《培养基的配制灭菌》PPT课件

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1、环境微生物实验（四）MicrobiologyDepartmentCollegeofResource&EnvironmentLiyongTel:023-68250426E-mail:liyongwf@swu.edu.cn培养基的配制和灭菌实验目的实验材料实验方法实验作业实验目的了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的使用方法。熟悉微生物的有关准备工作及操作方法。实验材料药品：相关配方器材：高压蒸汽灭菌器其它：实验方法培养基的配制选择配方:称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅

2、匀，加热溶解。过滤：除去杂质。加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。调pH值：用NaOH或HCl调pH，用pH试纸对照。分装：注意不要污染棉塞。包扎成捆，挂上标签,注明何种培养基。灭菌备用：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠3g琼脂24g水1000mLpH7.2~7.4马铃薯蔗糖琼脂培养基去皮马铃薯200g（煮沸30min后过滤,用汁液）蔗糖20g自来水1000mL琼脂24gpH自然单倍乳糖蛋白胨培养液蛋白胨：10g牛肉浸膏：3gNaCl：5g乳糖：5g水：1000ml1.6％溴甲

3、酚紫乙醇溶液：指示剂pH：7.2分装试管;10ml/管，内放置倒置小管；同单倍乳糖蛋白胨培养液；浓度三倍；蛋白胨：10g*3牛肉浸膏：3g*3NaCl：5g*3乳糖：5g*3水：1000ml1.6％溴甲酚紫乙醇溶液：指示剂pH：7.2分装试管;10ml/管，内放置倒置小管；三倍乳糖蛋白胨培养液蛋白胨：10g乳糖：5g琼脂：24gK2HPO4：2g水：1000ml2%伊红：20ml0.5％美蓝：13ml注意：伊红和美蓝液单独分装灭菌，使用前再和其它成分混合使用；伊红美蓝鉴别培养基1组：牛肉膏蛋白胨培养基：1000mL斜面：40支×7mL其它：分装三角瓶(700ml)2组

4、：马铃薯培养基：500mL装入三角瓶中3组：单倍乳糖发酵培养基：600mL分装至试管60支；三倍乳糖发酵培养基：300mL分装至试管30支；4组：伊红美兰培养基：400mL分装至三角瓶中；其它准备材料：90mL无菌水：250mL三角烧瓶（加石子），精确加水90.0mL；塞上棉塞，包扎、灭菌备用；1个/组；试管无菌水：试管精确加水9.0mL，塞上棉塞，包扎、灭菌备用:（14支/组）；250ml空三角瓶：1个/组；灭菌后取样用；1mL无菌吸管:20-30支/组；10mL无菌吸管:1支/组。固体培养基加琼脂后加热溶化时要注意哪些问题？培养基中加琼脂的作用是什么？为什么？琼脂

5、的最有用特性是它的凝点和熔点之间的温度相差很大，其特点：具有凝固性，稳定性，能与一些物质形成络合物等物理化学性质，可用作增稠剂,凝固剂，悬浮剂，乳化剂，保鲜剂和稳定剂。干热灭菌、高压蒸汽灭菌有何不同（条件和对象）？