HIV衣壳蛋白P24在临床检测中的研究进展

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1、万方数据基础医学垫盟_Q：≥!CHINAFOREIGNMEDICALTREATMENTHIV衣壳蛋白P24在临床检测中的研究进展肖艳芬(广西中医学院广西南宁530001)【摘要l本文就HIV衣壳蛋白P24的生物学特性．免疫反应．检测手段．临床应用及麦苗研究进展等方面进行了阐述，分析了P24蛋白在对HIV研究中的作用及其优缺点。l关键词lHIV’P24蛋白临床捡潮【中图分类号lR91l文献标识码lAI文章编号l1674--0742(2009)11(a)--0021--03获得性免疫缺陷综合征(Acqu砌ImmunodificiencySyndrom，AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(

2、HumanImmunodificiencyVirus，HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染机体后，P24蛋白作为抗原很快可在血浆中查出，可作为HIV早期感染的重要标志。目前，国际上已广泛应用第四代HIV诊断试剂盒，联合检测抗HIV抗体与P24抗原，从而缩短了HIV感染的检测窗口期。此后，ThoaiDuongLy掣1l又证实在此基础上联合检抒111P24抗原与抗体优干单纯检测特异性P24抗原的方法。可见，对P24抗原的持续研究将会在临床上产生更广泛的实际应用价值。1P24蛋白的生物学特性．成熟的HIV病毒颗粒由核·L、RNA、蛋白质衣壳，以及最外层的包膜构成。其中蛋白

3、质衣壳仅由P24蛋白组成，是结构基因gag的产物。gag编码55kD的GAG蛋白P55，在病毒成熟时被病毒所编码的蛋白酶H裂解成产生衣壳蛋白P24。P24主要由3个N一末端功能区(ASI～15I)和一个C～末端功能区(AS146—231)共同构成，形成7个c【～螺旋，2个B～片层及1个单环结构‘引，P24在成熟的HIV病毒颗粒中形成由约1200个壳微粒构成的内衣壳，包绕在病毒核心外，形成牢固的锥形外壳[3l。此外，由于gag基因序列的保守性，其形成的P24蛋白氨基酸序列在HIV各毒株之间高度保守也呈高度保守，因此可以作为抗原应用干HIV感染的检测。2P24蛋白的免疫学特性HIV感

4、染者在感染早期即可产生强烈的针对P24的CD4+Tcell介导的免疫应答，产生特异性的高亲和力抗体，这种抗体不因为病毒本身的高度变异而失去对P24抗原保守区域的高亲和力¨I。这种高亲和力的抗体还可干扰MHC～Ⅱ分子对抗原的处理与呈递，并且抑制CD4+Tcell增殖。JasonG等bI通过实验表明，从艾滋病病人外周血中可提取出两种抗P24的特异性抗体：抗体1571和抗体241～D，抗体157l能对CD4+Tcell的增殖有强抑制效应，抗体241～D的抑制作用的则较弱，两种抗体识别的抗原表位都存在于P24的N～末端，而抗体1571对T细胞抗原表位的识别效应则完全叠加于抗体241～D与

5、P24邻接区域的结合之上，研究并表明抗-P24抗体的产生可削弱CD4+Tcell对HIV的免疫应答。细胞介导的免疫应答则直接针对HIV蛋白，CD8+T细胞可识另llenv、pol、gag等基因的编码产物，活化的CD8+T细胞可以杀伤病毒感染的细胞，从而起清除病毒的作用，是机体防止病毒复制、增殖、传播的主要效应细胞。研究表明，与CD4+T细胞一样，CD8+T细胞同样对GagP24抗原发生免疫应答，但在对抗原肽A5、C6、C11和C12的反应则只有抗原特异性的CD8+T细胞发生应答而CD4+T细胞并不参与反应，并且这种反应是在HLA～I各等位基因的参与下发生，从而验证了P24抗原在效

6、应性CD8+T细胞活化过程中的作用【61。3P24蛋白的临床检测HIV／AIDS的实验室检测方法包括HIV抗体、病毒载量、CD4+T淋巴细胞，P24抗原检测等。目前对艾滋病感染者的初筛往往是采用检j贝lJHIV抗体的方法，但是这种方法存在6～8周的窗口期[7]，增加了对早期检出的难度，尤其是处于窗El期的供血者；此外，HIV阳性孕妇所产下的婴儿，由于母亲的IgG抗体可以通过胎盘进入胎儿体内，因出现“假阳性”而。干扰婴儿感染者的检出；以上两种不足除可以使用核酸检测法外，还可以使用检测P24抗原的方法弥补。3．1P24蛋白检测的基本原理与方法P24抗原检测的基本方法为ELISA法，其

7、依据是双抗体夹心原理。此法的优点是价格便宜，缺点是灵敏度与特异性均有不足，并有假阳性结果的出现。为提高检测的灵敏度，可以通过改进标准的方法或设计新方法，以提高阳性检出率，如加入链亲合素～生物素放大系统、免疫复合物解离分析、EIA、免疫吸附电镜和流式细胞仪技术等。SutthentR等f8I发现采取酶标记抗原斑点试验(EnzymeLabelledAntigenSpotTest，ELAST)能显著提高ELISA实验的敏感度和特异度，其测定血浆P24的范围为0．5～80pg／mL。在针对