酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留

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1、酶抑制法检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留以及对该检测方法的评价王志波（如皋市农产品质量检验测试中心226500）摘要：在人们广泛关注食品质量安全的今天，作为监控农产品质量安全的最直接的有效手段，蔬菜农药残留速测技术得到迅速发展。蔬菜农药残留速测法主要有酶抑制法和化学试剂速测法两种。它们都具有快速、简便、灵敏、成本低等特点。在基层监督部门、蔬菜生产基地及市场得到广泛应用。本文根据行业标准《NY／T448-2001》，利用酶抑制法和相关农残速测仪及配套试剂盒对我市主要批发市场、农贸市场、超市的蔬菜样品进行了检测。关键词：

2、质量安全；农药残留；速测；酶抑制Abstract：Theincreasingconcernonthefoodsecurityhasstimulatedthedevelopmentofmethodsforrapiddetectionofpesticideresidueswhichisthemostdirectandmosteffectivemeansofquality-safetymonitoringofagriculturalproducts.Themethodsofrapiddetectionofpesticideres

3、iduesonvegetables,includingenzymeinhibitionmethodandchemicalmethod,havebeenwidelyusedinprimaryregulationdepartments、vegetableproductionbasesandmarketsduetotheirsimple,rapid,sensitiveandlowcostingcharacters.Vegetablesamplescollectedfromwholesalemarkets、farmermarket

4、s、supermarketsweredetectedbyenzymeinhibitionmethodusingpesticideresiduesdetectorcoupledwithreagentsetaccordingtostandard(NY／T448-2001)inthispaper.Keywords:agriculturalproductssecurity;Pesticideresidues;rapidtest;enzymeinhibition1仪器与试剂1.1检测仪器RP－410速测仪，T－200型电子天平，电热

5、恒温培养箱，可调移液枪（10～100微升；1-5毫升），配套玻璃仪器及其它配件。1.2试剂配置PH=8的缓冲液，乙酰胆碱酯酶、底物、显色剂粉末分别加10毫升缓冲液配置成溶液，待用。2检测方法2.1检测原理根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理，而用在对农药残留的检测中。如蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类的农药残留或残留量较低，酶的活性就不会被抑制，试验中加入的基质就被酶水解或少部分水解，水解产物与加入

6、的显色剂反应产生颜色。反之，如果蔬菜的提取液中含有一定量的有机磷和氨基甲酸酯类农药，酶的活性就被抑制，试验中加入的基质就不能被酶水解，从而不显色或颜色变化很小，用分光光度计来测定反应前后吸光度的变化，计算出抑制率，就可以判断蔬菜中含有机磷和氨基甲酸酯类农药的残毒情况。2.2检测步骤取2g样品（非叶菜类取4g）切碎，放入提取瓶中，加入20毫升缓冲液，振荡2－3分钟，倒出提取液，静止5分钟，用移液枪移取3毫升提取液上清液于小试管中，加入50微升酶，50微升显色剂，混匀后于37－41℃下培养30min，再分别加入50微升底物，混

7、合后倒入比色皿中，于412nm波长下比色。对照测试：取3毫升缓冲液，其他步骤同样品测定，得出空白试验。2.3结果计算抑制率（％）＝(△Ac-△As)/△AsxlO0%式中△Ac：对照组3min后与3min前吸光度之差；△As：样本3min后与3min前吸光度之差。3结果与分析3.1检测结果判定抑制率＜70%，基本上不存在农药残留；抑制率≥70%，肯定存在有机磷或氨基甲酸酯类农药。抑制率一般在－10％～110%之间，一旦检测结果超出此范围，即说明操作过程中有失误的地方，需要重新检测。3.2检测结果分别对抽取生产基地和市场的青

8、菜、大白菜、生菜、菠菜、花菜、包菜、刀豆、豇豆、紫茄进行检测。检测结果见下表。3.2检测结果分析从检测结果来看，大白菜的抑制率为97.7％，大于70％，所以判定大白菜中肯定存在有机磷或氨基甲酸酯类农药。其余样品均为合格样品。本次检测的总体合格率为88.9％，总体情况较好。4评价酶抑制检测法操作简便、快速