HCMVAD169突变株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞及其基因变异的研究

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1、分类号：R373.9密级：UDC：编号：学位论文HCMVAD169突变株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞及其基因变异的研究HCMVAD169mutantstraininfectedmouseembryonicfibroblastcellsinvitroandresearchitsgeneticvariation任鹏指导教师姓名王明丽教授安徽医科大学基础医学院陈敬贤教授安徽医科大学基础医学院申请学位级别硕士专业名称微生物学提交论文日期2012-04-25论文答辩日期2012-05-22学位授予单位和日期安徽医科大学答辩委员会主席龚镇奎研究员评阅人朱帆教授等2012年5月安徽医科大学硕士学位论文安徽医科

2、大学硕士学位论文论文题目HCMVAD169突变株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞及其基因变异的研究HCMVAD169mutantstraininfectedmouseembryonicfibroblastcellsinvitroandresearchitsgeneticvariation作者姓名任鹏指导教师王明丽教授陈敬贤教授学科、专业微生物学研究方向临床分子病毒学论文工作时间2010年9月至2012年3月2012年5月-2-安徽医科大学硕士学位论文学位论文独创性声明本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已

3、经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名：日期：学位论文使用授权声明本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名：导师签名：日期：日期：-3-安徽医科大学硕士学位论文目录英文缩略词表…………………………………………………………5中文摘要…

4、……………………………………………………………6英文摘要………………………………………………………………10前言……………………………………………………………………15材料与方法……………………………………………………………18结果……………………………………………………………………27讨论……………………………………………………………………41结论……………………………………………………………………45参考文献………………………………………………………………46附录一：测序结果……………………………………………………49附录二：个人简历……………………………………………………58附录三：致谢

5、…………………………………………………………59附录四：综述及参考文献……………………………………………60-4-安徽医科大学硕士学位论文缩略词表英文缩写英文全称中文全称bpBasepairs碱基对cDNAComplementaryDNA互补DNACPECytopathiceffect细胞病变效应DMEMDulbecco’sModifiedEaglesMedium改良Eagles培养液dNTPDeoxyribonucleosidetriphosphate脱氧核糖核苷三磷酸HCMVHumancytomegalovirus人巨细胞病毒HFHumanembryofibroblast人胚胎成纤维细胞M

6、FMouseembryofibroblast小鼠胚胎成纤维细胞mRNAMessageRNA信使RNAPBSPhosphate-bufferedsaline磷酸缓冲盐溶液PCRPolymerasechainreaction聚合酶链反应RT-PCRReversetranscriptionPCR逆转录PCRTCID50Tissuecultureinfectivedose50%组织细胞感染量rpmrevolutionperminute每分钟转数hHour小时dDay天minMinute分钟secSecond秒-5-安徽医科大学硕士学位论文中文摘要HCMVAD169突变株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞及其基

7、因变异的研究目的通过HCMV(humancytomegalovirus)AD169突变株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞，并对其UL55、UL74和UL75基因进行变异分析，研究其在病毒跨种属感染中的可能作用，为探索HCMV跨种属感染机制提供线索。方法将本实验室HCMVAD169突变株和HCMV临床分离株复苏增殖后采用TCID50法滴定病毒感染剂量。以100TCID50的剂量接种至BALB/c小鼠胚胎成