GB 9695.24-1990 肉与肉制品 胆固醇含量测定

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1、中华人民共和国国家标准GB9695.24一90肉与肉制品胆固醇含里测定Meatandmeatproducts-Methodfordeterminationofcholesterol1主题内容与适用范围本标准规定了肉与肉制品中胆固醇含量的测定方法。本标准适用于肉与肉制品中胆固醉含量的测定。2引用标准GB9695.1肉与肉制品游离脂肪含量的测定3原理肉与肉制品中的脂类经皂化后,胆固醉作为不皂化物被提取出来,并与一定量的内标物混合后一起注入气相色谱柱,求出胆固醇与内标物的峰面积比,根据工作曲线计算胆固醉的重量,以求得肉与肉制品中胆固醇

2、含量.4试剂所用水均为蒸馏水或相当纯度的水。4.1无水乙醚。4.2抓仿(GB682),4.31mol/L氢氧化钾(GB2306)/乙醇(GB678)溶液。4.4无水硫酸钠。4.5胆固醉:1.0mg/ml,氯仿溶液。4.6内标溶液:4.6.15-a胆幽烷/氯仿标准溶液:1.0mg/mL.4.6.2菜油醇/氯仿标准溶液:3.0mg/mL.4.6.3胆固醇与5-胆街烷混合液:上述两种标准液等体积混合。5仪器和设备5,1实验室常规仪器。5.2气相色谱仪,配有FID检测器。6试样按照GB9695.1得到的脂肪。分析步骤7.1不皂化物的提取

3、称取1.00g脂肪,置于10mL容量瓶中用氯仿定容并摇匀。准确量取该试液1--5mL,置于25mL国家技术监督局1990一11一15批准1991一10一01实施GB9695.24一90具塞试管中,准确加入0.5^1mL内标物溶液(4.6.1),然后将氯仿蒸干。加入1mol/L氢氧化钾溶液5mL,装上冷凝管,在8595℃水浴上缓缓皂化1h。取下冷却至室温,全部移入50mL分液漏斗中,用水10mL洗具塞试管,洗液并入分液漏斗,加乙醚10mL轻轻振摇,静置分层后,将水相放入原试管中,加乙醚10mL振摇,待分层后,将乙醚移入分液漏斗内。

4、再用10mL乙醚提取一次,此时分液漏斗中共有30mL溶液。用水2-3mL洗涤乙醚液,分层后,弃去水相,用无水硫酸钠log干燥后,将乙醚层移入另一具塞试管中,通氮气吹干后,加入乙醇1mL,了.2色谱条件7.2.1色谱分离条件选择:对胆固醉峰要求其理论塔板数不少于1600;胆固醇与菜油醇二者峰分辨率不小于2.2;胆固醇的保留时间在8^-12min之间;胆固醇峰强度为满量程的0.25-0.5.7.2.22%ov-1/chromosorbW(60-80目)"3mmX2m,7.2.3柱温:260'C。7.2.4进样口及检测器温度:300'

5、Co7.2.5载气(高纯氮)流速:60mL/min,7.3工作曲线制作7.3.1不同配比的胆固醇与5-a胆菌烷混合标准液:序号12345678胆固醉,mg0.550.881.100.550.881.101.10z.205-胆w烷,mg0.55C.550.551.100.101.101.151.55以表中所列举的不同组合的胆固醉标准液和5-a胆w烷混合样品置于具塞试管中.将溶剂通氮气吹干后,加入1mL乙醇,取1-3匹注人色谱柱中。从所得到气相色谱图求出胆固醇和5-a胆w烷各峰的面积比,以峰面积比为纵坐标,质量比为横坐标,制作工作曲

6、线,此线斜率的倒数为k值。7.3.2试样的气相色谱分析。8分析结果的计算X一A,/As杀kxNSXfat%X100式中:X-一样品中胆固醇含量,mg八00g;击-一胆固醉的峰面积;A,--5-a胆w烷的峰面积;k-一由工作曲线求得的胆固醉和5-a胆W烷的质量比与峰面积比的比值;环-.—脂类试样中添加的内标物的质量,mg;fat%一样品中脂肪的含量;W-一脂肪质量,9。当符合允许差的要求时,取两次测定的算术平均值作为结果,精确至。.1mg八00ge9允许差同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过平均值的l00o.GB9695.

7、24一90附加说明:本标准由中华人民共和国商业部提出。本标准由中国肉类食品综合研究中心归口。本标准由中国肉类食品综合研究中心负贵起草。本标准主要起草人鲁红军、刘小东、蒲健。

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