微生物的培养与利用

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1、微生物的培养与利用微生物的培养与分离某种微生物数量的测定培养基对微生物的选择作用利用微生物进行发酵来生产特定的产物发酵过程中亚硝酸盐含量的测定微生物原核生物界原生生物界真菌界病毒界一、微生物的类群(细菌、放线菌、蓝藻)(酵母菌、霉菌、大型真菌)(草履虫、变形虫、衣藻)(噬菌体、艾滋病毒)特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.类群结构特点遗传物质繁殖方式举例病毒原核生物界真菌界原生生物界无细胞结构原核(细胞壁、膜、质)真核(细胞壁、膜、质、核)真核(细胞膜、质、核

2、)噬菌体烟草花叶病毒流感病毒细菌(形状菌)放线菌霉菌、蘑菇、酵母菌衣藻、草履虫、变形虫DNA或RNADNADNADNA增殖：吸附→注入→合成→装配→释放分裂生殖(二分裂)孢子生殖出芽生殖分裂生殖有性生殖拟核，大型环状DNA质粒(含抗生素抗药性，固氮基因)其成分为肽聚糖芽孢细菌的休眠体，对恶劣的环境有抵抗力细菌的营养异养型自养型蓝藻硝化细菌等寄生腐生菌落可作为菌种鉴定的重要依据细菌的代谢自养硝化细菌、铁细菌、硫细菌等。异养大肠杆菌、乳酸菌、枯草杆菌等。枯草杆菌、硝化细菌、铁细菌、根瘤菌等。破伤风杆菌、乳酸菌等。需氧型：厌氧型：

3、二、培养基：培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。１、概念：２、营养成份：营养成份：水、碳源、氮源、无机盐其它：ＰＨ、特殊营养物质、氧气（Ｐ15）3、培养基的类型和用途（1）按物理状态来分：固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。（4）选择培养基的常见用途加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基分离固氮微生物不

4、加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基分离导入了目的基因的受体细胞1、伊红美蓝培养基为常用鉴别培养基2、刚果红与纤维素等多糖类物质反应形成红色复合物，添加刚果红的培养基呈红色，接种的微生物若能够分解纤维素，就会在其菌落的周围形成透明圈（5）鉴别培养基4、培养基配制的操作步骤：三、无菌技术操作无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。定义常用方法微生物培养和组培的应用消毒使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分菌体,但不伤及活组织煮沸玻璃仪器紫外线实验室、操作台、衣物等酒

5、精溶液手、外植体等次氯酸钠溶液等外植体灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有菌体、芽孢和孢子高压蒸汽培养基、玻璃仪器、棉塞、牛皮纸等灼烧接种环、涂布器等干热玻璃仪器四、微生物的纯化培养：自然环境中，微生物混在一起生长，要想纯化培养，首先要将单个细胞与其他细胞分离开，进而培养成可见的群体。包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段，纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。（一）.微生物实验室培养的基本操作程序1、器具的灭菌2、培养基的配制3、培养基的灭菌4、倒平板5、微生物接种6、恒温箱中培养7、菌种的保存1、制备牛

6、肉膏蛋白胨固体培养基计算称量溶化灭菌倒平板（1）、溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中，减少误差。（2）、加琼脂的目的是什么?作为凝固剂（二）、纯化大肠杆菌计算称量溶化灭菌倒平板3、在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞，在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。4、培养皿能否用高压蒸汽灭菌？不能，因为培养皿要保持干燥，应该用干热灭菌。（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基5、倒平板（二）纯化大肠杆菌（一）制备牛肉膏蛋

7、白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌（二）纯化大肠杆菌1、接种最常用方法有：（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌（二）纯化大肠杆菌1、接种最常用方法有：平板划线法和稀释涂布平板法（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌（二）纯化大肠杆菌1、接种最常用方法有：平板划线法和稀释涂布平板法2、平板划线法（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌划线接种的基本步骤和说明:序列操作步骤分析说明1将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红将接种环灭菌，避免污染菌种2在火焰旁冷却接种环，拔除盛有菌液的试管棉塞避免杂菌污染菌

8、种3将试管口通过火焰灼烧灭菌，防止试管口菌体污染培养基4将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取菌液冷却接种环可避免杀死菌种5将试管口通过火焰，并塞上棉塞避免试管口杂菌污染菌种6左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基初步接种。划