论文--补肾方对激素性股骨头坏死大鼠的骨修复作用

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1、补肾方对激素性股骨头坏死大鼠的骨修复作用[摘要]目的:观察补肾方对激素性股骨头坏死(SONFH)大鼠股骨头骨修复的作用。方法:采用单纯性糖皮质激素股骨头坏死模型大鼠,分别给予5.3、10.6和21.2g·kg-1的补肾方和1.68g·kg-1健骨生丸治疗,6周后取血和股骨头,HE染色观察股骨头组织病理学改变,Micro-CT扫描观察股骨头骨形态变化并进行骨计量学分析,股骨头血管造影Micro-CT扫描观察股骨头微循环(血管)变化并进行血管参数分析,旋转法进行血液流变学检测,酶速率法检测血清中血脂含量,ELISA检测血清骨形成标志物骨钙素(BGP)和降钙素(CT)含量

2、。结果:10.6和21.2g·kg-1剂量的补肾方明显降低SONFH大鼠股骨头骨小梁狭窄或断裂、骨髓腔坏死、脂肪细胞增多变大等组织病理学和股骨头塌陷、骨质减少、骨小梁稀疏等影像学改变程度,升高BV/TV、Tb.Th、Tb.Pf、Tb.N、BMD并降低Tb.Sp,增加股骨头内血管数量和面积,降低全血粘度低切、中切值及血浆粘度和血清TG、TC、LDL和ApoA1含量的同时,升高血清HDL、ApoA1、BGP和CT含量,其中10.6g·kg-1剂量组的作用与健骨生丸相当。结论:补肾方能明显降低SONFH大鼠股骨头组织病理学和影像学改变程度,改善微循环(血管)、血液流变学和

3、血脂异常变化,增加血清中BGP及CT含量;这一促进骨修复的作用可能是其防治激素引起的股骨头骨坏死的机制之一。[关键词]激素性股骨头坏死;补肾方;骨组织形态;骨计量;骨钙素;降钙素激素性股骨头坏死(SONFH)是指因大剂量或长期使用激素而引起股骨头骨组织死亡的病理过程,其中骨坏死和骨修复与重建相伴发生[1]。中医将股骨头坏死归属于“骨痹”、“骨蚀”、“骨痿”范畴,认为激素性股骨头坏死是药毒损肾蚀骨的结果,患者多表现肾虚[2],常采用补肾生髓、舒筋活络等方法进行治疗,取得一定疗效。补肾方具有补肾壮骨、活血通络功效,是笔者治疗股骨头坏死的系列临床经验方之一[3]。为了进一

4、步了解其作用机制,本研究拟采用大鼠臀肌注射大剂量激素以造成实验性SONFH模型,观察补肾方对股骨头坏死骨修复的影响,为临床的合理应用提供实验参考。1.方法7雄性Wistar大鼠随机分正常组(control)、模型组(model)、补肾方高、中、低剂量组(BS5.3、10.6和21.2g·kg-1)和阳性对照药健骨生丸组(JGS1.68g·kg-1)。除正常组外其余各组臀肌注射21mg·kg-1甲泼尼龙琥珀酸钠,一天一次,连续3天,建立单纯性糖皮质激素股骨头坏死模型。各给药组从第4d开始,分别给予5.3、10.6和21.2g·kg-1的补肾方和1.68g·kg-1健骨

5、生丸,给药6周后取血和股骨头,HE染色观察股骨头组织的病理学改变,Micro-CT扫描观察股骨头骨形态变化并进行骨计量学分析,股骨头血管造影Micro-CT扫描观察股骨头微循环(血管)变化并进行血管参数分析,旋转法检测全血低切、中切、高切值以及血浆粘度检测,酶速率法检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)的含量,ELISA检测血清骨形成标志物骨钙素(BGP)和降钙素(CT)含量。2结果2.1对股骨头组织病理改变的影响组织病理形态学结果观察如图1显示,模型

6、组股骨头部分软骨细胞排列不整齐,骨小梁变窄或断裂,骨细胞内可见大量空骨陷窝和核固缩,脂肪细胞明显增多变大;补肾方高剂量组股骨头软骨细胞规则尚整齐,骨小梁宽度较正常,未见明显断裂,骨细胞内有少量空骨陷窝,脂肪细胞面积和直径均明显低于模型组;健骨生丸组股骨头软骨细胞规则尚整齐,骨小梁宽度较正常,骨细胞内有少量空骨陷窝,脂肪细胞面积和直径均明显低于模型组。组织病理形态学半定量分析结果如表1所示,模型组空骨陷窝率、脂肪细胞面积和直径较正常组均显著升高;经高、中剂量补肾方治疗后骨陷窝率、脂肪细胞面积和直径均显著降低;补肾方低剂量也能明显降低脂肪细胞面积;健骨生丸组也显著降低骨

7、陷窝率、脂肪细胞面积和直径均显著降低,其作用与补肾方中剂量组相当。7ABCD图1补肾方对SONFH大鼠股骨头组织病理改变的影响(HE,×200)注:A.Control;B.Model;C.BS21.2g/kg;D.JGS1.68g/kg表1补肾方对SONFH大鼠股骨头组织病理形态学半定量分析结果的影响(`x±s,n=10)组别剂量/(g·kg-1)空骨陷窝率/%脂肪细胞面积/um2脂肪细胞直径/umControlModelBSJGS--5.310.621.21.6816.7±4.742.3±3.2###29.1±9.522.3±9.3*18.1±7.6**21.

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