《培养基及配制》PPT课件

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1、培养基种类成分配制技术第二章　培养基培养基的成分第一节3碳源和能源4植物激素1无机盐2有机物5琼脂6辅助物质1无机盐元素名称添加形式NKNO3,NH4NO3大量PKH2PO4NaH2PO4元素KKClKNO3(≥0.5mmol/L)CaCaCl2·2H2OMgMg2SO4·7H2OSFeFeNa2-EDTA微量BH3BO3元素MnMnSO4(≤0.5mmol/L)CuCuSO4MoNa2MoO4·2H2OClCaCl2·2H2O1）大量元素N是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，在植物生命活动中占有重要的位置。P是磷脂的主要成分。培养基中常用KH2PO4

2、NaH2PO4等。K对碳水化合物合成，转移，以及氮素代谢等有密切关系。Mg、S、Ca是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂，对核蛋白体结构具有稳定作用；S是含S氨基酸的蛋白质的组成成分。Ca是构成细胞壁的成分，对细胞分裂，稳定质膜结构有显著作用，此外，Ca及钙调素在细胞信号转导中起重要作用。2）微量元素在微量元素中，铁的使用最大，铁是一些氧化酶的组成成分。同时又是叶绿素形成的必要条件。由于培养基的pH较高，所以培养中几乎都使用不易分解的乙二胺四乙酸铁这种鳌合物来防止铁的沉淀。硼与蛋白质合成、糖类运输有着密切的关系；铜是某些氧化酶的成分，能够促进离体根的生长；锰参与植物的光合、呼吸

3、代谢；钼参与氮素的代谢；氯是光合作用水光解的活化剂。微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢的调节。NoMSsalts没有任何生长特征MSsalts0.47g.l-1长出更多的根MSsalts9.52g.l-1长大量的再生苗而无根**愈伤组织缺无机营养表现症状N----某些愈伤组织出现花青甙，没有导管形成N、P或K----细胞过度增大且形成层减少S----愈伤组织非常明显褪绿Fe----细胞分裂停止B----细胞分裂和细胞伸长迟缓Mg和Mn----影响细胞伸长培养基的成分第一节3碳源和能源4植物激素1无机盐2有机物5琼脂6辅助物质2有机物2.1维生素2.2肌醇2.4

4、氨基酸2.3天然复合物种类：硫胺素---维生素B1VB1吡哆素---维生素B6VB6烟酸---维生素B3Vpp抗坏血酸---维生素CVc以及B5、生物素、叶酸。浓度：0.1－1.0mg/L作用：VB1促愈伤组织产生，提高活力VB6促根生长Vpp与代谢和胚发育有关Vc防组织褐变2.1维　生　素2.2肌　醇促进愈伤组织生长、胚状体和芽的形成对组织细胞繁殖、分化的促进作用浓度100mg/L2有机物2.1维生素2.2肌醇2.4氨基酸2.3天然复合物椰乳：促愈伤组织和细胞培养，用量10～20%。使用注意茎尖大小。2.3天然复合物香蕉泥：对pH值缓冲大，用量150～200ml/L，应用在兰

5、花组培。水解酪(乳)蛋白：浓度100-200mg/L，多用于微茎尖培养。天然复合物马铃薯提取液：对pH值缓冲大，用量150-200g/L，使苗壮。其它：2.4氨基酸种类：甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、丝氨酸、丙氨酸、半胱氨酸以及酰胺类物质（如天门冬酰胺）和多种氨基酸的混合物（如水解酪蛋白、水解乳蛋白）等。注意：氨基酸类物质只有在含有无机氮的情况下，对离体组织生长才有较好的效果。培养基的成分第一节3碳源和能源4植物激素1无机盐2有机物5琼脂6辅助物质3碳源和能源种类：蔗糖或葡萄糖、果糖、砂糖等。蔗糖浓度：1-5%，胚培养为4-15%。注意：高压灭菌部分糖会分解。大生产时可用白砂糖。作用

6、：作为离体组织赖以生长的碳源使培养基维持一定的渗透压（一般在1.5-4.1MPa）蔗糖（0%）蔗糖含量（1%）蔗糖含量（5%）在外植体上既没有芽发生，也没有根和愈伤组织产生在外植体上表面边缘产生芽，也有一些根发生芽从外植体的上表面发生而根从下表面发生培养基的成分第一节3碳源和能源4植物激素1无机盐2有机物5琼脂6辅助物质4植物激素4.1.生长素类（1）种类IBA—吲哚丁酸；IAA—吲哚乙酸；NAA—萘乙酸；2,4-D---2,4-二氯苯氧乙酸使用效价：IAA

7、胞分裂和伸长。NAA和IBA常与细胞分裂素结合用于芽的增殖。（3）浓度0.05－5mg/L（4）配制生长素可溶解在稀NaOH中或溶于乙醇。4.2细胞分裂素（CTK）（1）种类：Kt---激动素BAP---苄氨基嘌呤2－iP---异戊烯腺嘌呤ZT-玉米素TDZ（2）作用：启动脱分化、细胞增殖，诱导愈伤组织芽分化、芽增殖，丛生芽。（3）浓度：0.05－10.0mg/L（4）配制：溶于稀酸或稀碱激素配比模式生长素与细胞分裂素：它们的比例决定着发育的方向，是愈伤组织、长根还是长芽。高：有利于根的形成