核转录因子NF-κB在兔慢性高眼压视网膜上的表达与其与细胞凋亡的关系

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1、重庆医科大学硕士研究生学位论文核转录因子NF．KB在兔慢性高眼压视网膜上的表达及其与细胞凋亡的关系摘要丑的探讨兔慢性高眼压视网膜上核转录因子NF．r,B(Nucleafactor-r,B)的表达及其与视网膜细胞凋亡的关系，为寻求临床上视功能保护的有效方法提供新的思路。方法健康新西兰大白兔51只，随机分为4组：正常组、慢性高眼压组(CH组)、慢性高眼压对照组(CH对照组)、慢性高眼压+PDTC干预组(CH+PDTC组)和慢性高眼压+PBS对照组(C}}卜PBS组)。除正常组(3只)外，另四组再按观察的时间点不

2、同，随机分为1周、2周、4周和6周组，每时间点各3只。从CH组、CH+PDTC组和CH+PBS组兔前房各抽出0．2ml房水后注入2％甲基纤维素溶液0．2ml建立慢性高眼压模型，同样方法予CH对照组兔前房注入平衡盐溶液0．2111l作为对照。CH+PDTC组和CH+PBS组同时分别行玻璃体腔注射NF．rB特异拮抗剂吡咯醛二硫氨基甲酸酯(PDTC)溶液和PBS溶液50ul，每周一次直至观察时间结束后摘除眼球，常规制备切片、HE染色、光学显微镜下观察视网膜形态学改变、免疫组织化学sP法观察NF．r,B的表达情况及

3、原位缺口末端标记法(TUNEL法)观察细胞凋亡情况。结果1．术后实验动物无严重眼部并发症出现。各组眼压在实验前无明显差异(P>0．05)，CH组、CH+PDTC组和CH+PBS组术后眼压均显著升高(P<0．01)2重庆医科大学硕士研究生学位论文并维持在较高水平。2．光镜下见CH组视网膜细胞损伤随高眼压时间延长逐渐加重，由I周时的神经纤维层变薄、神经节细胞固缩减少逐渐向视网膜外层累及，出现内、外核层细胞逐渐固缩消失形成空泡，视网膜全层萎缩变薄；CH对照组与正常组类似，未见明显视网膜损伤表现；CH+PDTC组各

4、时间段视网膜损伤较CH组相应时间段加重；CH+PBS组各时间段视网膜变化与CH组相似。3．NF．r．B在正常组视网膜少量表达。随慢性高眼压时间延长，NF．r．B在视网膜上的表达逐渐增强。l同时，CH组视网膜面密度值比正常组增高(P

5、网膜NF．KB表达强度在各相应时间段较CH组减弱。l周时面密度值与CH组1周时比较有显著性差异(P0．05)。CH对照组NF．出表达与正常组相似(P>0．05)。4．正常组视网膜几乎未见凋亡细胞。随着高眼压时间的延长，CH组视网膜凋亡细胞逐渐增多。l周时视网膜凋亡细胞主要出现于神经节细胞层，与正常组比较均有显著性差异(P

6、，与1周时相比有显著性差异(PO．05)。CH+PBS组视网膜细胞凋亡与CH组相似(P>O．0

7、5)。结论1．兔眼前房内注入2％甲基纤维素可建立良好的慢性高眼压动物模型。2．慢性高眼压所致视网膜损伤从内层逐渐向外层累及，由最初的神经纤维层变薄、神经节细胞减少逐渐加重最终导致视网膜全层萎缩变薄。3．慢性高眼压可致视网膜组织NF．r,B活化，并随高眼压时间延长其表达逐渐加强。4．慢性高眼压促使视网膜组织细胞发生凋亡，并随高眼压时间延长凋亡细胞逐渐增多。5．玻璃体腔注射NF．r,B特异拮抗剂PDTC后慢性高眼压视网膜上NF-r,．B表达明显减弱，但细胞凋亡明显增多。由此推测NF．r,B可能具有抑制慢性高眼压

8、视网膜细胞凋亡的作用。关键词：NF—r,B，视网膜，兔，慢性高眼压，细胞凋亡4重庆医科大学硕士研究生学位论文NUCLEARFACToR—KBEXPRESSIONONTHERETINAoFCHRONICOCULARHYPERTENSIONINRABBITSANDTHERELATIONSHIPBETWEENNUCLEARFACToR．KBANDCELLULARAPoPToSISABSTRACTobjeefiveToi