpAgeneC-ternimalofallisolateswas53.52%,apparentlyhigherthantheaverageG+CcontentfortheM.gallisepticumgenome.

7、60basesweredeletedwithinDR-1andDR-2among41isolatesaswellasS6,BG44T.Besides,PvpAmoleculeinthisregionpossessesaproline-richcarboxytidemotif(Pro-Arg-Pro-X)whichrepeated10times,XisMet,Gly,Asn,Glufor6,1,1,2times,respectivel

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