微生物的培养与利用全面版ppt课件.ppt

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时间:2020-09-22

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1、一、微生物的实验室培养1.培养基2.无菌技术3.实验操作二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数三、分解纤维素的微生物的分离微生物的应用1.微生物的代谢类型(1)根据能否将CO2合成有机物可分为自养型生物与异养型生物。①自养型生物:能利用CO2等简单的无机物合成贮存能量的有机物的生物。②异养型生物:不能利用CO2等简单无机物合成有机物,只有以其他生物制造的有机物为食的生物。(2)根据同化过程中能量来源不同,可分为光能自养型、化能自养型、化能异养型。它们的比较见下表:2.微生物的营养物质及功能[知识拓展](1)微生物最

2、常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(2)对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机物既是碳源,又是氮源、能源。(3)有些培养基不需要添加特殊营养物质,生物自己能合成,如大肠杆菌能合成某些维生素,作为特殊营养物质。(4)病毒是一类完全寄生的生物,它不能在一般的培养基中生长繁殖,必须在活体培养基中才能表现出生命活性。3.培养基的种类及用途[知识拓展]培养基的配制原则(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。(3

3、)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同,如细菌为6.5~7.5,放线菌为7.5~8.5,真菌为5.0~6.0,培养不同微生物所需pH不同。4.无菌技术(1)消毒和灭菌的区别[知识拓展]酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好,原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。1.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是()①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.

4、⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤解析:培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。答案:A2.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题:(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是__

5、______和________。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是________。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于________中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越________。解析:本题主要考查了微生物的培养与分离知识。培养基中含有蛋白胨

6、主要提供氮源,淀粉主要提供碳源;还需要水及无机盐等;培养基进行高压蒸汽灭菌后,还要检验灭菌效果;用选择培养基可以将耐盐细菌分离出来。答案:(1)氮源(碳源不作要求)碳源 无机盐 水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱 无菌水(4)多 大(5)盐(或NaCl)选择培养基(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐____细菌,这种培养基被称为________。细菌的分离与计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)分离的原理①土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们体内能合成脲酶。这种物质在把尿素分解成无

7、机物的过程中起催化作用。②实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。(2)统计菌落数目的方法①显微镜直接计数法a.原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。b.方法:用计数板计数。c.缺点:不能区分死菌与活菌。②间接计数法(活菌计数法)a.原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。b.操作i.设置重

8、复组,增强实验的说服力与准确性。ii.为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。c.计算公式:每克样品中的菌株数=×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。(3)细菌分离与计数的实验流程土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数(3)土壤中纤维素分解菌的筛选①

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