微生物的培养与利用综合复习

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1、微生物的培养与利用高考专题复习北京高考考试说明中的要求类型具体内容微生物的培养与利用微生物的培养与分离某种微生物数量的测定培养基对微生物的选择作用利用微生物进行发酵来生产特定的产物发酵过程中亚硝酸盐含量的测定微生物种类及其代谢微生物的范畴：结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，如酵母菌、细菌、放线菌、霉菌、蓝细菌和病毒等。微生物种类及其代谢这些微生物的同化作用和异化作用类型分别是什么？同化作用：生物体从外界获取营养物质，转化为自身组成物质的过程。异化作用：生物体自身物质分解，放出能量，排出废物的过程。

2、微生物种类及其代谢同化作用类型：自养型：直接利用环境中的无机物合成自身所需要的有机物。如进行光合作用的绿色植物、蓝细菌。硝化细菌——化能合成作用：利用化学反应释放的化学能，将无机物合成自身的有机物。异养型：直接利用环境中的有机物合成自身所需要的有机物。如各种动物、大多数细菌等。微生物种类及其代谢异化作用类型：有氧呼吸型（需氧型）C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量无氧呼吸型（厌氧型）C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量C6H12O6→2C3H6O3+能量微生物种类及其代谢微生物包括哪些类型

3、？构成微生物的细胞类型有哪些？不同微生物代谢类型有哪些？同化作用+异化作用=代谢类型微生物种类及其代谢微生物的类型细胞类型代谢类型举例细菌单细胞、原核细胞自养需氧型异养需氧型异养厌氧型蓝细菌、硝化细菌醋酸杆菌、大肠杆菌乳酸菌、大肠杆菌微生物种类及其代谢微生物的类型细胞类型代谢类型举例真菌单细胞、真核细胞多细胞、真核细胞异养、兼性厌氧异养需氧型酵母菌霉菌（青霉、曲霉）微生物种类及其代谢微生物的类型细胞类型代谢类型举例病毒无细胞结构，在细胞内寄生流感病毒、HIV、噬菌体、植物病毒等微生物的代谢类型是配制培养基及培养的基础微生物

4、的培养培养基按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。基本营养成分——水、碳源（有机碳、无机碳）、氮源（有机氮、无机氮）、无机盐（调节渗透压）配制要求——调整pH，添加特殊营养物质（维生素）等微生物的培养碳源有机碳源：牛肉膏、酵母提取物无机碳源：氮源有机氮源：蛋白胨、尿素等无机氮源：NH3、N2等微生物的培养培养基分类按照物理性质分类：固体培养基——常用的凝固剂为琼脂液体培养基按照用途分类：普通培养基：选择培养基：加入或缺少某种物质鉴别培养基：加入特殊物质，鉴定某种微生物存在与否微生物的培养基本操作技术

5、——无菌条件灭菌与消毒，避免杂菌的污染消毒的方法：高温（煮沸），酒精、氯气等化学药剂，紫外线照射灭菌的方法：灼烧、干热、高压蒸汽灭菌微生物的培养倒平板（无菌条件下进行）固体培养基灭菌、融化、倒入培养皿、冷却凝固待用接种后，盖盖、倒置、培养（防止冷凝水影响单个菌落的形成）微生物的培养接种的方法（无菌条件下进行）平板划线法（培养分离出单个菌落，操作相对比较简便）平板涂布法（按梯度稀释培养液、培养分离出单个菌落，操作有些复杂）微生物的培养微生物计数方法活菌计数——样品稀释度足够高时，培养基表面只生长1个菌落（来源于样品稀释液中的

6、1个活菌）。根据平板上菌落数，推测样品中大约含有多少活菌。结果一般用菌落数而不是活菌数表示。显微观察计数——红细胞计数板，观察数量，再根据浓度比例计算出菌体数量。微生物的培养血球（血细胞）计数板计数室（中央大方格）的长、宽和高分别为：1mm、1mm和0.1mm计数室的容积：0.1mm3（万分之一毫升）取样：稀释一定倍数的菌液微生物的培养血细胞计数板的取样与计数方法（一）20格×20格酵母细胞数/ml＝80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数计数顺序：左上→右上→右下→左下压在格线的，只统计左线和上线微生物的培

7、养（二）16格×25格酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数大肠杆菌的培养和分离分别分装配制好的LB液体、固体培养基实验流程灭菌（培养基、实验所用器具等，培养皿、试管用牛皮纸或报纸包好，放入灭菌锅）如使用高压锅，需在有压力后灭菌15min。大肠杆菌的培养和分离1000g/cm2压力下，121℃灭菌15min。大肠杆菌的培养和分离消毒：待高压锅或灭菌锅中的压力与大气压相同时打开锅盖，将已灭菌的物品放至超净工作台上，并打开紫外灯和过滤风的开关。注意：打开紫外灯后，人必须离开，以免身体受到伤

8、害。大肠杆菌的培养和分离将大肠杆菌接种在LB液体培养基中,然后将三角瓶放在恒温摇床培养箱中振荡培养12h，温度控制在37℃左右。进行扩大培养，增加大肠杆菌的数量。为什么要振荡培养？大肠杆菌的培养和分离倒平板：待三角瓶中的LB固体培养基冷到60℃时，关闭紫外灯，点燃酒精灯，用镊子从广口瓶中夹出酒精棉球擦试