弯曲菌属与螺杆菌属

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1、第十六章弯曲菌属与螺杆菌属第一节弯曲菌属是一类呈逗点状或s形的G-菌，广泛分布于动物界，其中有些可引起动物与人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾病。对人致病有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等，其中空肠弯曲菌是腹泻的常见病原菌。该菌借助于鞭毛和外膜蛋白与空肠上皮细胞结合，侵入生长繁殖，产生肠毒素、细胞毒素和内毒素等物质，引起肠炎和肠道外感染。腹泻是空肠弯曲菌感染最常见的临床表现，转为粘液脓血样便，甚至血便。有发热腹痛、恶心不适等症状。可在1周内消退，20％患者症状可持续1-3周。微生物特性1.形态结构G-菌体弯曲呈逗点。无芽孢有鞭毛。运

2、动活泼，呈投镖样为其特征。2.基因组及抗原成分基因组大小仅为大肠杆菌的35％；DNA的G+C为30-38mol％。按O抗原不同分为65个血清型。3.培养特征为微需氧菌，最佳气体环境通常为含5％氧气、10％二氧化碳及85％氮气。4.抵抗力不强，在室温下可迅速死亡。对热敏感，标本在4℃冰箱可保存3周。微生物检验1.粪便直接镜检，G-呈弧形、呈投镖式运动。2.核酸检测粪便弯曲菌flaA基因，体外扩增空肠／大肠弯曲菌为1．3kb。3.分离培养粪便等标本可接种选择平板进行分离，置微氧环境培养。空肠／大肠弯曲生长温度为43℃，培养24h可观察为灰白湿

3、润、扁平边缘不整的蔓延生长的菌落。鉴定要点1.为氧化酶阳性，G-菌体弯曲或呈S型。2.萘啶酸、头孢噻吩敏感试验：空肠弯曲菌对萘啶酸敏感、噻吩耐药；胎儿弯曲菌对萘啶酸耐药、对头孢噻吩敏感。3.马尿酸盐试验：有助于鉴定空肠弯曲菌空肠亚种，凡试验阳性、在42℃条件下生长，氧化酶阳性且与镜检形态相符者，即可报告为空肠弯曲菌空肠亚种。4.醋酸吲哚水解试验：空肠弯曲菌为阳性，胎儿弯曲菌为阴性。5.用抗体包被的乳胶颗粒，遇到相应的弯曲菌时便可出现反应。可用于鉴定空肠／大肠弯曲菌，具有高度敏感性和特异性。6.DNA探针：DNA-DNA杂交可以用于鉴别大肠

4、弯曲菌与马尿酸水解阴性的空肠弯曲菌、区别空肠弯曲菌和其他的弯曲菌。第二节螺杆菌属幽门螺杆菌与萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡和胃癌等疾病相关。HP感染非常普遍，平均世界人口的50％被感染。三、微生物特性1.G-,细长弯曲呈螺形。一端或两端有多根带鞘鞭毛，运动活泼有动力。鞭毛在定居中起锚住作用。2.基因组较小，约1．67×106bp，DNAG+C百分含量为37mol％，较重要的基因有脲酶基因urea、ureB、ureC，细胞毒素相关基因cagA，空泡毒素基因vacA。脲酶基因定位在DNA的4．2kb区段内。3.HP菌株间具有共同抗原。与空肠弯曲

5、菌菌体外膜蛋白无交叉免疫反应，但其鞭毛蛋白具有明显的交叉反应。3.培养特性1.HP为微需氧菌，在5％O2、10％C02、85％N2的中生长良好。最适温度为37℃,25℃不生长，42℃少数生长，此与弯曲菌属不同。2.HP对湿度(85%以上)要求较高，营养要求较高需含血液才能生长，常用血琼脂培养基,需经72h才长出菌落，故在培养基中添加多粘菌素B(250U/L)、万古霉素(6mg／L)、两性霉素(2mg／L)、TMP(5mg／L)等以抑制杂菌生长。3.HP的菌落形态为圆形孤立的小菌落，无色半透明呈露滴状。4.理化性状HP生化反应不活跃，不能利

6、用糖类。HP具有大量高活力的胞外脲酶，故脲酶活性的测定可作为HP的快速诊断方法。还能产生氧化酶、触酶、碱性磷酸酶、α-谷氨酰转肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶等。四、微生物检验1.分离培养宜用选择培养基，需新鲜配制，倾注平皿后应密封保存于一定湿度的容器一周内用完。注意将标本的粘膜面在培养基上反复涂擦接种。2．培养在含有5％O2、10％C02、85％N2的微需氧和98％以上湿度的环境培养。3．鉴定根据形态和染色性,菌落特征；37℃生长，43％、25％不生长；氧化酶和过氧化氢酶均阳性、脲酶强阳性；对萘啶酸耐药、头孢噻吩敏感；在1％甘油和1％胆盐中

7、均不生长。4.快速脲酶试验是—种简便实用、快速敏感、较为准确可靠的诊断方法。脲酶试剂由尿素、基质、酚红指示剂等组成,将小块的活组织块放人装有尿素培养基瓶内，如培养基由黄变为红色为阳性，提示该菌脲酶已将尿素分解。5.抗体检测用血清学方法检测患者体内的抗HP抗体(IgG、IgM和IgA)系最常用的无创伤性诊断HP感染的方法。目前已有补体结合试验、胶乳凝集试验及酶联免疫吸附试验(ELISA)等，而以ELISA应用最为广泛，现有商品化的试剂盒，可用于检测患者血清中HP的菌体抗体或脲酶抗体。6.13C或14C标记尿素呼吸试验病人禁食一夜，进食用13

8、c或14c标记的尿素，HP产生的尿素酶分解脲素释放CO2，因此可测定病人呼吸中释放带有同位素的CO2量，如CO2含量超过标准，提示有HP存在。该方法敏感性与特异性均好。