《转基因动物》PPT课件

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1、第三章转基因动物转基因鼠其他转基因动物:牛、猪、兔、禽、鱼体细胞克隆动物的意义和争议现代分子育种技术简单步骤将克隆的外源基因注射到一个受精卵的细胞核中接种后的受精卵移植到雌性受体的子宫，使其顺利完成胚胎发育；移植后的受精卵发育生长为后代，其中的部分后代其细胞中都携带有转入的外源基因；利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜或种禽，培育新的纯合体。转基因技术的定义转基因技术就是指利用分子生物学技术，将某些生物的基因转移到其它物种中，改造生物的遗传物质，使遗传物质得到改造的生物在性状、营养和消费品质等方面向人类需要的目标转变。转基因动物(transge

2、nicanimals)：用实验室方法将人们需要的目的基因导入其基因组，使外源基因与动物本身的基因整合在一起，并随细胞的分裂而增殖，在动物体内得到表达，并能稳定地遗传给后代的动物。转基因动物的研究历程1982年,英国Nature上发表Brinster和Palmiter利用转基因技术得到含有外源GH基因的超级小白鼠的消息,引起全世界轰动。1985年,美国人用转移GH基因、GRF基因和IGF1基因的方法,生产出转基因兔、转基因羊和转基因猪;同年德国Berm转入人的GH基因生产出转基因兔和转基因猪;1987年,澳大利亚利用注射牛GH基因的方法生产出转基

3、因猪。1987年,美国的Gordon等人首次报道在小鼠的乳腺组织中表达了人的tPA基因。1991年英国人在绵羊乳腺中表达了人的抗胰蛋白酶基因;1992年美国的Velander又报道在猪的乳腺中表达了人的C蛋白基因。转基因动物研究的应用促进动物生长、提高畜产品产量、改善产品品质利用转基因动物作为生物反应器动物品种改良建立诊断和治疗人类疾病的动物模型生产可用于人体器官移植的动物器官利用乳腺来生产药物蛋白“pharming”原因：①乳汁可以由乳腺不断的分泌，而且产量很高，长期收集也不会对动物造成伤害；②将新的药物蛋白限制在乳腺内生产，最后分泌到乳汁中

4、，一般不会对转基因动物的正常生理生活造成影响；③乳腺分泌的蛋白质是经过高等哺乳动物的翻译后加工的，这使得生产的药物蛋白更接近于人类自身的蛋白质；④乳汁中蛋白质纯化起来相对较为容易，而且在乳汁中含有的其他蛋白质也为数不多。第一节转基因鼠一、转基因鼠的研究方法逆转录病毒法DNA显微注射法胚胎干细胞细胞核移植克隆法酵母人工染色体法♀8细胞胚逆转录病毒外源基因植入代孕母鼠嵌合小鼠杂交、筛选纯合转基因小鼠1、逆转录病毒法通过逆转录病毒载体把基因整合到受体细胞核基因组中是最有效的方法之一。优点:无需要重排，可在整合点整合转移基因的单个拷贝；将胚胎置于高浓度

5、病毒容器中，或者与被感染的细胞体外共同培养，或微注射鸡胚盘里，整合有逆转录病毒的DNA的胚胎率高。缺点：①逆转录病毒载体容量有限，只能转移小片段的DNA（≤10kb），转入的基因一般没有其邻近的调控序列；②虽然载体在设计时缺失了复制功能序列，但是复制大量载体DNA所需的辅助病毒（heplervirus）基因组也可能与目的基因一起整合到同一细胞核中。转基因动物可以合成人们所需的产品，也可以大量复制病毒一般很少用逆病毒载体来制造用于商业生产的转基因动物。2、DNA显微注射法①向供体雌鼠注射怀孕母马的血清，48小时后再注射人的绒毛膜促性腺激素，使其超

6、量排卵，增加用于微注射接种DNA的受精卵数量。（经过处理的雌鼠一次可生产大约35个卵细胞，而正常雌鼠一次只能产生5－10个卵细胞）②这些雌鼠进行交配后把它们杀死，小心从输卵管中取出受精卵。③将外源基因注射入受精卵中。显微注射的基因通常为删除了原核载体序列的线性DNA；DNA显微注射要在精前核时注射才能有效，精前核比卵前核更大；④将25－40个受精卵用显微外科手术移植到假孕雌鼠的子宫内（造成雌鼠的假孕可以让它与切除了输精管的不育雄鼠交配）。⑤大约3周后，接受过注射的受精卵发育生长成幼鼠，由代孕母鼠产下。精前核卵细胞核特殊的DNA注射器负压固定管转

7、入大鼠生长激素基因的小鼠转基因减肥鼠Wnt10b基因在组织培养中抑制脂肪细胞形成,将Wnt10b基因连接到脂肪组织特异表达的FABP4启动子上，通过常规转基因技术获得转基因小鼠。聪明鼠1999年,美国普林斯顿大学钱卓博士在一群老鼠体内额外添加了一份NR2B基因。转基因鼠在学习与记忆能力方面要明显超过普通鼠。NR2B基因能控制产生一种名为NMDA的受体，该受体能够激活神经，帮助记忆。2001年,华盛顿大学医学院培育出一批相同的“聪明鼠”后发现，它们对于长期慢性疼痛的敏感度较高。结果意味着，有可能针对NMDA受体研制出新型止痛药，以缓解慢性疼痛。它

8、们对疼痛和伤害有更好的记忆能力，针对NMDA受体的药物有可能帮助记忆力衰退的老人增加记忆能力。检测：①取一段幼鼠的尾巴，提取DNA进行Southern